具有抑癌功能的新的人蛋白及其编码序列的制作方法

专利名称：具有抑癌功能的新的人蛋白及其编码序列的制作方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及新的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸和此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。
背景技术：
人基因组学研究目前是国际上的热点，除人染色体DNA大规模测序，表达序列测序(EST)的方法外，还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。
癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤，目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此，本领域迫切需要开发研究具有抑癌功能的人蛋白及其激动剂/抑制剂。

发明内容
本发明的目的是提供一类新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。
本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。
本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。
在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35、38；或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
较佳地，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35、38。
在本发明的第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性(a)编码上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35、38。更佳地，该多核苷酸的序列选自下组SEQ ID NO3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36、39的编码区序列或全长序列。
在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。
在本发明的第四方面，提供了制备具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制备方法，该方法包含(a)在适合表达具有抑癌功能的蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。
在本发明的第五方面，提供了与上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续10个核苷酸至全长核苷酸，较佳地它含有连续的约10-800个核苷酸。
在本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。
本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。
具体实施例方式
3T3细胞是一种小鼠成纤维细胞(J.Cell.Biol.，17299，1963)(也称为NIH/3T3细胞)。在癌症研究领域中，常将外源基因(尤其是人基因)引入3T3细胞，观察其对3T3细胞生长的影响情况。通常认为，对3T3细胞生长有影响的基因是癌症相关基因，其中对3T3细胞生长有抑制作用的基因大多是抑癌基因，而对3T3细胞生长有促进作用的基因大多是(原)癌基因。
本发明采用大规模cDNA克隆转染小鼠胚胎成纤维细胞，在获得具有抑癌作用的基础上，经测序证明为新的基因，进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明，本发明的具有抑癌功能的蛋白对3T3细胞具有抑制克隆形成的作用，其抑制率≥50％。
如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。
如本文所用，“分离的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有抑癌功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。
本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。
本发明还包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。
本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以PP10513蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO3所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”对于PP10513而言是指编码具有SEQ ID NO2的蛋白质，但与SEQ ID NO3所示的编码区序列有差别的核酸序列。再以PP10764蛋白为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO6所示的编码区序列相同或者是简并的变异体；“简并的变异体”对于PP10764而言是指编码具有SEQ ID NO5的蛋白质，但与SEQ IDNO6所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于本发明的其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。
编码成熟多肽的多核苷酸包括只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。
术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。
本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。
本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95％以上，更好是97％以上时才发生杂交。并且，可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO2所示的成熟多肽有相同的生物学功能(以PP10513蛋白为例)和活性。
本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。
本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地被纯化至均质。
本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如，用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列，和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。
编码具有抑癌功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得1)从基因组DNA分离双链DNA序列；2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。
当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时，DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时，DNA序列的直接化学合成是不可能的，选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录，形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术，试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook，et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold SpringHarbor Laboratory.New York，1989)。还可得到商业供应的cDNA文库，如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时，即使极少的表达产物也能克隆。
可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于)(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交；(2)标志基因的功能出现或丧失；(3)测定具有抑癌功能的蛋白的转录本的水平；(4)通过免疫学技术或测定生物学活性，来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用，也可多种方法联合应用。
在第(1)种方法中，杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源，其长度至少15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸。此外，探针的长度通常在2kb之内，较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素，荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。
在第(4)种方法中，检测具有抑癌功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法，放射免疫沉淀法，酶联免疫吸附法(ELISA)等。
应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki，et al.Science 1985；2301350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。
如上所述得到的本发明的基因，或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS，1977，745463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列，测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列，才能拼接成全长的cDNA序列。
本发明也涉及包含本发明多核苷酸的载体，以及用本发明载体或具有抑癌功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞，以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。
通过常规的重组DNA技术(Science，1984；2241431)，可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有抑癌功能的蛋白多肽。一般来说有以下步骤(1).用本发明的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体)，或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞；(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞；(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。
本发明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg，et al.Gene，1987，56125)；在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans，J Bio Chem.2633521，1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之，只要能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。
本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有抑癌功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook，et al.)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上，以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有大肠杆菌的1ac或trp启动子；λ噬菌体PL启动子；真核启动子包括CMV立即早期启动子、早期和晚期SV40启动子、反转录病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。
此外，表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP)，或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。
包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质。
宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如哺乳动物细胞。代表性例子有大肠杆菌，链霉菌属；鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞；真菌细胞如酵母；植物细胞；果蝇S2或Sf9的昆虫细胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。
本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时，如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子，通常大约有10到300个碱基对，作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。
本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。
用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时，能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获，用CaCl2法处理，所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl2。如果需要，转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法磷酸钙共沉淀法，常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。
获得的转化子可以用常规方法培养，表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞，培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后，用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子，将细胞再培养一段时间。
在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要，可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。
重组的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于)直接做为药物治疗具有抑癌功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病，和用于筛选促进或对抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如，抗体可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表达的重组具有抑癌功能的人蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。
本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有抑癌功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有抑癌功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能，而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。例如，能在药物的存在下，将哺乳动物细胞或表达具有抑癌功能的人蛋白的膜制剂与标记的具有抑癌功能的人蛋白一起培养。然后测定药物提高或阻遏此相互作用的能力。
具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有抑癌功能的人蛋白结合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的产生，或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。
在筛选作为拮抗剂的化合物时，可以将本发明蛋白加入生物分析测定中，通过测定化合物影响具有抑癌功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法，可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。
本发明的多肽可直接用于疾病治疗，例如，各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。
本发明的多肽，及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术，三瘤技术，人B-细胞杂交瘤技术，EBV-杂交瘤技术等。
可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。
本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒，容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起，可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示，该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外，本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。
药物组合物可以以方便的方式给药，如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有抑癌功能的蛋白以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素，如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。
具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有抑癌功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有抑癌功能的蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。重组的基因治疗载体可用于治疗具有抑癌功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有抑癌功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有抑癌功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook，etal.)。另外重组具有抑癌功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。
抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子，其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得，如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性，可用多种方法对其进行修饰，如增加两侧的序列长度，核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。
多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。
本发明的多肽还可用作肽谱分析，例如，多肽可用物理的、化学或酶进行特异性切割，并进行一维或二维或三维的凝胶电泳分析。
本发明还提供了针对具有抑癌功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于)多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。这些抗体可用常规方法制备。抗具有抑癌功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的具有抑癌功能的人蛋白。
与具有抑癌功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记，注入体内可跟踪其位置和分布。本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有抑癌功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以刺激或阻断具有抑癌功能的人蛋白的产生或活性。
抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，红豆碱等)共价结合。
多克隆抗体的生产可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫动物，如家兔，小鼠，大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。
具有抑癌功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler and Milstein.Nature，1975，256495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al，PNAS，1985，816851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.PatNo.4946778)也可用于生产抗具有抑癌功能的人蛋白的单链抗体。
能与本发明蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时，必须对具有抑癌功能的人蛋白分子进行标记。
本发明还涉及定量和定位检测具有抑癌功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解释具有抑癌功能的人蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。
具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有抑癌功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有抑癌功能的蛋白的异常表达。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有抑癌功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有抑癌功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有抑癌功能的蛋白的转录产物。
检测具有抑癌功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有抑癌功能的蛋白相关的疾病。具有抑癌功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。
本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。这些序列会特异性地针对某条人染色体具体位置且并可以与其杂交。目前，需要鉴定染色体上的各基因的具体位点。然而现在只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色体位置。为了将这些序列与疾病相关基因相关联。第一步就是将本发明DNA序列定位于染色体上。
简而言之，根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp)，可以将序列定位于染色体上。然后，将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。
体细胞杂合细胞的PCR定位法，是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物，通过类似方法，可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选，从而构建染色体特异的cDNA库。
将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH)，可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述，参见Verma等，Human Chromosomesa Manual of BasicTechniques，Pergamon Press，New York(1988)。
一旦序列被定位到准确的染色体位置，此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如，V.Mckusick，Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析，确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。
接着，需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变，而该突变在任何正常个体中未观察到，则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体，通常涉及首先寻找染色体中结构的变化，如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。
本发明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。
一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。
此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。
目前，已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。
此外，由于本发明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，与来源于其他物种的同族蛋白相比，预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆实验室手册(New YorkCold Spring Harbor LaboratoryPress，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1cDNA基因的获得及对小鼠NIH/3T3细胞克隆形成的抑制作用PP10513、PP10764、PP12100、PP12488、PP12494、PP12901、PP13275、PP13296和PP14214是通过用常规方法构建人胎盘cDNA文库获得的；FP497、FP585、FP588和FP757是通过用常规方法构建人胎儿cDNA文库获得的。取3、6、9月龄的胎盘组织(PP克隆)或胎儿组织(FP克隆)，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXRcDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞，获得了1×106cfu/μg滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆，其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑制癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针，杂交筛选cDNA文库，挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen 96孔板质粒抽提试剂盒，按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染小鼠NIH/3T3细胞。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μl H2O溶解，待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液，混匀后，室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液，均分加入3孔生长于96孔板的小鼠NIH/3T3细胞中，37℃放置2小时，每孔再加50μl无血清培液，37℃24小时。每孔换100μl全培液，37℃24小时，换含G418的全培液100μl，37℃24-48小时，边观察，边换G418浓度不等的培液。约2-3次后，直到镜检细胞有克隆形成，计数。发现上述克隆有抑制细胞克隆形成作用，结果如下表所示。
cDNA克隆转染细胞(3T3)克隆形成情况

对cDNA克隆采用双脱氧终止法，在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，确定为新基因克隆，进行另一端测序，仍未获得全长cDNA序列，设计引物，再次进行测序，直到获得全长序列(SEQ ID NO1、4、7、10、13、16、19、22、25、28、31、34、37)。
实施例2从胎盘或胎儿cDNA中PCR获得全长基因和重组蛋白的表达取3、6、9月龄的胎盘组织(PP克隆)或胎儿组织(FP克隆)，用Trizol试剂(GIBCOBRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反转录酶在42℃进行反转录反应，获得胎盘或胎儿cDNA。利用各个基因的特异引物(如下表所示)，按97℃3’1个循环。94℃30″ 60℃30″ 72℃1’35个循环，72℃10’1个循环进行PCR扩增，获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证，与实施例1测得的序列相符，随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞，获得重组蛋白(SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35、38)。
基因特异引物

实施例3cDNA克隆序列分析1.PP10513A核苷酸序列(SEQ ID NO1)长度1494个碱基1 GAGAGAGAGC GAGAGAGAGA GAGAGAGAGA GAGAGAGAGA GAGAGAGAGA GAGAGCCTCC61 TTGGCAGACT GGGACACCAA CGCCTCTTCC CTCTTGGGCT GACACCGAGC TGTAAATGTC121 AGTGGACATT TAAATACTGC GGTTACACAT TCGATGTCCT GTCTGCAATG GAGCCGGGTT181 CTGTAAACAT AAGCTGCATG GCGAAATCGG ATCATCATCG CCCATCAAGC TCTTTGGCAG241 CAGTGCTGTA ATCAGTGCAA ACATTTATTT ATATAAATGC TCCCATCCCC TCGGCATGAA301 GATATACTTA GGCTCTCTCA ATGGACAGCC ACGCCACAAG CCCAGGAATG AGAGCTTGTC361 AGATACTGAG GCTGTTTTCA GAGCCAGTGT TCGGCTGAAG TGGCACAGAA GCTATCATTG421 TTTGCAAATC TCTGCTGCTT GTCAAGCCAC AGGGTTAAGT AACCCCGGAT GTTGCGAACA481 CTCTGAAGTG CTGACCTGCA GTGTCTTTTT GGATCACTGA GCCCTCAGGC AGACAGGCTG541 TACGTGGCCG ACACGTCATG GCTGCTGTCT TGCACTTAAC CCTCTTTATC TTTAGACCTT601 GATTGTGCAC CTGTTTCTCA TTGGAAGCTA ATGACAATCC ACGAAGCGGC TTGGCAGTGA661 CTTGTCTCTT GATTGTGTAA GGAGGGGTTG CCACATTCAC CCATGTTGTT GACTTTCAAC721 TGTACACTTG AAAACGTCAA AAGTCAGAGT AAGCATTGCC TCATGTCTCC GAGTGTAGCA781 ATTCTAGGAA AACTCTTCCG AATGGGTTTA AAGTCAAACA AATCCAATCA AAACAGACTT841 GCAGGGCCAG GCAGCGGTGG CTCATGCCTG CAATCCCAGC ACTTTGGGAA GCCAAGGTGG901 GCAGATCACT TGAGGTCAGG AGTTGGAGAC CAGCCTGGCC AACGTGGTGA GAGCCCATCT961 GTACTAAAAA TACAAAAATT TGCTGAGCCT GGTGGCAGGC GCCTGTAGTC TCAGCCTCCC1021 GAGTGGCTGG GACTACAGGC ACATGCAACC ACACCCGGCT CATGTTTTGC ATTTTTAGTA1081 CAGACCGGGT TTCACCGTGT TGGCCAGGAT CGTCTTGATA TCGTGACCTC GTGAACCGCC1141 CGCCTTGGCC TCCCAAAGTG CTGGGATGAC AGGTGTGAGA GTTCAGCAGT ATTAACTACA1201 TTCATGTTAA TGATGCGACC ATCACCAACA TTCATTTCCA GAACACTCTG TCCCCAGTAA1261 ACAACATGTC CCCGTTCCTC CCAGCCACTG GTACCTACCA TTCTACTTTC TGTTTGTATA
1321 AACTTGACAA CTCTAGGGTC CTCATATAAG TGGAATCCAG CTGGGCCCAG TGGCTCACAC1381 CTGTCATCCC GGCACTTTGG GAGGCCGAGG TGGGTGGATC ACGAGGTCAG GAGATTGAGA1441 CCATCCTGGC CAATATGGGG AAACCCCGTC TCTACTAAAA AAAATAAAAA AAAAB核苷酸序列(SEQ ID NO2)长度101个氨基酸1 MLLTFNCTLE NVKSQSKHCL MSPSVAILGK LFRMGLKSNK SNQNRLAGPG SGGSCLQSQH61 FGKPRWADHL RSGVGDQPGQ RGESPSVLKI QKFAEPGGRR LC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO3)克隆号和蛋白名称PP10513起始编码子703 ATG 终止编码子1006 TAG 蛋白质分子量10947.08(注(1)给出的是起始和终止编码子第一个核苷酸的位置，(2)分子量单位是道尔顿。)1 GAG AGA GAG CGA GAG AGA GAG AGA GAG AGA GAG AGA GAG AGA GAG AGA 4849 GAG AGA GCC TCC TTG GCA GAC TGG GAC ACC AAC GCC TCT TCC CTC TTG 9697 GGC TGA CAC CGA GCT GTA AAT GTC AGT GGA CAT TTA AAT ACT GCG GTT 144145 ACA CAT TCG ATG TCC TGT CTG CAA TGG AGC CGG GTT CTG TAA ACA TAA 192193 GCT GCA TGG CGA AAT CGG ATC ATC ATC GCC CAT CAA GCT CTT TGG CAG 240241 CAG TGC TGT AAT CAG TGC AAA CAT TTA TTT ATA TAA ATG CTC CCA TCC 288289 CCT CGG CAT GAA GAT ATA CTT AGG CTC TCT CAA TGG ACA GCC ACG CCA 336337 CAA GCC CAG GAA TGA GAG CTT GTC AGA TAC TGA GGC TGT TTT CAG AGC 384385 CAG TGT TCG GCT GAA GTG GCA CAG AAG CTA TCA TTG TTT GCA AAT CTC 432433 TGC TGC TTG TCA AGC CAC AGG GTT AAG TAA CCC CGG ATG TTG CGA ACA 480481 CTC TGA AGT GCT GAC CTG CAG TGT CTT TTT GGA TCA CTG AGC CCT CAG 528529 GCA GAC AGG CTG TAC GTG GCC GAC ACG TCA TGG CTG CTG TCT TGC ACT 576577 TAA CCC TCT TTA TCT TTA GAC CTT GAT TGT GCA CCT GTT TCT CAT TGG 624625 AAG CTA ATG ACA ATC CAC GAA GCG GCT TGG CAG TGA CTT GTC TCT TGA 672673 TTG TGT AAG GAG GGG TTG CCA CAT TCA CCC ATG TTG TTG ACT TTC AAC 7201 Met Leu Leu Thr Phe Asn 6721 TGT ACA CTT GAA AAC GTC AAA AGT CAG AGT AAG CAT TGC CTC ATG TCT 7687 Cys Thr Leu Glu Asn Val Lys Ser Gln Ser Lys His Cys Leu Met Ser 22769 CCG AGT GTA GCA ATT CTA GGA AAA CTC TTC CGA ATG GGT TTA AAG TCA 81623 Pro Ser Val Ala Ile Leu Gly Lys Leu Phe Arg Met Gly Leu Lys Ser 38817 AAC AAA TCC AAT CAA AAC AGA CTT GCA GGG CCA GGC AGC GGT GGC TCA 86439 Asn Lys Ser Asn Gln Asn Arg Leu Ala Gly Pro Gly Ser Gly Gly Ser 54865 TGC CTG CAA TCC CAG CAC TTT GGG AAG CCA AGG TGG GCA GAT CAC TTG 91255 Cys Leu Gln Ser Gln His Phe Gly Lys Pro Arg Trp Ala Asp His Leu 70913 AGG TCA GGA GTT GGA GAC CAG CCT GGC CAA CGT GGT GAG AGC CCA TCT 96071 Arg Ser Gly Val Gly Asp Gln Pro Gly Gln Arg Gly Glu Ser Pro Ser 86961 GTA CTA AAA ATA CAA AAA TTT GCT GAG CCT GGT GGC AGG CGC CTG TAG100887 Val Leu Lys Ile Gln Lys Phe Ala Glu Pro Gly Gly Arg Arg Leu *** 1021009 TCT CAG CCT CCC GAG TGG CTG GGA CTA CAG GCA CAT GCA ACC ACA CCC10561057 GGC TCA TGT TTT GCA TTT TTA GTA CAG ACC GGG TTT CAC CGT GTT GGC11041105 CAG GAT CGT CTT GAT ATC GTG ACC TCG TGA ACC GCC CGC CTT GGC CTC11521153 CCA AAG TGC TGG GAT GAC AGG TGT GAG AGT TCA GCA GTA TTA ACT ACA12001201 TTC ATG TTA ATG ATG CGA CCA TCA CCA ACA TTC ATT TCC AGA ACA CTC12481249 TGT CCC CAG TAA ACA ACA TGT CCC CGT TCC TCC CAG CCA CTG GTA CCT12961297 ACC ATT CTA CTT TCT GTT TGT ATA AAC TTG ACA ACT CTA GGG TCC TCA13441345 TAT AAG TGG AAT CCA GCT GGG CCC AGT GGC TCA CAC CTG TCA TCC CGG13921393 CAC TTT GGG AGG CCG AGG TGG GTG GAT CAC GAG GTC AGG AGA TTG AGA14401441 CCA TCC TGG CCA ATA TGG GGA AAC CCC GTC TCT ACT AAA AAA AAT AAA14881489 AAA AAA 14942.PPl0764A核苷酸序列(SEQ ID NO4)长度1598个碱基1 GTGCTCCTGT CTTCTGCTCC TCTAGTGAGC CATTCCTCTC CCTTGGAATT CATCAGAGTC61 ATCCCTGTAG AGCCCCCTTC CTGCCTCTCA ATTCCTCCTG CCTCACTTCC CAGGCTACTG121 CTGCTTCAAG ACAGTGACGT TTCTCTCCGG TCAGCTGTCA GGAGCGCTGG TGAGCTTCCT181 ACTGTGCCAC AAGGTGCGGG TGCTGGAGAC ACAGCTGAGC CTGGAAATGA GAGTGGGCAT241 CGCCGTGGTC ATCATGACTC CTCTGCGGCG TGGTCACCAT GTTGGTTCAC TGTGTTGGGC301 TCTTATTGAC GGGTCTCCTG CTAGGCCTGA CCTTGGGTGC CGGAGCCCTG CTGGCTTCTG361 AGCCTATCTA CCAACCACCT TCAGCCTGGG TGCCAGCTGG GGGGCTGGTG GGGCTGGCGC421 TGCTGGGAGC CCTGCTCACA CTTCGGTGGC CACGTCCATT CACAGTTCTG GGCACAACCC481 TGCTGGGTTC TGCAGTGCTT GTGGCCTGTG TTGACTACTT CCTGGAGGGG CTGGCACTGG541 GGAGTTGGCT GGGCCAACGC CTGCAGACAC TTCCAGCCTT GCCTTCTCTC TGCTGATATA601 GCTGGGTCTT ACTGGGGATC TGGCCAGCCT TGGGGGCCCT TGGAGCCCTG GCCCAGTGGA661 AGCTCGTGCC TGAGGAACAT GGAGGCCACG CTAATGAGTT ACTTCCAGAG TCTTCAAGAG721 TGCCAACTGG GACCAGGACC CCAGACCACA GCCCCCCACA CCGTCCTGGA CCTGGATTCT781 GACTGTGGTT CCACTGTACC CCTCACCTTA ATCTCTGGTT CTAACCAGAC CTGAGCCTAG841 ACTTCCACTT TTTCCCTTAC CCCTGTGAGG GCCTGGGAAC AGTAGGTGGG CAGGGTTTGA901 GCCCACAGGA CCTGCACACA AACTTCCCCA CCTCTTGGAC TTGGGGACAG GATCTGTGCC961 TCAACCCAGA CCAGCTTTGT AGGGATATGT TCCAAGAACA GAGAAGAGTC TTATGGGGAA1021 GGGGGAGGAA GGGAAGTATG AATATTTACC TCTGACCAAT AATAGAGGTG CCCTGGTCCC1081 CAAAGAAATT GACTCCCGAA TTCCCTCCAA GCCTTACCCA TATAGCTTTT GTTTGTTTGT1141 TTGTTTTCAG ACAAGGTCTT GTTCTGTCCA GTGCCGTGGC GTGACCACAG CTCATGACAA1201 CTTTGATTTC CCCGGCCCAA GCGAGCCTCT CATTCAGCCT CCTGAGTGGC TGGGACCACA1261 GACGCCACAC ACAGCTAATT TTTATGTATT CGTTTTTATT TTTTTGCAGA GACAGGGTCT1321 CCCTATGTTG CCCAAGCTGG TCTTGAACTC CTGGGCTCAA GTGATCCTCC TGCTTCAGCC1381 TCCCAAAGTG CTAGGATTAT AGCCACCGCA CCTCGTCTTG AAATAGCCTT TTAAATGTTC1441 ACCTCAGCTT GCCTCACAGT GGGTCTGTTC CTGGTTTCCC AGATGCATAA AGGAAGACAT1501 ATCCCTCCCC TGGGCAGCAA GGCTACAATG GGAGGGAGGG AGAACATGGG AGCATGTGAA1561 TAAAATGGCA TTAAATACTG AAAAAAAAAA AAAAAAAAB核苷酸序列(SEQ ID NO5)长度129个氨基酸1 MGKGEEGKYE YLPLTNNRGA LVPKEIDSRI PSKPYPYSFC LFVCFQTRSC SVQCRGVTTA61 HDNFDFPGPS EPLIQPPEWL GPQTPHTANF YVFVFIFLQR QGLPMLPKLV LNSWAQVILL121 LQPPKVLGLC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO6)克隆号和蛋白名称PP10764起始编码子1013 ATG 终止编码子1400 TAG 蛋白质分子量14581.281G TGC TCC TGT CTT CTG CTC CTC TAG TGA GCC ATT CCT CTC CCT TGG4647 AAT TCA TCA GAG TCA TCC CTG TAG AGC CCC CTT CCT GCC TCT CAA TTC9495 CTC CTG CCT CAC TTC CCA GGC TAC TGC TGC TTC AAG ACA GTG ACG TTT 142143 CTC TCC GGT CAG CTG TCA GGA GCG CTG GTG AGC TTC CTA CTG TGC CAC 190191 AAG GTG CGG GTG CTG GAG ACA CAG CTG AGC CTG GAA ATG AGA GTG GGC 238239 ATC GCC GTG GTC ATC ATG ACT CCT CTG CGG CGT GGT CAC CAT GTT GGT 286287 TCA CTG TGT TGG GCT CTT ATT GAC GGG TCT CCT GCT AGG CCT GAC CTT 334335 GGG TGC CGG AGC CCT GCT GGC TTC TGA GCC TAT CTA CCA ACC ACC TTC 382383 AGC CTG GGT GCC AGC TGG GGG GCT GGT GGG GCT GGC GCT GCT GGG AGC 430431 CCT GCT CAC ACT TCG GTG GCC ACG TCC ATT CAC AGT TCT GGG CAC AAC 478479 CCT GCT GGG TTC TGC AGT GCT TGT GGC CTG TGT TGA CTA CTT CCT GGA 526527 GGG GCT GGC ACT GGG GAG TTG GCT GGG CCA ACG CCT GCA GAC ACT TCC 574575 AGC CTT GCC TTC TCT CTG CTG ATA TAG CTG GGT CTT ACT GGG GAT CTG 622623 GCC AGC CTT GGG GGC CCT TGG AGC CCT GGC CCA GTG GAA GCT CGT GCC 670671 TGA GGA ACA TGG AGG CCA CGC TAA TGA GTT ACT TCC AGA GTC TTC AAG 718719 AGT GCC AAC TGG GAC CAG GAC CCC AGA CCA CAG CCC CCC ACA CCG TCC 766767 TGG ACC TGG ATT CTG ACT GTG GTT CCA CTG TAC CCC TCA CCT TAA TCT 814815 CTG GTT CTA ACC AGA CCT GAG CCT AGA CTT CCA CTT TTT CCC TTA CCC 862863 CTG TGA GGG CCT GGG AAC ACT AGG TGG GCA GGG TTT GAG CCC ACA GGA 910911 CCT GCA CAC AAA CTT CCC CAC CTC TTG GAC TTG GGG ACA GGA TCT GTG 958959 CCT CAA CCC AGA CCA GCT TTG TAG GGA TAT GTT CCA AGA ACA GAG AAG10061007 AGT CTT ATG GGG AAG GGG GAG GAA GGG AAG TAT GAA TAT TTA CCT CTG10541 Met Gly Lys Gly Glu Glu Gly Lys Tyr Glu Tyr Leu Pro Leu 141055 ACC AAT AAT AGA GGT GCC CTG GTC CCC AAA GAA ATT GAC TCC CGA ATT110215 Thr Asn Asn Arg Gly Ala Leu Val Pro Lys Glu Ile Asp Ser Arg Ile 301103 CCC TCC AAG CCT TAC CCA TAT AGC TTT TGT TTG TTT GTT TGT TTT CAG115031 Pro Ser Lys Pro Tyr Pro Tyr Ser Phe Cys Leu Phe Val Cys Phe Gln 461151 ACA AGG TCT TGT TCT GTC CAG TGC CGT GGC GTG ACC ACA GCT CAT GAC119847 Thr Arg Ser Cys Ser Val Gln Cys Arg Gly Val Thr Thr Ala His Asp 621199 AAC TTT GAT TTC CCC GGC CCA AGC GAG CCT CTC ATT CAG CCT CCT GAG124663 Asn Phe Asp Phe Pro Gly Pro Ser Glu Pro Leu Ile Gln Pro Pro Glu 781247 TGG CTG GGA CCA CAG ACG CCA CAC ACA GCT AAT TTT TAT GTA TTC GTT129479 Trp Leu Gly Pro Gln Thr Pro His Thr Ala Asn Phe Tyr Val Phe Val 941295 TTT ATT TTT TTG CAG AGA CAG GGT CTC CCT ATG TTG CCC AAG CTG GTC134295 Phe Ile Phe Leu Gln Arg Gln Gly Leu Pro Met Leu Pro Lys Leu Val 1101343 TTG AAC TCC TGG GCT CAA GTG ATC CTC CTG CTT CAG CCT CCC AAA GTG1390111 Leu Asn Ser Trp Ala Gln Val Ile Leu Leu Leu Gln Pro Pro Lys Val 1261391 CTA GGA TTA TAG CCA CCG CAC CTC GTC TTG AAA TAG CCT TTT AAA TGT1438127 Leu Gly Leu *** 1301439 TCA CCT CAG CTT GCC TCA CAG TGG GTC TGT TCC TGG TTT CCC AGA TGC14861487 ATA AAG GAA GAC ATA TCC CTC CCC TGG GCA GCA AGG CTA CAA TGG GAG15341535 GGA GGG AGA ACA TGG GAG CAT GTG AAT AAA ATG GCA TTA AAT ACT GAA15821583 AAA AAA AAA AAA AAA A 15983.PP12100A核苷酸序列(SEQ ID NO7)长度1978个碱基1 GTGGGATTAC AGGCGTGAGC CACTGCACCC GACCCCAGAT ATGTTTTTAA GTCAGCCATT61 CCACATCGCT AAGTGCCCAT TGTGTAGAGA AGACTGATCT GAAATGCCTT GTGCCATGCA121 CCTGGGGCCA GACCCAGGCT GTGATTAAAG GGCGGCTTCA TATTCACAGT TGTTGGAGTG181 CTGTTAAATC TGGCTCTAAT CTAAAGTGTC TTTACTTTGA AAACCCCATG AATGTTTAGA241 GACTCGCCTT TAAACAGTGA ACCTCTGCCC TGGTGAATGT CTTGGCCGTC TGCCTCGAGG301 CCTAATTCAT GCTGGAGACA TCCTAGACAC TTTCTTTGCT GAATTTCATG ACCATAGCTA361 TTCCTCTTTA CCAGACACAG CACCTTCTTC CTGGTCTTGG CTAGAGATGC AGCAGTATTT421 GGGACTGACA TTACCTGAAG AGCACTTCCT ATCTAAGTAA CTGAACTACA GCACTGTCAC481 AACGCTGGCA TGACATAGAA GGCTCGCCAC ATCCTTCATG TGTTTAGATT TACTCCTAGT541 GTGCTGTGGG GCCAAATCGT GGACTCTTTT TTCCTATCTC TGTTCTTTCT AGATGATCTT601 GTTCAGTCCC CTAGCTTTAA ATTCTATCTG TAGGCCAATG ACCTCCAAAT GTATATCCAT661 AGCCCAGACC GACCCTCCAG ACTCCAGACT CACAGAGCTG ACTCTCTCAT ACAACTTCTC721 TATTTGGAAT CCTAATGGGC ATCTCAAATC CAACATGAGG CTGCCAATGG CGCTCTTGCT781 TTTTCCTCTC AAACCTTCCC TCTCTCATTT CCTCAACCCA GAAAATTGCT GCAGCACTTG841 ATCAGTGACT CAAGCCAGAA AGCTCAGCAG TCATCATCAG GTTCTCCCTC TTTCTCATGC901 CCAGGAGGAT GCGGGGGGCG GCCCCCTGCC CACACTCTGC TCCCTGGGAA GAAACGTGGG961 AAGCATGAGC CAGGCGTTGG GACCCAAGCC AAGTGTAGTC CCTGCCACAC CCATTTGCTT1021 TCCTTCCCAC AAGCTCTCCA GTCAGGCCAC TCTCCCTCTC CACTACTCAC CCTCGGCCAA1081 GCCGCACCTT GTCTGGCCTG GGTTACCACA GGGCCCTTGG CCTCTGTGGC TCGCATCCCT1141 CTCCAGCCCA CTTCTATCAC AAAGGCCAGT GGCAGCCCCT GTCCTGCCTC TGCCCAGACC1201 TTTAATGGCT TCCCACTGCT CTTGCAGCAA AACACATGTT CTTCACTGCC ACCTAGAATC1261 ATCTCAGCAT TGCCTGCTTG TCCAAACCCA CCTTCTACAC CTCTCTATTT CTCTTACTGG1321 CCTCCCTTCT GTTCCTTAAA TATACTAAGC CCTCCTGCAG GCCTGTACCT GCCTCCAGCT1381 CTTTATGCAC CTGGCTCACT CTTGGTCTTT GGGTCCCAGC TCAAACGTCA CCTCTTTAGA1441 GGGGCTGCCT TGTCTACCTA AATAAGCTCC TGCAAAAAAT GTCCAGCCAT TGGCACATAG1501 TAGGCCCCCT TATCCATGGG TTCACGTCTG CAGGTTCAGC TACCTGCAGT CAATCACAGT1561 CTGAAAATTG TGCAGTATTT TGAGAGAGAG ACCACATTGA CATAACTTTT ATTACAGTAT1621 ATTGTTATAA TTGTCCTATT TTATTGTTAT TGTTGTTACT CTTACTGTGC CTAATTTATA1681 AATTAGACTT TATCATGCTT TGGGAGGCAG AGGCAGAAGG TATCACTTGA GCCCGGGAGT1741 TCAGCCAAGA CCAGCCTGGG CCACACAGCA AGACCCCATC TCTACAAAAA AATTAATAAA1801 AGTAAAAAAT TAACCAAATG TGATGGTGCA CACCTGTGGT CCCAGCTACT CAGGAGGCTG1861 AGGCAGGAGG ATCACTTGAG CTCAGGAGGT TGAGGCTGCA GGGTGAGCTG TGATTTTGCC1921 ACAGTTCTAC AGCTTGGGTG AACAGAGGAA GACCCCTTTC AAAAAAAAAA AAAAAAAAB核苷酸序列(SEQ ID NO8)长度124个氨基酸1 MSQALGPKPS VVPATPICFP SHKLSSQATL PLHYSPSAKP HLVWPGLPQG PWPLWLASLS61 SPLLSQRPVA APVLPLPRPL MASHCSCSKT HVLHCHLESS QHCLLVQTHL LHLSISLTGL121 PSVPC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO9)克隆号和蛋白名称PP12100起始编码子965 ATG 终止编码子1337 TAA 蛋白质分子量13279.951G TGG GAT TAC AGG CGT GAG CCA CTG CAC CCG ACC CCA GAT ATG TTT 4647 TTA AGT CAG CCA TTC CAC ATC GCT AAG TGC CCA TTG TGT AGA GAA GAC 9495 TGA TCT GAA ATG CCT TGT GCC ATG CAC CTG GGG CCA GAC CCA GGC TGT 142143 GAT TAA AGG GCG GCT TCA TAT TCA CAG TTG TTG GAG TGC TGT TAA ATC 190191 TGG CTC TAA TCT AAA GTG TCT TTA CTT TGA AAA CCC CAT GAA TGT TTA 238239 GAG ACT CGC CTT TAA ACA GTG AAC CTC TGC CCT GGT GAA TGT CTT GGC 286287 CGT CTG CCT CGA GGC CTA ATT CAT GCT GGA GAC ATC CTA GAC ACT TTC 334335 TTT GCT GAA TTT CAT GAC CAT AGC TAT TCC TCT TTA CCA GAC ACA GCA 382383 CCT TCT TCC TGG TCT TGG CTA GAG ATG CAG CAG TAT TTG GGA CTG ACA 430431 TTA CCT GAA GAG CAC TTC CTA TCT AAG TAA CTG AAC TAC AGC ACT GTC 478479 ACA ACG CTG GCA TGA CAT AGA AGG CTC GCC ACA TCC TTC ATG TGT TTA 526527 GAT TTA CTC CTA GTG TGC TGT GGG GCC AAA TCG TGG ACT CTT TTT TCC 574575 TAT CTC TGT TCT TTC TAG ATG ATC TTG TTC AGT CCC CTA GCT TTA AAT 622623 TCT ATC TGT AGG CCA ATG ACC TCC AAA TGT ATA TCC ATA GCC CAG ACC 670671 GAC CCT CCA GAC TCC AGA CTC ACA GAG CTG ACT CTC TCA TAC AAC TTC 718719 TCT ATT TGG AAT CCT AAT GGG CAT CTC AAA TCC AAC ATG AGG CTG CCA 766767 ATG GCG CTC TTG CTT TTT CCT CTC AAA CCT TCC CTC TCT CAT TTC CTC 814815 AAC CCA GAA AAT TGC TGC AGC ACT TGA TCA GTG ACT CAA GCC AGA AAG 862863 CTC AGC AGT CAT CAT CAG GTT CTC CCT CTT TCT CAT GCC CAG GAG GAT 910911 GCG GGG GGC GGC CCC CTG CCC ACA CTC TGC TCC CTG GGA AGA AAC GTG 958959 GGA AGC ATG AGC CAG GCG TTG GGA CCC AAG CCA AGT GTA GTC CCT GCC10061 Met Ser Gln Ala Leu Gly Pro Lys Pro Ser Val Val Pro Ala 141007 ACA CCC ATT TGC TTT CCT TCC CAC AAG CTC TCC AGT CAG GCC ACT CTC105415 Thr Pro Ile Cys Phe Pro Ser His Lys Leu Ser Ser Gln Ala Thr Leu 301055 CCT CTC CAC TAC TCA CCC TCG GCC AAG CCG CAC CTT GTC TGG CCT GGG110231 Pro Leu His Tyr Ser Pro Ser Ala Lys Pro His Leu Val Trp Pro Gly 461103 TTA CCA CAG GGC CCT TGG CCT CTG TGG CTC GCA TCC CTC TCC AGC CCA115047 Leu Pro Gln Gly Pro Trp Pro Leu Trp Leu Ala Ser Leu Ser Ser Pro 621151 CTT CTA TCA CAA AGG CCA GTG GCA GCC CCT GTC CTG CCT CTG CCC AGA119863 Leu Leu Ser Gln Arg Pro Val Ala Ala Pro Val Leu Pro Leu Pro Arg 781199 CCT TTA ATG GCT TCC CAC TGC TCT TGC AGC AAA ACA CAT GTT CTT CAC124679 Pro Leu Met Ala Ser His Cys Ser Cys Ser Lys Thr His Val Leu His 941247 TGC CAC CTA GAA TCA TCT CAG CAT TGC CTG CTT GTC CAA ACC CAC CTT129495 Cys His Leu Glu Ser Ser Gln His Cys Leu Leu Val Gln Thr His Leu 1101295 CTA CAC CTC TCT ATT TCT CTT ACT GGC CTC CCT TCT GTT CCT TAA ATA1342111 Leu His Leu Ser Ile Ser Leu Thr Gly Leu Pro Ser Val Pro *** 1251343 TAC TAA GCC CTC CTG CAG GCC TGT ACC TGC CTC CAG CTC TTT ATG CAC13901391 CTG GCT CAC TCT TGG TCT TTG GGT CCC AGC TCA AAC GTC ACC TCT TTA14381439 GAG GGG CTG CCT TGT CTA CCT AAA TAA GCT CCT GCA AAA AAT GTC CAG14861487 CCA TTG GCA CAT AGT AGG CCC CCT TAT CCA TGG GTT CAC GTC TGC AGG15341535 TTC AGC TAC CTG CAG TCA ATC ACA GTC TGA AAA TTG TGC AGT ATT TTG15821583 AGA GAG AGA CCA CAT TGA CAT AAC TTT TAT TAC AGT ATA TTG TTA TAA16301631 TTG TCC TAT TTT ATT GTT ATT GTT GTT ACT CTT ACT GTG CCT AAT TTA16781679 TAA ATT AGA CTT TAT CAT GCT TTG GGA GGC AGA GGC AGA AGG TAT CAC17261727 TTG AGC CCG GGA GTT CAG CCA AGA CCA GCC TGG GCC ACA CAG CAA GAC17741775 CCC ATC TCT ACA AAA AAA TTA ATA AAA GTA AAA AAT TAA CCA AAT GTG18221823 ATG GTG CAC ACC TGT GGT CCC AGC TAC TCA GGA GGC TGA GGC AGG AGG18701871 ATC ACT TGA GCT CAG GAG GTT GAG GCT GCA GGG TGA GCT GTG ATT TTG19181919 CCA CAG TTC TAC AGC TTG GGT GAA CAG AGG AAG ACC CCT TTC AAA AAA19661967 AAA AAA AAA AAA19784. PP12488A核苷酸序列(SEQ ID NO10)长度2371个碱基1 GGTGAGCGCC ACCCGGAGTC CCGCGCGCAA CTTTCAGGGC GCACTCGGCG GGGCGGCTGC61 GCGGCTGCCG GGACTCGGCG CGGGACTGCA TGGAGGCCAA GGAGAAGCAG CATCTGTTGG121 ACGCCAGGCC GGCAATCCGG TCATACACGG GATCTCTGTG GCAGGAAGGG GCTGGCTGGA181 TTCCTCTGCC CCGACCTGGC CTGGACTTGC AGGCCATTGA GCTGGCTGCC CAGAGCAACC241 ATCACTGCCA TGCTCAGAAG GGTCCTGACA GTCACTGTGA CCCCAAGAAG GGGAAGGCCC301 AGCGCCAGCT GTATGTAGCC TCTGCCATCT GCCTGTTGTT CATGATCGGA GAAGTCGTTG361 GTGGGTACCT GGCACACAGC TTGGCTGTCA TGACTGACGC AGCACACCTG CTCACTGACT421 TTGCCAGCAT GCTCATCAGC CTCTTCTCCC TCTGGATGTC CTCCCGGCCA GCCACCAAGA481 CCATGAACTT TGGCTGGCAG AGAGCTGAGA TCTTGGGAGC CCTGGTCTCT GTACTGTCCA541 TCTGGGTCGT GACGGGGGTA CTGGTGTACC TGGCTGTGGA GCGGCTGATC TCTGGGGACT601 ATGAAATTGA CGGGGGGACC ATGCTGATCA CGTCGGGCTG CGCTGTGGCT GTGAACATCA661 TAATGGGGTT GACCCTTCAC CAGTCTGGCC ATGGGCACAG CCACGGCACC ACCAACCAGC721 AGGAGGAGAA CCCCAGCGTC CGAGCTGCCT TCATCCATGT GATCGGCGAC TTTATGCAGA781 GCATGGGTGT CCTAGTGGCA GCCTATATTT TATACTTCAA GCCAGAATAC AAGTATGTAG841 ACCCCATCTG CACCTTCGTC TTCTCCATCC TGGTCCTGGG GACAACCTTG ACCATCCTGA901 GAGATGTGAT CCTGGTGTTG ATGGAAGGGA CCCCCAAGGG CGTTGACTTC ACAGCTGTTC961 GTGATCTGCT GCTGTCGGTG GAGGGGGTAG AAGCCCTGCA CAGCCTGCAT ATCTGGGCAC1021 TGACGGTGGC CCAGCCTGTT CTGTCTGTCC ACATCGCCAT TGCTCAGAAT ACAGACGCCC1081 AGGCTGTGCT GAAGACAGCC AGCAGCCGCC TCCAAGGGAA GTTCCACTTC CACACCGTGA1141 CCATCCAGAT CGAGGACTAC TCGGAGGACA TGAAGGACTG TCAGGCATGC CAGGGCCCCT1201 CAGACTGACT GCTCAGCCAG GCACCAACTG GGGCATGAAC AGGACCTGCA GGTGGCTGGA1261 CTGAGTGTCC CCCAGGCCCA GCCAGGACTT TGCCTACCCC AGCTGTGTTA TAAACCAGGT1321 CCCCCTCCTG ACCTCTGCCC CACTCCAGGA ATGGAGCTCT TCCCAGCCTC CCATCTGACT1381 ACAGCCAGGG TGGGGACTCA GCGGGTATAA AGCTAGTGTG ACCCTGCTCT TCCAGCTCCT1441 GGGCCAGCTC TGGAAGGGCT GTATTTGGGC CTAATCCTCA GCAACTGTTC TACCACTCGC1501 AGGGGCAAAG GTGGTGAGCC ACGGGACGTC CAAGGGGAGG CTGGCCCCAG CGCGCCCATA1561 CTGCCTGCCT CATGCCCCAT TCTCAGCCTG GCTGGCCTTT GCCTTTATGA ATCTGAGCCC1621 CTCCATCTGC CTATAGCAAT AGGCACGGGG GTGAGGACCC TCACACTCTC ATTTGAGCCT1681 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Ala Gln Lys Gly Pro Asp Ser His Cys Asp Pro Lys 66288 AAG GGG AAG GCC CAG CGC CAG CTG TAT GTA GCC TCT GCC ATC TGC CTG33567 Lys Gly Lys Ala Gln Arg Gln Leu Tyr Val Ala Ser Ala Ile Cys Leu 82336 TTG TTC ATG ATC GGA GAA GTC GTT GGT GGG TAC CTG GCA CAC AGC TTG38383 Leu Phe Met Ile Gly Glu Val Val Gly Gly Tyr Leu Ala His Ser Leu 98384 GCT GTC ATG ACT GAC GCA GCA CAC CTG CTC ACT GAC TTT GCC AGC ATG43199 Ala Val Met Thr Asp Ala Ala His Leu Leu Thr Asp Phe Ala Ser Met 114432 CTC ATC AGC CTC TTC TCC CTC TGG ATG TCC TCC CGG CCA GCC ACC AAG 479115 Leu Ile Ser Leu Phe Ser Leu Trp Met Ser Ser Arg Pro Ala Thr Lys 130480 ACC ATG AAC TTT GGC TGG CAG AGA GCT GAG ATC TTG GGA GCC CTG GTC 527131 Thr Met Asn Phe Gly Trp Gln Arg Ala Glu Ile Leu Gly Ala Leu Val 146528 TCT GTA CTG TCC ATC TGG GTC GTG ACG GGG GTA CTG GTG TAC CTG GCT 575147 Ser Val Leu Ser Ile Trp Val Val Thr Gly Val Leu Val Tyr Leu Ala 162576 GTG GAG CGG CTG ATC TCT GGG GAC TAT GAA ATT GAC GGG GGG ACC ATG 623163 Val Glu Arg Leu Ile Ser Gly Asp Tyr Glu Ile Asp Gly Gly Thr Met 178624 CTG ATC ACG TCG GGC TGC GCT GTG GCT GTG AAC ATC ATA ATG GGG TTG 671179 Leu Ile Thr Ser Gly Cys Ala Val Ala Val Asn Ile Ile Met Gly Leu 194672 ACC CTT CAC CAG TCT GGC CAT GGG CAC AGC CAC GGC ACC ACC AAC CAG 719195 Thr Leu His Gln Ser Gly His Gly His Ser His Gly Thr Thr Asn Gln 210720 CAG GAG GAG AAC CCC AGC GTC CGA GCT GCC TTC ATC CAT GTG ATC GGC 767211 Gln Glu Glu Asn Pro Ser Val Arg Ala Ala Phe Ile His Val Ile Gly 226768 GAC TTT ATG CAG AGC ATG GGT GTC CTA GTG GCA GCC TAT ATT TTA TAC 815227 Asp Phe Met Gln Ser Met Gly Val Leu Val Ala Ala Tyr Ile Leu Tyr 242816 TTC AAG CCA GAA TAC AAG TAT GTA GAC CCC ATC TGC ACC TTC GTC TTC 863243 Phe Lys Pro Glu Tyr Lys Tyr Val Asp Pro Ile Cys Thr Phe Val Phe 258864 TCC ATC CTG GTC CTG GGG ACA ACC TTG ACC ATC CTG AGA GAT GTG ATC 911259 Ser Ile Leu Val Leu Gly Thr Thr Leu Thr Ile Leu Arg Asp Val Ile 274912 CTG GTG TTG ATG GAA GGG ACC CCC AAG GGC GTT GAC TTC ACA GCT GTT 959275 Leu Val Leu Met Glu Gly Thr Pro Lys Gly Val Asp Phe Thr Ala Val 290960 CGT GAT CTG CTG CTG TCG GTG GAG GGG GTA GAA GCC CTG CAC AGC CTG1007291 Arg Asp Leu Leu Leu Ser Val Glu Gly Val Glu Ala Leu His Ser Leu 3061008 CAT ATC TGG GCA CTG ACG GTG GCC CAG CCT GTT CTG TCT GTC CAC ATC1055307 His Ile Trp Ala Leu Thr Val Ala Gln Pro Val Leu Ser Val His Ile 3221056 GCC ATT GCT CAG AAT ACA GAC GCC CAG GCT GTG CTG AAG ACA GCC AGC1103323 Ala Ile Ala Gln Asn Thr Asp Ala Gln Ala Val Leu Lys Thr Ala Ser 3381104 AGC CGC CTC CAA GGG AAG TTC CAC TTC CAC ACC GTG ACC ATC CAG ATC1151339 Ser Arg Leu Gln Gly Lys Phe His Phe His Thr Val Thr Ile Gln Ile 3541152 GAG GAC TAC TCG GAG GAC ATG AAG GAC TGT CAG GCA TGC CAG GGC CCC1199355 Glu Asp Tyr Ser Glu Asp Met Lys Asp Cys Gln Ala Cys Gln Gly Pro 3701200 TCA GAC TGA CTG CTC AGC CAG GCA CCA ACT GGG GCA TGA ACA GGA CCT1247371 Ser Asp *** 3731248 GCA GGT GGC TGG ACT GAG TGT CCC CCA GGC CCA GCC AGG ACT TTG CCT12951296 ACC CCA GCT GTG TTA TAA ACC AGG TCC CCC TCC TGA CCT CTG CCC CAC13431344 TCC AGG AAT GGA 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His His Pro Thr 102529 ATT CTC CTT CCT GAC TCA AAG ACA ATG AGG AGC CTT TGT GGT GGA GCT 576103 Ile Leu Leu Pro Asp Ser Lys Thr Met Arg Ser Leu Cys Gly Gly Ala 118577 GAG AAA ACC AGA GTG CCA AGA TGA GAA GTC TTG TCT CAT AGG GTG AGG 624119 Glu Lys Thr Arg Val Pro Arg *** 126625 AGT GGC TTT ACA GGG GAC ATG GAA GCT CTT TCC ACT TAA CCC TGC TGA 672673 AGA TCT CAA AGG TGC TCC CAT CTT CGC TGA GGA GTA GAC CAT GGT TCC 720721 TCT TTC TCC TTG CCT TGC CAC CAT GTC TGT GGC TTC TTT ATC TGT CAG 768769 ATA CTA CAG GCA CAT TGC CTG TAA GTC TCT CAA GGG CCT ATG GAA ATA 816817 TAC AAG ACC CCA AAA CAA AAG AAC TAT AAG GTC TAA AAT GAA GAT CAA 864865 AAT GAA TAC TTA AGA GTT TGT CCA TAA AAT GTT ACA GAC CAA CTA GTC 912913 AAC TGC AAC TCA TTT CTT ATA AAG TAA TGT AAA GCT ACA TTT TAT GAG 960961 AAA TGT GGG TGC ATA TTA ACA TGT TTG AGA TAA CGA GGT ATG GGG CCT10081009 TTA AAC TAA GTA TAC TTA GAT CTT AAG AAG GTT TTA TCC CTG CTT CTC10561057 TTG CTT GCT GAA TCT AGA ACT TCT TTT TTT GCT TGC TTG CTT TTT TTT11041105 TGG GAC AGG 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CAT24482449 ACC ACG GGG TTA GGA TGC CCA TGA TGC CAC TGA GTA CTT CCT TCT GGC24962497 CCT GGC AGC AGC GGT CCT GCT GGG TGA TGA GGA GCT TCA GGA CAC CAT25442545 TAG GAG CAG GCT GGA CAA CAT CTG CCA GAG CCC CCT GTG GCA CAG CAG25922593 GCC TCC GGG TGC TCC TCA GAG AGG GCG CGG TGG CTG AGT GGT GGT GGC26402641 CTG GCC CTC TGA GGA AAG CTG TCC TGT CTC TGG ACA TTG TGC ATG GCC26882689 AGA CTC TGA CCC CAC TGC CCT AGG CTC TTA AAT ACT CAT TGG GAG GGT27362737 CCG AGT CCT TAC CTG CCT AGC CCC CTC ATT TCA CAA GAA GAA GAA TGA27842785 AGT CCA GGA GGA GAA GGG CTC ATT GCA GGC CAC AGA AAG ATT TGA TGG28322833 TGC AGC GAT GAG AAT TCC TGG TTC CAG GCT TTG CAT CTG GAG CCT TTA28802881 CCG GTT GAC TGT TGC CTT CCA CAC AAA CAG CCT CTG AAA AGC ACT TTC 29282929 TCC ATA CAT AAT TCT GGA GAA GAT GAG GGA TCT TGC CCT CCA GGA GCC 29762977 TTC CTT CCT CCC CCA ATG AGG AAA TCA GTC ACT GCA CTG GTG CAA AGG 30243025 CAA GCA GAT TGG AAT TTG TGC TCT TCA CCG ATT TTC TCA GGG AAA GAC 30723073 CCC TTC CCC TTG CCA GCA GAG GAA CCT GTA GTT TTT TCC ATT TCT TTC 31203121 TTC AGA ACC AAA GTA TGT ATC ACT CCT CAT GCT CAC AGG GAT TGA CAG 31683169 GAG AGA ATT CAC CAG GAT CTT AGC TCA AAA GAC ACA GCC TCA GAA TGG 32163217 CCA GAT GGA TTG CAC GAA ACC TGA CTT GGA TTC ACC ATC TTC CTC CTG 32643265 CCA TAA GGC TGT GCT CCC ACA TAA CCT CCC AGA AGC TCC AGG GAA GCT 33123313 TTC CAA GAG CAA AGG CTT GGA AAT TGA ATG TTA AGA AAA TTA TGA CAT 33603361 AAA TTA CAT GTA AAT AGT GAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA 34016.PP12901A核苷酸序列(SEQ ID NO16)长度2505个碱基1 GTGAAGAGGA CTTTGTCGGA AGCTCTCCTA AGAAACAAGC AGATGGAGTC AGGACTCCCT61 TAAGCTGCTC AGGGCTTGCC ACACCATTGT GTTGCATTCA GCCTGTCGTC TGATAAGCCC121 ACTTCTACAT CCCCAGCTGA CCAAGACCTT TGGCCTCAGC TAACATTTTC CATTGACAGT181 CTGCCCAAAC CCTTAAGACC CTATGCTAAC ATAGGGTCAG CAGCCTTCCA AGCCTTAAAA241 ATCCCCATCA ACAAGGTATC TGTGGGCCAG GGTCCAAAGC CTTCGCTGGG GGTCATTCCC301 ACCTTCCTCA CTAATTGTGC AGGATGCTTT TGCAGGGACA CCATTTTTCC ATTCCATACT361 GGGGCAGCCA GCCATTGAGT TTCAGCCCTT TAGGTGGAGC TCCCTCCCCG CCAGAACACT421 CTAGACAGCC AGCCAGCCCC 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GAA AGT ACA ACT GAT GGT TCC CCC ATT 28664 Phe Val Trp Ser Ser Val Pro Glu Ser Thr Thr Asp Gly Ser Pro Ile 79287 CAC ACC AGT GTC CAG TTC CAA GCC AGC TAC CTG CCC AAA CCA GGA GCT 33480 His Thr Ser Val Gln Phe Gln Ala Ser Tyr Leu Pro Lys Pro Gly Ala 95335 CAG CTC TAC CAG TTC CGA TAT GTG AAC CGC CAG GGC CAG GTG TGT GGG 38296 Gln Leu Tyr Gln Phe Arg Tyr Val Asn Arg Gln Gly Gln Val Cys Gly 111383 CAG AGC CCC CCT TTC CAG TTC CGA GAG CCA AGG CCC ATG GAT GAA CTG 430112 Gln Ser Pro Pro Phe Gln Phe Arg Glu Pro Arg Pro Met Asp Glu Leu 127431 GTG ACC CTG GAG GAG GCT GAT GGG GGC TCT GAC ATC CTG CTG GTT GTC 478128 Val Thr Leu Glu Glu Ala Asp Gly Gly Ser Asp Ile Leu Leu Val Val 143479 CCC AAG GCA ACT GTG TTA CAG AAC CAG CTC GAT GAG AGC CAG CAA GAA 526144 Pro Lys Ala Thr Val Leu Gln Asn Gln Leu Asp Glu Ser Gln Gln Glu 159527 CGG AAT GAC CTG ATG CAG CTG AAG CTA CAG CTG GAG GGA CAG GTG ACA 574160 Arg Asn Asp Leu Met Gln Leu Lys Leu Gln Leu Glu Gly Gln Val Thr 175575 GAG CTG AGG AGC CGA GTG CAG GAG CTC GAG 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GAG CGG GCA GGG CTG1294400 His Leu Lys Glu Glu Lys Cys Gln Trp Ser Lys Glu Arg Ala Gly Leu 4151295 CTG CAG AGT GTG GAG GCA GAG AAG GAC AAG ATC CTG AAG CTG AGT GCA1342416 Leu Gln Ser Val Glu Ala Glu Lys Asp Lys Ile Leu Lys Leu Ser Ala 4311343 GAG ATA CTT CGA TTG GAG AAG GCA GTT CAG GAG GAG AGG ACC CAA AAC1390432 Glu Ile Leu Arg Leu Glu Lys Ala Val Gln Glu Glu Arg Thr Gln Asn 4471391 CAA GTG TTC AAG ACT GAG CTG GCC CGG GAG AAG GAT TCT AGC CTG GTA1438448 Gln Val Phe Lys Thr Glu Leu Ala Arg Glu Lys Asp Ser Ser Leu Val 4631439 CAG TTG TCA GAA AGT AAG CGG GAG CTG ACA GAG CTG CGG TCA GCC CTG1486464 Gln Leu Ser Glu Ser Lys Arg Glu Leu Thr Glu Leu Arg Ser Ala Leu 4791487 CGT GTG CTC CAG AAG GAA AAG GAG CAG TTA CAG GAG GAG AAA CAG GAA1534480 Arg Val Leu Gln Lys Glu Lys Glu Gln Leu Gln Glu Glu Lys Gln Glu 4951535 TTG CTA GAG TAC ATG AGA AAG CTA GAG GCC CGC CTG GAG AAG GTG GCA1582496 Leu Leu Glu Tyr Met Arg Lys Leu Glu Ala Arg Leu Glu Lys Val Ala 5111583 GAT GAG AAG TGG AAT GAG GAT GCC ACC ACA GAG GAT GAG GAG GCC GCT1630512 Asp Glu Lys Trp Asn Glu Asp Ala Thr Thr Glu Asp Glu Glu Ala Ala5271631 GTG GGG CTG AGC TGC CCG GCA GCT CTG ACA GAC TCA GAG GAC GAG TCC1678528 Val Gly Leu Ser Cys Pro Ala Ala Leu Thr Asp Ser Glu Asp Glu Ser 5431679 CCA GAA GAC ATG AGG CTC CCA CCC TAT GGC CTT TGT GAG CGT GGA GAC1726544 Pro Glu Asp Met Arg Leu Pro Pro Tyr Gly Leu Cys Glu Arg Gly Asp 5591727 CCA GGC TCC TCT CCT GCT GGG CCT CGA GAG GCT TCT CCC CTT GTT GTC1774560 Pro Gly Ser Ser Pro Ala Gly Pro Arg Glu Ala Ser Pro Leu Val Val 5751775 ATC AGC CAG CCG GCT CCC ATT TCT CCT CAC CTC TCT GGG CCA GCT GAG1822576 Ile Ser Gln Pro Ala Pro Ile Ser Pro His Leu Ser Gly Pro Ala Glu 5911823 GAC AGT AGC TCT GAC TCG GAG GCT GAA GAT GAG AAG TCA GTC CTG ATG1870592 Asp Ser Ser Ser Asp Ser Glu Ala Glu Asp Glu Lys Ser Val Leu Met 6071871 GCA GCT GTG CAG AGT GGG GGT GAG GAG GCC AAC TTA CTG CTT CCT GAA1918608 Ala Ala Val Gln Ser Gly Gly Glu Glu Ala Asn Leu Leu Leu Pro Glu 6231919 CTG GGC AGT GCC TTC TAT GAC ATG GCC AGG TGA GTT CAA CCA GCA AGG1966624 Leu Gly Ser Ala Phe Tyr Asp Met Ala Arg *** 6341967 CCA GGA GGG AGG TGG GAG GAG GTC AGA GGG AAA GGG CAT CTG TGT GGA20142015 CAG TCA CCA GGC CCT GCT CCC AAC CCC TGC CCT TCT TGG CCT CAG CCA20622063 AGA AAA GGA GAT ACA GGT ATG GTTAAC AAG GAA AAT GAC TCA CTG CTC 21102111 CAA ATC CCA GAT GCC TTC AGG TAA TCC CTA CCC CTA TCT TAT CAA TGC21582159 ACT CAG AGG TCC TGC CTT TAA CTG GCT TCT ATG TTG TTC TAG CAC CAT22062207 CTT CTG CAG AGC CCA AAT TGC CCT GCT TCC CCT CTC TCC TGC CTC TAC22542255 CCC TTC CCC AAC CAC CAG GTA GGT ACC TAG GGT CCT CCG GGG AGG AAG23022303 GGA GGT GAC CAT GGC CCC CAG GGA TAG GAG CAG AGA GAA GAC TGG GAT23502351 CCA GCA TCC ATC TGG CTA CAA CTG AAA TGC TTT CCC TCT TCC CTG ACT23982399 TCC CTG GGT AAC CCT TAG GGA AGG GAA CCT ATA GAG GTG GGG GTT TCA24462447 GGT ATC AGA TTG TCC CCT TCT GCC TTC CCT TTT ATT CCC AGG TTC AAG24942495 GGG GCA GGC ACA GGG AAG AGA GAT TTG ATC ATC TAG TCC CGG TTT TGC25422543 CTG GAT GTG AGA TGG GCT CAG GGC AGG GAG GGG GTG ATG CTG 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AAA AAA AAA AAA AAA AAA39343935 AAA AAA 39408.PP13296A核苷酸序列(SEQ ID NO22)长度2889个碱基1 GCTTATCCTA GCAATTGGGG CGCGGGCCTG TGAGCCAGTT GGAGTTGCGG CGGCGGGAAC61 GATTGGGCTG AGCAGAGGAC GACATGTTGC TTTTCGTGGA GGTAGCATCT AAAGGAACTG121 GTTTAAATCC TAATGCCAAA GTATGGCAAG AAATTGCTCC TGGAAATACT GATGCCACCC181 CAGTAACTCA TGGAACTGAA AGCTCTTGGC ATGAAATAGC AGCTACATCA GGTGCTCATC241 CTGAGGGTAA TGCAGAGCTC TCAGAAGATA TATGTAAAGA ATATGAAGTA ATGTATTCTT301 CATCTTGTGA AACCACAAGA AATACTACAG GCATTGAAGA ATCAACTGAT GGGATGATTT361 TAGGACCAGA AGATCTGAGT TACCAAATAT ATGATGTTTC CGGAGAAAGC AATTCAGCAG421 TTTCTACAGA AGACCTAAAA GAATGTCTGA AGAAACAATT AGAATTCTGT TTTTCACGAG481 AAAATTTGTC AAAGGATCTT TACTTGATAT CTCAAATGGA TAGTGATCAG TTCATCCCAA541 TTTGGACAGT TGCCAACATG GAAGAAATAA AAAAGTTGAC TACAGACCCT GATCTAATTC601 TTGAAGTGTT AAGATCTTCT CCCATGGTAC AAGTTGATGA GAAGGGTGAG AAAGTGAGAC661 CAAGTCATAA GCGTTGTATT GTAATTCTTA GAGAGATTCC TGAAACAACA CCAATAGAGG721 AAGTGAAAGG TTTGTTCAAA AGTGAAAACT GCCCCAAAGT GATAAGCTGT GAGTTTGCAC781 ACAATAGCAA CTGGTATATC 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RPHPSTAESK APTPKFDLLA481 SNFPPLPGSS SRMPGELVLE TRMSDVVKGV YKEKDNEELT ISCPVPADEQ TECTSAQQLN541 MSTSSPCAAE LTALSTTQQE KDLIEDSSVQ KDGLNQTTIP VSPPSTTKPS RASTASPCNN601 NINAATAVAL QEPRKLSYAE VCQKPPKEPS SVLVQPLREL RSNVVSPTKN EDNGAPENSV661 EKPHEKPEAR ASKDYSGFRG NIIPRGAAGK IREQRRQFSH RAIPQGVTRR NGKEQYVPPR721 SPKC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO24)克隆号和蛋白名称；PP13296起始编码子84 ATG 终止编码子2253 TAA 蛋白质分子量80450.711 GC TTA TCC TAG CAA TTG GGG CGC GGG CCT GTG AGC CAG TTG GAG TTG 4748 CGG CGG CGG GAA CGA TTG GGC TGA GCA GAG GAC GAC ATG TTG CTT TTC 951 Met Leu Leu Phe 496 GTG GAG GTA GCA TCT AAA GGA ACT GGT TTA AAT CCT AAT GCC AAA GTA 1435 Val Glu Val Ala Ser Lys Gly Thr Gly Leu Asn Pro Asn Ala Lys Val 20144 TGG CAA GAA ATT GCT CCT GGA AAT ACT GAT GCC ACC CCA GTA ACT CAT 19121 Trp Gln Glu Ile Ala Pro Gly Asn Thr Asp Ala Thr Pro Val Thr His 36192 GGA ACT GAA AGC TCT TGG CAT GAA ATA GCA GCT ACA TCA GGT GCT CAT 23937 Gly Thr Glu Ser Ser Trp His Glu Ile Ala Ala Thr Ser Gly Ala His 52240 CCT GAG GGT AAT GCA GAG CTC TCA GAA GAT ATA TGT AAA GAA TAT GAA 28753 Pro Glu Gly Asn Ala Glu Leu Ser Glu Asp Ile Cys Lys Glu Tyr Glu 68288 GTA ATG TAT TCT TCA TCT TGT GAA ACC ACA AGA AAT ACT ACA GGC ATT 33569 Val Met Tyr Ser Ser Ser Cys Glu Thr Thr Arg Asn Thr Thr Gly Ile 84336 GAA GAA TCA ACT GAT GGG ATG ATT TTA GGA CCA GAA GAT CTG AGT TAC 38385 Glu Glu Ser Thr Asp Gly Met Ile Leu Gly Pro Glu Asp Leu Ser Tyr 100384 CAA ATA TAT GAT GTT TCC GGA GAA AGC AAT TCA GCA GTT TCT ACA GAA 431101 Gln Ile Tyr Asp Val Ser Gly Glu Ser Asn Ser Ala Val Ser Thr Glu 116432 GAC CTA AAA GAA TGT CTG AAG AAA CAA TTA GAA TTC TGT TTT TCA CGA 479117 Asp Leu Lys Glu Cys Leu Lys Lys Gln Leu Glu Phe Cys Phe Ser Arg 132480 GAA AAT TTG TCA AAG GAT CTT TAC TTG ATA TCT CAA ATG GAT AGT GAT 527133 Glu Asn Leu Ser Lys Asp Leu Tyr Leu Ile Ser Gln Met Asp Ser Asp 148528 CAG TTC ATC CCA ATT TGG ACA GTT GCC AAC ATG GAA GAA ATA AAA AAG 575149 Gln Phe Ile Pro Ile Trp Thr Val Ala Asn Met Glu Glu Ile Lys Lys 164576 TTG ACT ACA GAC CCT GAT CTA ATT CTT GAA GTG TTA AGA TCT TCT CCC 623165 Leu Thr Thr Asp Pro Asp Leu Ile Leu Glu Val Leu Arg Ser Ser Pro 180624 ATG GTA CAA GTT GAT GAG AAG GGT GAG AAA GTG AGA CCA AGT CAT AAG 671181 Met Val Gln Val Asp Glu Lys Gly Glu Lys Val Arg Pro Ser His Lys 196672 CGT TGT ATT GTA ATT CTT AGA GAG ATT CCT GAA ACA ACA CCA ATA GAG 719197 Arg Cys Ile Val Ile Leu Arg Glu Ile Pro Glu Thr Thr Pro Ile Glu 212720 GAA GTG AAA GGT TTG TTC AAA AGT GAA AAC TGC CCC AAA GTG ATA AGC 767213 Glu Val Lys Gly Leu Phe Lys Ser Glu Asn Cys Pro Lys Val Ile Ser 228768 TGT GAG TTT GCA CAC AAT AGC AAC TGG TAT ATC ACT TTC CAG TCA GAC 815229 Cys Glu Phe Ala His Asn Ser Asn Trp Tyr Ile Thr Phe Gln Ser Asp 244816 ACA GAT GCA CAA CAG GCT TTT AAA TAC TTA AGA GAA GAA GTT AAA ACA 863245 Thr Asp Ala Gln Gln Ala Phe Lys Tyr Leu Arg Glu Glu Val Lys Thr 260864 TTT CAG GGC AAG CCA ATT ATG GCA AGG ATA AAA GCC ATC AAT ACA TTT 911261 Phe Gln Gly Lys Pro Ile Met Ala Arg Ile Lys Ala Ile Asn Thr Phe 276912 TTT GCT AAG AAT GGT TAT CGA TTA ATG GAT TCT AGT ATC TAT AGT CAC 959277 Phe Ala Lys Asn Gly Tyr Arg Leu Met Asp Ser Ser Ile Tyr Ser His 292960 CCC ATT CAA ACT CAA GCA CAG TAT GCC TCC CCA GTC TTT ATG CAG CCT1007293 Pro Ile Gln Thr Gln Ala Gln Tyr Ala Ser Pro Val Phe Met Gln Pro 3081008 GTA TAT AAT CCT CAC CAA CAG TAC TCG GTC TAT AGT ATT GTG CCT CAG1055309 Val Tyr Asn Pro His Gln Gln Tyr Ser Val Tyr Ser Ile Val Pro Gln 3241056 TCT TGG TCT CCA AAT CCT ACA CCT TAC TTT GAA ACA CCA CTG GCT CCC1103325 Ser Trp Ser Pro Asn Pro Thr Pro Tyr Phe Glu Thr Pro Leu Ala Pro 3401104 TTT CCC AAT GGT AGT TTT GTG AAT GGC TTT AAT TCG CCA GGA TCT TAT1151341 Phe Pro Asn Gly Ser Phe Val Asn Gly Phe Asn Ser Pro Gly Ser Tyr 3561152 AAA ACA AAT GCT GCT GCT ATG AAT ATG GGT CGA CCA TTC CAA AAA AAT1199357 Lys Thr Asn Ala Ala Ala Met Asn Met Gly Arg Pro Phe Gln Lys Asn 3721200 CGT GTG AAG CCT CAG TTT AGG TCA TCT GGT GGT TCA GAA CAC TCA ACA1247373 Arg Val Lys Pro Gln Phe Arg Ser Ser Gly Gly Ser Glu His Ser Thr 3881248 GAG GGC TCT GTA TCC TTG GGG GAT GGA CAG TTG AAC AGA TAT AGT TCA1295389 Glu Gly Ser Val Ser Leu Gly Asp Gly Gln Leu Asn Arg Tyr Ser Ser 4041296 AGA AAC TTT CCA GCT GAA CGG CAT AAC CCC ACA GTA ACT GGG CAT CAG1343405 Arg Asn Phe Pro Ala Glu Arg His Asn Pro Thr Val Thr Gly His Gln 4201344 GAG CAA ACT TAC CTT CAG AAG GAG ACT TCC ACT TTG CAG GTG GAA CAG1391421 Glu Gln Thr Tyr Leu Gln Lys Glu Thr Ser Thr Leu Gln Val Glu Gln 4361392 AAT GGG GAC TAT GGT AGG GGC AGG AGA ACT CTC TTC AGA GGT CGA AGA1439437 Asn Gly Asp Tyr Gly Arg Gly Arg Arg Thr Leu Phe Arg Gly Arg Arg 4521440 CGA CGA GAA GAT GAC AGG ATC TCA AGA CCT CAT CCT TCA ACA GCT GAA1487453 Arg Arg Glu Asp Asp Arg Ile Ser Arg Pro His Pro Ser Thr Ala Glu 4681488 TCA AAG GCT CCA ACA CCA AAG TTT GAC TTA TTA GCC TCA AAT TTT CCA1535469 Ser Lys Ala Pro Thr Pro Lys Phe Asp Leu Leu Ala Ser Asn Phe Pro 4841536 CCT TTA CCT GGA AGT TCA TCA AGA ATG CCA GGT GAA CTC GTT TTG GAG1583485 Pro Leu Pro Gly Ser Ser Ser Arg Met Pro Gly Glu Leu Val Leu Glu 5001584 ACT AGG ATG TCT GAT GTT GTT AAA GGT GTC TAC AAA GAA AAG GAT AAT1631501 Thr Arg Met Ser Asp Val Val Lys Gly Val Tyr Lys Glu Lys Asp Asn 5161632 GAA GAG TTG ACA ATT AGT TGC CCA GTG CCT GCA GAT GAG CAG ACA GAA1679517 Glu Glu Leu Thr Ile Ser Cys Pro Val Pro Ala Asp Glu Gln Thr Glu 5321680 TGC ACT TCT GCC CAG CAA CTC AAT ATG AGT ACC AGT TCT CCA TGT GCT1727533 Cys Thr Ser Ala Gln Gln Leu Asn Met Ser Thr Ser Ser Pro Cys Ala 5481728 GCT GAG CTT ACT GCA TTA AGC ACA ACT CAG CAA GAA AAG GAT CTA ATA1775549 Ala Glu Leu Thr Ala Leu Ser Thr Thr Gln Gln Glu Lys Asp Leu Ile 5641776 GAA GAT TCC TCT GTT CAG AAG GAT GGT CTC AAT CAG ACA ACT ATA CCA1823565 Glu Asp Ser Ser Val Gln Lys Asp Gly Leu Asn Gln Thr Thr Ile Pro 5801824 GTT TCT CCT CCA AGT ACT ACA AAG CCA TCG AGG GCA AGT ACT GCT TCA1871581 Val Ser Pro Pro Ser Thr Thr Lys Pro Ser Arg Ala Ser Thr Ala Ser 5961872 CCA TGT AAT AAT AAC ATA AAT GCA GCT ACA GCT GTG GCT CTA CAG GAA1919597 Pro Cys Asn Asn Asn Ile Asn Ala Ala Thr Ala Val Ala Leu Gln Glu 6121920 CCC CGA AAG TTA AGT TAT GCT GAA GTG TGC CAG AAG CCC CCT AAA GAG1967613 Pro Arg Lys Leu Ser Tyr Ala Glu Val Cys Gln Lys Pro Pro Lys Glu 6281968 CCA TCT TCA GTT CTT GTG CAG CCA CTA CGG GAA CTT CGC TCC AAT GTG2015629 Pro Ser Ser Val Leu Val Gln Pro Leu Arg Glu Leu Arg Ser Asn Val 6442016 GTG TCT CCC ACC AAA AAT GAA GAC AAT GGA GCT CCT GAG AAC TCC GTT2063645 Val Ser Pro Thr Lys Asn Glu Asp Asn Gly Ala Pro Glu Asn Ser Val 6602064 GAG AAA CCA CAT GAG AAG CCA GAA GCA AGG GCT AGT AAG GAT TAT TCT2111661 Glu Lys Pro His Glu Lys Pro Glu Ala Arg Ala Ser Lys Asp Tyr Ser 6762112 GGC TTC CGA GGC AAT ATA ATC CCC AGG GGA GCA GCA GGA AAA ATC AGG2159677 Gly Phe Arg Gly Asn Ile Ile Pro Arg Gly Ala Ala Gly Lys Ile Arg 6922160 GAA CAG AGA CGC CAG TTT AGC CAT AGG GCT ATA CCT CAG GGA GTG ACT2207693 Glu Gln Arg Arg Gln Phe Ser His Arg Ala Ile Pro Gln Gly Val Thr 7082208 CGA CGT AAT GGC AAA GAG CAA TAT GTG CCA CCC AGA TCA CCA AAG TAA2255709 Arg Arg Asn Gly Lys Glu Gln Tyr Val Pro Pro Arg Ser Pro Lys *** 7242256 AAA ACA ACA AAA CTA TTC AAA AAC TTC ACT CTC TTC CCA TTA AAC TTG23032304 AAC TGT GGC TAT ATT GAA CTG TTT TGG AGG GGA GGG GGT AGC CAG GAA23512352 GGA ACA AGA GAA AGT ACG TCC ATT TCA TTA TGG ATT TTG GAG TTG TGA23992400 GTG ATA GGA TCC GAA AAT TCA TCT CTA ATG TGG TTT TTA AAT GCT GGA24472448 GGA TTC CAA TCA ATA TAA ATA TAT ATA TAT ATA CAC ACA CAT ATA TAA24952496 AAA GTA TAA TTT TTC TAT TTT TGT TTT TGG TTT TAA TTT GCA GAG ATT25432544 TGC TGC CAG GAA TCA ATT TTG AGG GTT CAG ATT TAG CTT GGA AGA AAA25912592 AAA AGA AAC ATA CAT CCT TCA GTA TAG GAG ATG AGG GAA TGA GAG AAA26392640 ATA TTT TTT GAA AAA GCA TTT CTG TAA AAT TAG AAA TTA CTT TTT TTA26872688 ATC TAT TTA AAG TTT GGC TTG AAG AAT GCC ATC TCT GAC TAT ATG GCC27352736 TTG TAT TGC AAA GCA GAT CAG TGG CTG GGG TGC CTG TTG TGG GTG TGA27832784 GTG TGT ACA AGA GCG ATT GAA GCC AAA TCT GTT GTC ATG TTA GTA AAT28312832 GAT TTG AAA ACT GAA TGT AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA28792880 AAA AAA AAA A 28899.PPl4214A核苷酸序列(SEQ ID NO25)长度717个碱基1 GCTTCGGATG ACTGCAGAAA ATAGTGTTTT GTAGTTCAAC AACTCAAGAC 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ACT GCA GAA AAT AGT GTT TTG TAG TTC AAC AAC TCA4647 AGA CGA AGC TTA TTT CTG AGG ATA AGC TCT TTA AAG GCA AAG CTT TAT9495 TTT CAT CTC TCA TCT TTT GTC CTC CTT AGC ACA ATG TAA AAA AGA ATA 142143 GTA ATA TCA GAA CAG GAA GGA GGA ATG GCT TGC TGG GGA GCC CAT CCA 190191 GGA CAC TGG GAG CAC ATA GAG ATT CAC CCA TGT TTG TTG AAC TTA GAG 238239 TCA TTC TCA TGC TTT TCT TTA TAA TTC ACA CAT ATA TGC AGA GAA GAT 286287 ATG TTC TTG TTA ACA TTG TAT ACA ACA TAG CCC CAA ATA TAG TAA GAT 334335 CTA TAC TAG ATA ATC CTA GAT GAA ATG TTA GAG ATG CTA TAT GAT ACA 3821 Met Leu Glu Met Leu Tyr Asp Thr 8383 ACT GTG GCC ATG ACT GAG GAA AGG AGC TCA CGC CCA GAG ACT GGG CTG 4309 Thr Val Ala Met Thr Glu Glu Arg Ser Ser Arg Pro Glu Thr Gly Leu 24431 CTC TCC CGG AGG CCA AAC CCA AGA AGG TCT GGC AAA GTC AGG CTC AGG 47825 Leu Ser Arg Arg Pro Asn Pro Arg Arg Ser Gly Lys Val Arg Leu Arg 40479 GAG ACT CTG CCC TGC TGC AGA CCT CGG TGT GGA CAC ACG CTG CAT AGA 52641 Glu Thr Leu Pro Cys Cys Arg Pro Arg Cys Gly His Thr Leu His Arg 56527 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GLCGVSHEAA ARFVPQAWSC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO30)克隆号和蛋白名称FP497起始编码子1096 ATG 终止编码子1423 TGA 蛋白质分子量12226.161 GAC TGG ACG GCA GGG AGT GGG GCT GTC ATC ATC AGA TGA GAG CTA AGG 4849 GGA CCC CCA CCA GGG TGG CGG CAA TGG CAG AGG GTA GGC AAA ACG CTT 9697 GTA TTT GCA ACA TAA GGT GAG ATT TGA CAG CTG ACC GAG GGT GGG AGC 144145 AGC AGC CAA AAC CAA AAA AGC CAG AGG GAA GTT GCA AGC ACA GAA AAA 192193 ATA GAA GAT TTA ATG GGA GAA ATA ACA ATA GCT GGC ATC TAT TGA ACA 240241 CTT ACT GGG AGC TAG GTA CAG GGC CCA TTC ATT CAT TCA TGC AAT TAA 288289 AAC TTT TTT TAA GAA ACG GGG TCT TGC TCT GTT GCC CAG GCT GGA GTG 336337 CAG TGG TGT GAT CAC AGC TCA CTG CAG CCT TGA ATT CCT GGC CTC AAG 384385 GAG TCC TCC CAC CTC GGC CTC CTG TGT AGC TGG GAT TAT AGG TAC GTG 432433 CGG TAC ACC TGG CTC CCT TTA AAA GTT TTT TGT AGA GGC AGG GCA CAG 480481 TGG CTC ACA CCT GTA ATC CCA GCA CTT TGG GAG GCC GAG GCA GGA GGA 528529 TCA CAA GGT CAG GAG TTC GAG ACC AGC CTG ACC AAC ATG GTG AAA CCC 576577 GTC TCT ACT TAA AAT ACA AAA ATT AGC CGG GTG TGG 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GGC CTT CAT23042305 ATC ATC CCC ACA TGA ATC TGC ACA TCT GTA AAT CTA CAC ACG GGG CCT23522353 TTA TTT CCC CTG GGC AGG GTC CCC CTT AAA AAT TAA ATT GGA AAG CAG24002401 GGT TCA AGG AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AA 244411. FP585A核苷酸序列(SEQ ID NO31)长度1288个碱基1 GTGCTGGGCA GCTTGAGTTT TCCCCAGGCT GCTCTATTGT TGCCTGTAGC TGTGATTTTT61 CAGGCAGGCT GCTCCTCTGA GGACCACCCT TAACTGTCTA CCTAACTGGT TTTTCCTTTT121 CTTCTCCTCA TTTGTATTTA TGTATCAGTG TATTATGTAT TTATATACAC TTGGAGATAC181 AGTAAAATGT ACCTCTCACT GTGGGTTACC ATAAATACTG TAAATTTGAG AAACACTCTT241 TCAGGCCTGA GAGGAGCAGT GACAACAGTA GGGATGATCA AGTCAGATGT CCCTGGTACC301 CAGGAATGGC TGGATGAGAG AAGGAGACAG GGTGACCTGC CCCTGCCTAC AAACTCTAAC361 CCAGTTCTGT CCCTGGAGCT GTGTGACCCC GGACAAGGCC CTGCCCCTTT CCAGGCTGTC421 GTTGTCCTCA TCCAGCCTGG GAGAGGGTTG GCGCTGAGGC CCCCACCTTC TTGCCTGTTT481 CCTCCTGACC CCACCCCTTC CCCTCCTGCT GGGCAGATCC GAGTGAAGCC TGACAGGACC541 GGTGTGGTCA CGGATGGTGT GAAGCACTCC ATGAACCCCT TCTGTGAGAT CGCGGTGGAG601 GAGGCTGTGC GGCTCAAGGA GAAGAAGCTG GTGAAGGAGG TCATCGCCGT CAGCTGTGGG661 CCTGCACAGT GCCAGGAGAC GATTCGTACC GCCCTGGCCA TGGGTGCAGA CCGAGGTATC721 CACGTGGAGG TGCCCCCAGC AGAAGCAGAA CGCTTGGGTC CCCTGCAGGT GGCTCGGGTC781 CTGGCCAAGC TGGCAGAGAA GGAGAAGGTG GACCTGGTGC TGCTGGGCAA ACAGGCCATC841 GATGATGACT GTAACCAGAC AGGGCAGATG ACAGCTGGAT TTCTTGACTG GCCACAGGGC901 ACATTCGCCT CCCAGGTGAT GCTGGAGGGG GACAAGTTGA AAGTGGAGCG GGAGATCGAT961 GGGGGCCTGG AGACCCTGCG CCTGAAGCTG CCAGCTGTGG TGACAGCTGA CCTGAGGCTC1021 AACGAGCCCC GCTACGCCAC GCTGCCCAAC ATCATGAAAG CCAAGAAGAA GAAGATCGAG1081 GTGATCAAGC CTGGGGACCT GGGTGTGGAC CTGACCTCCA AGCTCTCTGT GATCAGTGTG1141 GAGGACCCGC CCCAGCGCAC GGCCGGCGTC AAGGTGGAGA CCACTGAGGA CCTGGTGGCC1201 AAGCTGAAGG AGATTGGGCG GATTTGAGCC CCTCCCAGAG ATGGCAATAA AACTGACTCT1261 CAACATCTAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAB核苷酸序列(SEQ ID NO32)长度346个氨基酸1 MYLSLWVTIN TVNLRNTLSG LRGAVTTVGM IKSDVPGTQE WLDERRRQGD LPLPTNSNPV61 LSLELCDPGQ GPAPFQAVVV LIQPGRGLAL RPPPSCLFPP DPTPSPPAGQ IRVKPDRTGV121 VTDGVKHSMN PFCEIAVEEA VRLKEKKLVK EVIAVSCGPA QCQETIRTAL AMGADRGIHV181 EVPPAEAERL GPLQVARVLA KLAEKEKVDL VLLGKQAIDD DCNQTGQMTA GFLDWPQGTF241 ASQVMLEGDK LKVEREIDGG LETLRLKLPA VVTADLRLNE PRYATLPNIM KAKKKKIEVI301 KPGDLGVDLT SKLSVISVED PPQRTAGVKV ETTEDLVAKL KEIGRIC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO33)克隆号和蛋白名称FP585起始编码子187 ATG 终止编码子1225 TGA 蛋白质分子量37462.561 GTG CTG GGC AGC TTG AGT TTT CCC CAG GCT GCT CTA TTG TTG CCT GTA 4849 GCT GTG ATT TTT CAG GCA GGC TGC TCC TCT GAG GAC CAC CCT TAA CTG 9697 TCT ACC TAA CTG GTT TTT CCT TTT CTT CTC CTC ATT TGT ATT TAT GTA 144145 TCA GTG TAT TAT GTA TTT ATA TAC ACT TGG AGA TAC AGT AAA ATG TAC 1921 Met Tyr 2193 CTC TCA CTG TGG GTT ACC ATA AAT ACT GTA AAT TTG AGA AAC ACT CTT 2403 Leu Ser Leu Trp Val Thr Ile Asn Thr Val Asn Leu Arg Asn Thr Leu 18241 TCA GGC CTG AGA GGA GCA GTG ACA ACA GTA GGG ATG ATC AAG TCA GAT 28819 Ser Gly Leu Arg Gly Ala Val Thr Thr Val Gly Met Ile Lys Ser Asp 34289 GTC CCT GGT ACC CAG GAA TGG CTG GAT GAG AGA AGG AGA CAG GGT GAC 33635 Val Pro Gly Thr Gln Glu Trp Leu Asp Glu Arg Arg Arg Gln Gly Asp 50337 CTG CCC CTG CCT ACA AAC TCT AAC CCA GTT CTG TCC CTG GAG CTG TGT 38451 Leu Pro Leu Pro Thr Asn Ser Asn Pro Val Leu Ser Leu Glu Leu Cys 66385 GAC CCC GGA CAA GGC CCT GCC CCT TTC CAG GCT GTC GTT GTC CTC ATC 43267 Asp Pro Gly Gln Gly Pro Ala Pro Phe Gln Ala Val 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Gly 3061105 GTG GAC CTG ACC TCC AAG CTC TCT GTG ATC AGT GTG GAG GAC CCG CCC1152307 Val Asp Leu Thr Ser Lys Leu Ser Val Ile Ser Val Glu Asp Pro Pro 3221153 CAG CGC ACG GCC GGC GTC AAG GTG GAG ACC ACT GAG GAC CTG GTG GCC1200323 Gln Arg Thr Ala Gly ValLys Val Glu Thr Thr Glu Asp Leu Val Ala 3381201 AAG CTG AAG GAG ATT GGG CGG ATT TGA GCC CCT CCC AGA GAT GGC AAT1248339 Lys Leu Lys Glu Ile Gly Arg Ile *** 3471249 AAA ACT GAC TCT CAA CAT CTA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 128812.FP588A核苷酸序列(SEQ ID NO34)长度2057个碱基1 GCCAAAGTGT TTTTGGTCAT TAACAGGAAG CATCTTTTCT ACATTACGGT TTCATGTGAC61 CAAATTATGG CCATAGTATT TCAGATTTAT TCATCCACTA AGTATTTATT AAGTACCTAT121 TCTGTGCTAG GTATCAGGTG CTGGGGCTAT AGCAGTAAGG AAAGTAAGTG GACAAAAGGA181 TTCCACACCT GTCACAGGCG CTGCCCCACT CCCTGAGTCA GGTGAGATGA GCTCCGGAAG241 GCAGGTGGGT AATGGATGAT GCTCACCTAG TGTTCCTTGG GCCATGAAGA TCAAATATTT301 CAGCCCCATA GGATGTGTAA GCTTGATTTC TGGTCATCTC TCCTTAAGGA ATCATGGACC361 ATTCATTATT TTGTTTAAAA GGACACATAA GAACGTACAT GTCTCAATAG AGTTACTGGT421 CACAGGACTG AACTGTGGTC ATGAAAGCCA AGCAACTTAC TTTCTGGCCT CCATATTGCT481 TTGTAGGAGA AATGATACTG ACAATGATGT CACACGAGGA GGGAAGCCAG GCACGAATCT541 GGTGGAGGTG CGGTCAGTTG TGACCAGCTT TGCAAAGGGA GCGGTGGGCG AGGCTGTGGT601 CTCTCCCAGG TGACCTCCAT CGCCATGCAG AGCTGCTCTC ACTTCTCCTC GGGAAAGGCC661 AGCGTCAGGT ATTCCTAGGA GGAAGCCCAG GTGTGTCCAG AGAACAGTAG TCTTGTTAGA721 ACTGGAAAAA TGTCTTATGG CCAGGTGGCC CCTGGTCTGA AGGAAAAATA GGAGCTGAGT781 GTGAACTTTT ATCACTCAGA AGATATAATC CACCTCTCCC CTCCTGCCCT TCGCTCCTGG841 GTTGGTTGTG AGGACAGTGC TTTGTGACAG CAGTGGAGCC CTGTCTGTCC TTCCGGGCTA901 GATTTCTTCT TTCTCTTATT CCTCCTGTTT CGTTGTATCC ACGATTTGTC GAGTTGCAGG961 GCTCACCCTT TCCTGAAGAA ACCATCTCTT TTCCCAGCTC CGCACCTTTG TCCGAGATGG1021 AGGCGTGTCC TCCCGCCCAT CCCCAGTGGG GGGTGTTCTG CCCATTCTCC AGAGCCCAGC1081 ACTGCTCCCA TCTCTTTTCC TCCCTCTCCT TCCCCTTGCT GTTACCTGCT GCCTTCTTGT1141 GCTCCCACTG CCCTTGGCCA TCCCTCTGTG TCATTGTGCG CTGTGGTGCA CCTGTCTTCT1201 CTACTACACC TTAAGAGCAG GACTCTGCCT CCTTCCTACC AGCACCTCAT GCAGCAAGTG1261 CTGCCAATAG CAGGCACCCA GCAGATAGCG AATGCACGAC TCCAAAACCC AGCTTTGCCT1321 CCTGGCTGTA GTTCAGACTA GCTGTGTGAC ACTGACCAAG ACACTTGACC TCTCTCAGAC1381 TCAGCTTCCT CCTTGAAGAC TGGGATGCTA TGTAGCTCAG AGGAAACATA CACCTGAAGG1441 TGCTGCCCCG GGGGGTGCAA TGACCTGTTA CTGAGGCTGG ATGGAGGATG GCATCCATCA1501 TCAGCTACAG GTGCCTCCTC TATCTACAGG TTCCTGCTCC ATCTATACTA GCCACCTCCT1561 GGACAAGGGC TCCAGTGTCC TCCATGACAC CAGCTTTCTC CAGAGCCTGT GCAGGATTTC1621 CTTCCTCTAC CCTGAATCAG GGTGATTCTT AAAGGACAGT TTCAGGAACA TATAGGGGCA1681 CTTGGGTAAT CTTGGTCAGT AACTGACCTT TAACTATCAT CCATGTGAAC ATCTACAGTT1741 AGGGATTTTC TTGGTGATGT TTGGCAAAAA GTAAAGAATT CCCCAAGTGT GAAGCCTCAT1801 TCATTCACTT ATTCAACAM TAGTTATTGA GCACCTACTA TGTGTTAGGC CCTGGGCCAG1861 GTGCTGGGAA TACAGCAGAG ACAGACCTGG CTCCTGCCCT CATGGAGTTT GCAGTCATTC1921 ATTCACTCAC TCGGTGACTT TGGACACCTC CCCCTCCTCT CTCCAGGCTT TAGATCTCTG1981 AGATTCTCTC TGAGTCTGGG ATGTAAAGAC AAAGTAAAAC CTGAAATCTG GAAAGCAAAA2041 AAAAAAAAAA AAAAAAAB核苷酸序列(SEQ ID NO35)长度109个氨基酸1 MKIKYFSPIG CVSLISGHLS LRNHGPFIIL FKRTHKNVHV SIELLVTGLN CGHESQATYF61 LASILLCRRN DTDNDVTRGG KPGTNLVEVR SVVTSFAKGA VGEAVVSPRC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO36)克隆号和蛋白名称FP588起始编码子284 ATG 终止编码子611 TGA 蛋白质分子量11862.161G CCA AAG TGT TTT TGG TCA TTA ACA GGA AGC ATC TTT TCT ACA TTA 4647 CGG TTT CAT GTG ACC AAA TTA TGG CCA TAG TAT TTC AGA TTT ATT CAT 9495 CCA CTA AGT ATT TAT TAA GTA CCT ATT CTG TGC TAG GTA TCA GGT GCT 142143 GGG GCT ATA GCA GTA AGG AAA GTA AGT GGA CAA AAG GAT TCC ACA CCT 190191 GTC ACA GGC GCT GCC CCA CTC CCT GAG TCA GGT GAG ATG AGC TCC GGA 238239 AGG CAG GTG GGT AAT GGA TGA TGC TCA CCT AGT GTT CCT TGG GCC ATG 2861 Met 1287 AAG ATC AAA TAT TTC AGC CCC ATA GGA TGT GTA AGC TTG ATT TCT GGT 3342 Lys Ile Lys Tyr Phe Ser Pro Ile Gly Cys Val Ser Leu Ile Ser Gly 17335 CAT CTC TCC TTA AGG AAT CAT GGA CCA TTC ATT ATT TTG TTT AAA AGG 38218 His Leu Ser Leu Arg Asn His Gly Pro Phe Ile Ile Leu Phe Lys Arg 33383 ACA CAT AAG AAC GTA CAT GTC TCA ATA GAG TTA CTG GTC ACA GGA CTG 43034 Thr His Lys Asn Val His Val Ser Ile Glu Leu Leu Val Thr Gly Leu 49431 AAC TGT GGT CAT GAA AGC CAA GCA ACT TAC TTT CTG GCC TCC ATA TTG 47850 Asn Cys Gly His Glu Ser Gln Ala Thr Tyr Phe Leu Ala Ser Ile Leu 65479 CTT TGT AGG AGA AAT GAT ACT GAC AAT GAT GTC ACA CGA GGA GGG AAG 52666 Leu Cys Arg Arg Asn Asp Thr Asp Asn Asp Val Thr Arg Gly Gly Lys 81527 CCA GGC ACG AAT CTG GTG GAG GTG CGG TCA GTT GTG ACC AGC TTT GCA 57482 Pro Gly Thr Asn Leu Val Glu Val Arg Ser Val Val Thr Ser Phe Ala 97575 AAG GGA GCG GTG GGC GAG GCT GTG GTC TCT CCC AGG TGA CCT CCA TCG 62298 Lys Gly Ala Val Gly Glu Ala Val Val Ser Pro Arg *** 110623 CCA TGC AGA GCT GCT CTC ACT TCT CCT CGG GAA AGG CCA GCG TCA GGT 670671 ATT CCT AGG AGG AAG CCC AGG TGT GTC CAG AGA ACA GTA GTC TTG TTA 718719 GAA CTG GAA AAA TGT CTT ATG GCC AGG TGG CCC CTG GTC TGA AGG AAA 766767 AAT AGG AGC TGA GTG TGA ACT TTT ATC ACT CAG AAG ATA TAA TCC ACC 814815 TCT CCC CTC CTG CCC TTC GCT CCT GGG TTG GTT GTG AGG ACA GTG CTT 862863 TGT GAC AGC AGT GGA GCC CTG TCT GTC CTT CCG GGC TAG ATT TCT TCT 910911 TTC TCT TAT TCC TCC TGT TTC GTT GTA TCC ACG ATT TGT CGA GTT GCA 958959 GGG CTC ACC CTT TCC TGA AGA AAC CAT CTC TTT TCC CAG CTC CGC ACC10061007 TTT GTC CGA GAT GGA GGC GTG TCC TCC CGC CCA TCC CCA GTG GGG GGT10541055 GTT CTG CCC ATT CTC CAG AGC CCA GCA CTG CTC CCA TCT CTT TTC CTC11021103 CCT CTC CTT CCC CTT GCT GTT ACC TGC TGC CTT CTT GTG CTC CCA CTG11501151 CCC TTG GCC ATC CCT CTG TGT CAT TGT GCG CTG TGG TGC ACC TGT CTT11981199 CTC TAC TAC ACC TTA AGA GCA GGA CTC TGC CTC CTT CCT ACC AGC ACC12461247 TCA TGC AGC AAG TGC TGC CAA TAG CAG GCA CCC AGC AGA TAG CGA ATG12941295 CAC GAC TCC AAA ACC CAG CTT TGC CTC CTG GCT GTA GTT CAG ACT AGC13421343 TGT GTG ACA CTG ACC AAG ACA CTT GAC CTC TCl CAG ACT CAG CTT CCT13901391 CCT TGA AGA CTG GGA TGC TAT GTA GCT CAG AGG AAA CAT ACA CCT GAA14381439 GGT GCT GCC CCG GGG GGT GCA ATG ACC TGT TAC TGA GGC TGG ATG GAG14861487 GAT GGC ATC CAT CAT CAG CTA CAG GTG CCT CCT CTA TCT ACA GGT TCC15341535 TGC TCC ATC TAT ACT AGC CAC CTC CTG GAC AAG GGC TCC AGT GTC CTC15821583 CAT GAC ACC AGC TTT CTC CAG AGC CTG TGC AGG ATT TCC TTC CTC TAC16301631 CCT GAA TCA GGG TGA TTC TTA AAG GAC AGT TTC AGG AAC ATA TAG GGG16781679 CAC TTG GGT AAT CTT GGT CAG TAA CTG ACC TTT AAC TAT CAT CCA TGT17261727 GAA CAT CTA CAG TTA GGG ATT TTC TTG GTG ATG TTT GGC AAA AAG TAA17741775 AGA ATT CCC CAA GTG TGA AGC CTC ATT CAT TCA CTT ATT CAA CAA ATA18221823 GTT ATT GAG CAC CTA CTA TGT GTT AGG CCC TGG GCC AGG TGC TGG GAA18701871 TAC AGC AGA GAC AGA CCT GGC TCC TGC CCT CAT GGA GTT TGC AGT CAT19181919 TCA TTC ACT CAC TCG GTG ACT TTG GAC ACC TCC CCC TCC TCT CTC CAG19661967 GCT TTA GAT CTC TGA GAT TCT CTC TGA GTC TGG GAT GTA AAG ACA AAG20142015 TAA AAC CTG AAA TCT GGA AAG CAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 205713. FP757A核苷酸序列(SEQ ID NO37)长度1932个碱基1 GGAATCATTT TTTGAGGAGC GGGGGTACAG TTTAGTTTTG TTTCTACTTT TACCTTTTTT61 TTAAAATTAT TTAACTCTTT ATAACATGAT TTTTAAATGT ACACAAAGAT AAAAGGAAAA121 TTACAATGAA CACCTGTGTT CTAGTCATTT GGCTTCAACA GCTGTTATTT TCCTTTAATA181 GATAAGTATG GAAGAGTGGA AGCTTGCTTT CATCTTACTC CTCTGCCTTT CTCCCTAAAA241 CTCTCTCTTC CCACCCTATT ACTCAGAAAT CTTTTCCTCA TTCTTTATGT GTACTGTAAT301 ATATTTCATG AATCTCATGT GAAATTTTCT CTGTAATACA TATAGTATTC AATCTGTAAC361 CACTAAGAGC ACTTTGCAGA GTTAAAAATC TGGGATTTAT AGCAGTATTA ATTTTATTTA421 ATAAACTATG AAGTTAAATA TAAATATCAT CTGGGGTTTA TAGCAGTATT AATTTTAACA481 AGTAAGCTTA ATGTCATTGT CTTTTAGCAA ACTGAAACCG TGTCAGTTCA GTCTTCGGTA541 TTGGGGAAGG GTGTAAAACA TCGACCCCCA CCAATCAAAC TTCCCTCAAG CTCAGGAAAT601 AGTTCCTCAG GTAACTATTT TACACCACAA CAGACAAGCA GCTTTCTCAA ATCTCCAACT661 CCTCCTCCTT CTTCTAAGCC ATCAAGTATT CCTCGGAAAT CATCTGTGGA TCTCAATCAA721 GTTAGCATGC TTTCTCCAGC TGCCCTATCA CCTGCCAGCT CATCACAAAG AACCACGGCC781 ACCCAGGTCA TGGCAAACTC TGCTGGACTT AACTTCATCA ATGTAGTGGG CTCTGTTTGT841 GGGGCCCAGG CTTTGATGAG TGGTCAAACC CCATGCTGGG CTGTAACACT GGTGCCATAA901 CTCCTGCAGG AATAAACCTG AGCGGCCTTC TACCCTCAGG AGGTCTGCTA CCAAATGCAC961 TGCCCAGTGC AATGCAGGCA GCTTCTCAAG CAGGTGTTCC ATTTGGTTTA AAAAATACTT1021 CAAGTCTCAG GCCCTTAAAT CTACTCCAGC TTCCAGGTGG TTCACTTATT TTTAACACTC1081 TGCAGCAGCA GCAACAGCAG CTCTCCCAGT TTACACCACA ACAACCTCAG CAGCCCACAA1141 CTTGTAGTCC TCAACAGCCA GGGGAGCAGG GTTCTGAGCA AGGTTCAACC AGTCAAGAAC1201 AGGCCTTATC TGCTCAGCAA GCTGCTGTTA TTAACCTTAC TGGAGTAGGA AGTTTTATGC1261 AGTCACAGGC AGCTGTGTTG TCTCAGCTTG GCTCTGCCGA GAACAGACCT GAGCAAAGCC1321 TTCCTCAGCA GAGATTCCAG CTCTCCTCTG CCTTTCAACA GCAGCAGCAA CAGATACAAC1381 AGTTGCGATT CTTGCAGCAT CAAATGGCTA TGGCAGCAGC AGCAGCACAA ACAGCTCAGC1441 TACATCATCA TCGGCATACA GGCAGCCAGT CAAAAAGTAA AATGAAGAGA GGCATGCCAA1501 CCACTCCAAA ATTTTGAGTC TTGCATTACT TTTTGTTCCT TTTTTAAAAA CACAAGAGCA1561 CTGAATCAAA AGAATTGAGT TTCTACTTTT TGTTTTTTTT AATGTGTCAG TATTTTACAT1621 TGCTAGATGT ACAAACTTTA TACAGAAGCA CAACCTTATC ATTTTTAAAT AAAAACAGGG1681 AAATGGTTTA ACAAACTAGG GTTGGTTTGC CTAAGTCATT GCTTTTTAAA AATGGTTTCA1741 CTATACATAA TATATATGGA AGTGACCTAA GAAATAATAG AAACATCTTT CAGAAGAATG1801 TAGTTTGATA TTTATTTAGT ATAAAACGTT TGTGCACAGT GTTAACAAAT ACAATTTTTA1861 CAAATCTGTT TTGAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA1921 AAAAAAAAAA AAB核苷酸序列(SEQ ID NO38)长度214个氨基酸1 MLGCNTGAIT PAGINLSGLL PSGGLLPNAL PSAMQAASQA GVPFGLKNTS SLRPLNLLQL61 PGGSLIFNTL QQQQQQLSQF TPQQPQQPTT CSPQQPGEQG SEQGSTSQEQ ALSAQQAAVI121 NLTGVGSFMQ SQAAVLSQLG SAENRPEQSL PQQRFQLSSA FQQQQQQIQQ LRFLQHQMAM181 AAAAAQTAQL HHHRHTGSQS KSKMKRGMPT TPKFC.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO39) 克隆号和蛋白名称FP757起始编码子873 ATG 终止编码子1519 TGA 蛋白质分子量22775.561 GG AAT CAT TTT TTG AGG AGC GGG GGT ACA GTT TAG TTT TGT TTC TAC 4748 TTT TAC CTT TTT TTT AAA ATT ATT TAA CTC TTT ATA ACA TGA TTT TTA 9596 AAT GTA CAC AAA GAT AAA AGG AAA ATT ACA ATG AAC ACC TGT GTT CTA 143144 GTC ATT TGG CTT CAA CAG CTG TTA TTT TCC TTT AAT AGA TAA GTA TGG 191192 AAG AGT GGA AGC TTG CTT TCA TCT TAC TCC TCT GCC TTT CTC CCT AAA 239240 ACT CTC TCT TCC CAC CCT ATT ACT CAG AAA TCT TTT CCT CAT TCT TTA 287288 TGT GTA CTG TAA TAT ATT TCA TGA ATC TCA TGT GAA ATT TTC TCT GTA 335336 ATA CAT ATA GTA TTC AAT CTG TAA CCA CTA AGA GCA CTT TGC AGA GTT 383384 AAA AAT CTG GGA TTT ATA GCA GTA TTA ATT TTA TTT AAT AAA CTA TGA 431432 AGT TAA ATA TAA ATA TCA TCT GGG GTT TAT AGC AGT ATT AAT TTT AAC 479480 AAG TAA GCT TAA TGT CAT TGT CTT TTA GCA AAC TGA AAC CGT GTC AGT 527528 TCA GTC TTC GGT ATT GGG GAA GGG TGT AAA ACA TCG ACC CCC ACC AAT 575576 CAA ACT TCC CTC AAG CTC AGG AAA TAG TTC CTC AGG TAA CTA TTT TAC 623624 ACC ACA ACA GAC AAG CAG CTT TCT CAA ATC TCC AAC TCC TCC TCC TTC 671672 TTC TAA GCC ATC AAG TAT TCC TCG GAA ATC ATC TGT GGA TCT CAA TCA 719720 AGT TAG CAT GCT TTC TCC AGC TGC CCT ATC ACC TGC CAG CTC ATC ACA 767768 AAG AAC CAC GGC CAC CCA GGT CAT GGC AAA CTC TGC TGG ACT TAA CTT 815816 CAT CAA TGT AGT GGG CTC TGT TTG TGG GGC CCA GGC TTT GAT GAG TGG 863864 TCA AAC CCC ATG CTG GGC TGT AAC ACT GGT GCC ATA ACT CCT GCA GGA 9111 Met Leu Gly Cys Asn Thr Gly Ala Ile Thr Pro Ala Gly 13912 ATA AAC CTG AGC GGC CTT CTA CCC TCA GGA GGT CTG CTA CCA AAT GCA 95914 Ile Asn Leu Ser Gly Leu Leu Pro Ser Gly Gly Leu Leu Pro Asn Ala 29960 CTG CCC AGT GCA ATG CAG GCA GCT TCT CAA GCA GGT GTT CCA TTT GGT 100730 Leu Pro Ser Ala Met Gln Ala Ala Ser Gln Ala Gly Val Pro Phe Gly 451008 TTA AAA AAT ACT TCA AGT CTC AGG CCC TTA AAT CTA CTC CAG CTT CCA 105546 Leu Lys Asn Thr Ser Ser Leu Arg Pro Leu Asn Leu Leu Gln Leu Pro 611056 GGT GGT TCA CTT ATT TTT AAC ACT CTG CAG CAG CAG CAA CAG CAG CTC 110362 Gly Gly Ser Leu Ile Phe Asn Thr Leu Gln Gln Gln Gln Gln Gln Leu 771104 TCC CAG TTT ACA CCA CAA CAA CCT CAG CAG CCC ACA ACT TGT AGT CCT 115178 Ser Gln Phe Thr Pro Gln Gln Pro Gln Gln Pro Thr Thr Cys Ser Pro 931152 CAA CAG CCA GGG GAG CAG GGT TCT GAG CAA GGT TCA ACC AGT CAA GAA 119994 Gln Gln Pro Gly Glu Gln Gly Ser Glu Gln Gly Ser Thr Ser Gln Glu 1091200 CAG GCC TTA TCT GCT CAG CAA GCT GCT GTT ATT AAC CTT ACT GGA GTA 1247110 Gln Ala Leu Ser Ala Gln Gln Ala Ala Val Ile Asn Leu Thr Gly Val 1251248 GGA AGT TTT ATG CAG TCA CAG GCA GCT GTG TTG TCT CAG CTT GGC TCT 1295126 Gly Ser Phe Met Gln Ser Gln Ala Ala Val Leu Ser Gln Leu Gly Ser 1411296 GCC GAG AAC AGA CCT GAG CAA AGC CTT CCT CAG CAG AGA TTC CAG CTC1343142 Ala Glu Asn Arg Pro Glu Gln Ser Leu Pro Gln Gln Arg Phe Gln Leu 1571344 TCC TCT GCC TTT CAA CAG CAG CAG CAA CAG ATA CAA CAG TTG CGA TTC1391158 Ser Ser Ala Phe Gln Gln Gln Gln Gln Gln Ile Gln Gln Leu Arg Phe 1731392 TTG CAG CAT CAA ATG GCT ATG GCA GCA GCA GCA GCA CAA ACA GCT CAG1439174 Leu Gln His Gln Met Ala Met Ala Ala Ala Ala Ala Gln Thr Ala Gln 1891440 CTA CAT CAT CAT CGG CAT ACA GGC AGC CAG TCA AAA AGT AAA ATG AAG1487190 Leu His His His Arg His Thr Gly Ser Gln Ser Lys Ser Lys Met Lys 2051488 AGA GGC ATG CCA ACC ACT CCA AAA TTT TGA GTC TTG CAT TAC TTT TTG1535206 Arg Gly Met Pro Thr Thr Pro Lys Phe *** 2151536 TTC CTT TTT TAA AAA CAC AAG AGC ACT GAA TCA AAA GAA TTG AGT TTC15831584 TAC TTT TTG TTT TTT TTA ATG TGT CAG TAT TTT ACA TTG CTA GAT GTA16311632 CAA ACT TTA TAC AGA AGC ACA ACC TTA TCA TTT TTA AAT AAA AAC AGG16791680 GAA ATG GTT TAA CAA ACT AGG GTT GGT TTG CCT AAG TCA TTG CTT TTT17271728 AAA AAT GGT TTC ACT ATA CAT AAT ATA TAT GGA AGT GAC CTA AGA AAT17751776 AAT AGA AAC ATC TTT CAG AAG AAT GTA GTT TGA TAT TTA TTT AGT ATA18231824 AAA CGT TTG TGC ACA GTG TTA ACA AAT ACA ATT TTT ACA AAT CTG TTT18711872 TGA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA19191920 AAA AAA AAA AAA A 193权利要求
1.一种分离的具有抑癌功能的人蛋白，其特征在于，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35、38；或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。
2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35、38。
3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性；(a)编码如权利要求1和2所述多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。
4.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列SEQ ID NO2、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32、35、38。
5.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的序列选自下组SEQ ID NO3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36、39的编码区序列或全长序列。
6.一种载体，其特征在于，它含有权利要求3所述的多核苷酸。
7.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它是选自下组的一种宿主细胞(a)用权利要求6所述的载体转化或转导的宿主细胞；(b)用权利要求3所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。
8.一种具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽的制备方法，其特征在于，该方法包含(a)在适合表达具有抑癌功能的人蛋白的条件下，培养权利要求7所述的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽。
9.一种能与权利要求1所述的具有抑癌功能的人蛋白特异性结合的抗体。
10.一种药物组合物，其特征在于，它含有安全有效量的权利要求1所述的多肽以及药学上可接受的载体。
全文摘要
本发明公开了一类新的具有抑癌功能的人蛋白，编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病如癌症等的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。
文档编号C12N15/10GK1403475SQ0112672
公开日2003年3月19日 申请日期2001年9月12日 优先权日2001年9月12日
发明者顾健人, 杨胜利 申请人:上海新世界基因技术开发有限公司