专利名称：葫芦素固体脂质纳米粒制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药，特别是一种葫芦素固体脂质纳米粒制剂及其制备方法。
二背景技术：
葫芦素类(cucurbitacins)成分是从植物中提取的一类四环三萜类化合物，基 本碳氢骨架为19-失碳-邓-甲基-10a-羊毛甾烯-5，至今已发现40余种，以葫芦素 B(CucurbitacinB)、 E应用最广，此外还有葫芦素A、 D、 I等。该类成分具有抗 肿瘤、抗化学致癌、保肝、提高机体免疫力等多种生物活性，多数存在于葫芦 科植物中，在十字花科、玄参科、秋海棠科、杜英科等高等植物及一些大型真 菌中也有发现(杨凯,郑刚.葫芦素BE的药理作用研究进展.国际中医中药杂志， 2006， 28 (1) : 27-29)。
目前从葫芦科植物甜瓜(CucumismdoL.)瓜蒂中提取制得的葫芦素原料药 (葫卢素BE)已获得我国药品生产许可。甜瓜蒂是一种中药，从古至今均为治 疗黄疸病的有效药物，又因其能催吐、祛痰而用于痰涎宿食证。20世纪60年代 随着葫芦素化学结构的确立，开始有人研究其抗肿瘤作用。70年代初从甜瓜蒂
中分离出葫芦素B、 E等成分，并进行了抗肿瘤、抗肝炎等药理研究。已报道的
药理作用有细胞毒与抗癌作用；抗化学致癌作用；保肝、抗肝炎、抑制肝纤 维增生的作用；提高免疫功能；此外还有促进胃肠运动、增加毛细管通透性以 及避孕作用等。(吉宏.葫芦素及其药理学研究.国外医学中医中药分册，1996， 18(6): 13-14;刘颖菊，刘文清.葫芦素的药理与临床应用.中草药，1992， 23(11): 605-608.)
以葫卢素BE为原料制备的葫芦素片是临床上用于治疗慢性迁延性肝炎和 原发性肝癌的制剂之一。在治疗慢性肝炎方面，经上海、北京、重庆等地十三 家医院的临床研究表明，葫芦素片的有效率为75.2%，显效率为44.6%。该药 能明显改善慢性肝炎的常见症状,可降低转氨酶、降低胆红质，停药后不引起转 氨酶反跳，对蛋白倒置和高球蛋白血症也有明显的纠正作用，还能提高患者的 非特异性细胞免疫能力，无明显毒副作用(湖南医药工业研究所.甜瓜蒂提取物 洽疗慢性肝炎例临床结果,中草药，1982， 12(10)26-28.)在治疗原发性肝癌方面，对169例原发性肝癌患者的治疗表明，该药在改善患者临床症状、缓解肝痛、縮
小瘤体、延长生存期、恢复体力等方面均优于对照化疗药5-氟尿嘧啶。经治疗 后半年以上生存率为66.6%， 一年生存率为29%， 二年生存率为29%，三年以上 生存率为4.3%,总有效率为69%，其中显效率为29。/。。适于各型期肝癌，但II期 疗效优于m期，单纯型、硬化型优于炎症型(崔兴义.治疗肝癌新药一葫芦素技术 鉴定会在长沙召开.中草药，1985，15(4):34)。
葫芦素制剂在治疗剂量内对多种癌细胞显示出较强的杀伤作用，对骨髓造 血细胞和肝肾细胞无明显影响，还具有保肝、增强机体免疫力等作用。目前， 不断有其他药理作用被发现，其临床应用潜力及经济价值较高。葫芦素已上市 剂型主要为片剂。尽管片剂具有使用方便等优点，但是，由于葫芦素为强脂溶 性成分，在体液中溶出速度较慢，且波动较大，很难保证治疗效果的稳定，另 外，普通片剂无法满足吞咽困难患者或需要快速起效患者的要求。因此，探索 葫芦素新制剂的研究正在开展，主要包括葫芦素聚乳酸纳米粒、聚乳酸羟基乙 酸纳米球、滴丸、脂质体和注射用葫芦素B自微乳化药物传递系统等，其中以 聚乳酸为载体制备的制剂研究较多见于期刊，如张继芬等研究了葫卢素-聚乳酸 纳米粒的制备及载药过程，结果发现以沉淀法未能得到高包封率的药物制剂， 约70 %的葫芦素逐渐形成新晶核,以微晶形式存在于介质中，最终得到既有纳米 粒又有微晶的混悬体系(张继芬,侯世祥,刘惠莲,等.葫芦素-聚乳酸纳米粒的制备 及载药过程研究.中国中药杂志,2005， 30 (6) : 436-439.)。李超英等的研究表 明，葫芦素聚乳酸毫微粒胶体溶液的物理化学稳定性差，不宜制成液体型注射剂， 而其冻干针剂室温放置3个月稳定性良好，因此在适宜的处方及工艺条件下制 备其冻干针剂有一定的可行性(李超英，侯世祥，阳长明，等.葫芦素毫微粒冻干 针剂的研究.中国中药杂志，2001， 26 (5) : 315-317.)。杨凯等制备了葫芦素 BE聚乳酸纳米微粒用于口腔癌颈淋巴结转移患者，结果表明平均粒径为85nm 的制剂对其转移灶具有良好的靶向性，可达到提高转移灶内药物浓度和延长药 物持续时间的目的，同时降低了药物的毒副作用(杨凯,温玉明,李龙江,等.颈淋 巴靶向葫卢素BE聚乳酸纳米微粒冻干制剂的研制.华西口腔医学杂志,2001,19 (6) :345-349)。王丹蕾等采用溶剂挥发法制备葫芦素B聚乳酸羟基乙酸纳米球，纳米球混悬液在冰箱中4 "C保存1个月能基本保持稳定,长期放置则不稳定;纳 米球冻干品室温放置3个月，其pH值、粒度分布、包封率和载药量均无明显 变化(王丹蕾，陈大为，郭涛等，注射用葫芦素B聚乳酸羟基乙酸纳米球的制备. 沈阳药科大学学报，2006， 23 (6) 335-339)。李墨等研究了注射用葫芦素B 自微乳化药物传递系统的处方优化(李墨，赵秀丽，陈大为，等.注射用葫芦素 B自微乳化药物传递系统的处方优化.沈阳药科大学学报，2008， 25(1): 15-19)。
目前已申请并公开的葫芦素专利有28条，其中制剂专利，包括"葫芦素环 糊精包合物及其制剂，申请号02153647.3"，"纳米葫芦素制剂药物及其制备方 法，申请号01103658.3 "，"葫芦素脂质体组方及其制剂，申请号02144633.4"， " 一种可过滤除菌的葫芦素乳剂及制备方法，申请号200510046583.2"，"含有 蛋白的葫芦素纳米制剂及制备方法和用途，申请号200610091449.9"，"稳定型 葫芦素液体组方及其制剂，申请号200710011513.2"，"葫芦素液体型组方及其制 剂，申请号200410021536.8"等。
目前尚无葫芦素固体脂质纳米粒(SLN)的专利申请，SLN是一种新型的微粒 给药载体，由于采用与机体生理相容的固体脂质为基本骨架材料，因此对脂溶 性高的药物包封率高，非常适合作为葫戶素的载体。SLN粒子在室温下通常呈 固态，既具备聚合物纳米粒物理稳定性高、药物泄漏慢的优势，又兼具了脂质 体、乳剂的毒性低、能大规模生产的优点，是一种极有发展前景的新型给药系 统。迄今为止，只有一篇有关该制剂的文献报道(付彬彬，注射用葫芦素固体 脂质纳米粒的研究。沈阳沈阳药科大学硕士论文，2004)。该论文中记载的具 体处方及制备方法为称取300mg的卵磷脂和200mg泊洛沙姆188,加热使溶 于20mL的注射用水中，构成水相。称取200mg的单硬脂酸甘油酯，加热到(75 士2)。C使熔，将10mg的葫芦素分散到搅拌的熔融单硬脂酸甘油酯中，构成油相。 将水相加热到相同的温度，注入搅拌中的油相，恒温搅拌，制成初乳。趁热将 初乳进行超声再分散(超声5s，间歇5s，超声时间6min，超声功率设定为400w)， 自然放冷，即得葫芦素SLN的混悬液。最后需通过0.22微米的微孔滤膜，以达 到除菌的目的。但是，该制剂存在明显不足，主要在于所制葫卢素固体脂质纳 米粒液体制剂的稳定性较差，在室温下储存仅2个月即出现粒径明显增大、外观混浊度加大等现象，质量差，没有推广应用价值。该制剂以乳化-超声方法来 制备，但是没有筛选到合适的辅料及处方，而且表面活性剂的用量较大，是脂 质的2.5倍，另外在制备工艺上的研究不够深入，如表面活性剂的加入方法等对 其稳定性也有影响。因此，其改进和创新势在必行。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术缺陷，本发明之目的就是提供一种葫卢素 固体脂质纳米粒制剂及其制备方法，可有效解决稳定性差、质量差的问题，其 解决的技术方案是，该制剂由葫芦素、脂质材料和表面活性剂以重量比计为
0.001-30 : 0.01-99 : 0.01-50 (即:葫卢素:脂质材料:表面活性剂=0.001-30 : 0.01-99 : 0.01-50)，葫芦素、脂质材料与表面活性剂之和，为纳米粒制剂原料总 重量的0.1-40%;其基本制备方法是将脂质材料、表面活性剂和葫戸素避光加热 熔融并充分混匀，加水相分散至纳米级，保持熔融状态下过滤并冷却，其基本 步骤为
1) 含药相的制备在高于脂质熔点l(TC以上的温度，将脂质材料和表面活 性剂加热熔融，加入葫芦素快速混合搅拌均匀，备用，或在高于脂质熔点l(TC 以上的温度，先将脂质材料加热熔融，再将表面活性剂与葫芦素混合后快速与 熔融的脂质材料搅拌混合均匀，备用(有时将表面活性剂加入水相而不加入脂 相，其加入相及加入量由具体处方决定)；
2) 水相的制备将处方中含药相以外的其它成分加入水或极性较大的溶剂 中混匀成水相；
3) 粒子分散在高于脂质熔点温度条件下，将水相加入到含药相中，用磁 力搅拌器、搅拌分散机或玻璃棒等初步混匀，再采用超声波细胞粉碎机、微射 流、高压乳匀机、剪切式高速分散机、胶体磨等中的一种或者几种进行操作将 制剂进一步分散至纳米级粒子，或采用超声法，将含药相与水相混合后直接分 散至纳米级。
4) 过滤分散好的制剂在保温条件下挤压通过孔径为0.1-0.8 Pm的微孔滤膜。
5) 储存密封后室温(18-25°C，以下同)条件下避光放置。其中所说的葫芦素固体脂质纳米粒制剂包括以所制的葫卢素固体脂质纳米 粒为原料进一步制备具有治疗作用的注射剂、合剂、软胶囊、软膏、凝胶剂、 栓剂、喷雾剂、滴鼻剂、滴丸等剂型药物。
葫芦素、脂质材料与表面活性剂之重量比最好为0.01-10:50-80:20-50，
葫芦素、脂质材料与表面活性剂之和，为纳米粒制剂原料总重量的0.1-10%;
所说的葫芦素包括有葫芦素有效部位提取物、葫卢素单体及其混合物、葫
芦素BE、葫芦素B、葫戸素E等葫卢素类化合物；
所说的脂质材料含有单、二或三脂肪酸甘油酯、脂肪酸、脂肪醇、蜡类、 胆固醇等脂质中的一种或两种以上的混合物，如硬脂酸、十八醇、三硬脂酸甘
油酯、棕榈酸、肉豆蔻酸、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕榈酸甘油酯(PrecirolATO 5)、山嵛酸甘油酯(comprito1 888 ATO)、十六酸等，其中，以单、二或三脂肪 酸甘油酯的脂质混合物为脂质最好，其最佳混合重量比例为单硬脂酸甘油酯 硬脂酸棕榈酸甘油酯/山嵛酸甘油酯=2 4 : 6 8，最好是2 : 8 4 : 6。
所说的表面活性剂包括有可药用的各种表面活性剂及其混合物，如泊洛沙 姆、卵磷脂、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油(ELP)、苄泽、吐温、司盘等中的一种 或几种的混合物，其中以泊洛沙姆类较好，如泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、泊 洛沙姆124、泊洛沙姆237和泊洛沙姆338等。
本发明组方简单，配伍科学，用量合理，质量好，使用方便，稳定性好， 特别是作为新型的微粒给药载体，由于采用与机体生理相容的固体脂质为基本 骨架材料，因此对脂溶性高的药物包封率高，作为葫芦素的载体根本不用考虑 其他载体如脂质体、乳剂、聚合物纳米粒等对其的包封率可能低的问题。SLN 粒子在室温下通常呈固态，既具备聚合物纳米粒物理稳定性高、药物泄漏慢的 优势，又兼具了脂质体、乳剂的毒性低、能大规模生产的问题，是葫声素固体 脂质纳米粒制剂上的创新，经济和社会效益巨大。具体实施例方式
以下结合实施例对本发明的具体实施方式
作详细说明。
其中实施例中涉及的原料葫芦素BE (天津药物研究院药业有限公司)；单
硬脂酸甘油酯(长沙化学试剂厂，化学纯)；硬脂酸棕榈酸甘油酯(PrecirolATO5， GATTEFOSSE，法国)；十六酸(天津市光复精细化学研究所)；硬脂酸(天津 市凯通化学试剂有限公司)；泊洛沙姆188 (LutrolF68， BASF,德国)；泊洛沙 姆407(Lutro1 F127， BASF，德国)；山嵛酸甘油酯(Compritol 888 ATO，GATTEFOSSE 法国)；聚氧乙烯醚(35)蓖麻油(Cremophor ELP，德国BASF);大豆卵磷脂 (SPC，上海太伟药业有限公司)，吐温80 (北京市海淀会友精细化工厂)。
机械JY92-2D超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)；超 级恒温器(上海试验仪器厂)；T18型高速分散机(ULTRA TURRAX IKA ); M-110L 型高压微射流纳米分散仪(美国MFIC公司)Nano-ZS90激光粒度分析仪(英国马 尔文公司)；Z323K高速冷冻离心机(德国Hermle公司)。
实施例1
本发明在实施中是由葫芦素BE 0.003g、硬脂酸棕榈酸甘油酯0.35g、单 硬脂酸甘油脂0.15g、泊洛沙姆188 0.25g、超纯水10ml制成，其中，精密称取 各成分，将硬脂酸棕榈酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆188在9(TC温度 下加热熔融后，加入葫芦素BE，用玻璃棒快速搅拌混匀，置冰箱冷冻层使之凝 固，再将凝固的混合物转移至具保温套管的超声管中，超声温度为75°C,加10ml 超纯水，用超声波细胞粉碎机在超声功率400W的条件超声18次，每次超声10S (10秒)、间隔10S (即每次之间停10秒，再进行下一次超声)，之后保温(75 °C)吸取超声之后的分散液，趁热过0.22pm微孔滤膜，滤液在室温下冷却并充 氮气熔封，即得葫芦素固体脂质纳米粒制剂，室温(18-25°C，以下同)条件下 避光放置。
实施例2
本发明还可由葫芦素B0.008g、硬脂酸棕榈酸甘油酯0.5g、单硬脂酸甘油 酯0.2g、泊洛沙姆407 0.3g、卵磷脂O.lg、乙醇2mL、超纯水8ml制成，其
中，精密称取各成分，将硬脂酸棕榈酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆407 在9(TC温度下加热熔融后，加入葫芦素B，用玻璃棒快速搅拌混匀，置冰箱冷 冻层使之凝固，再将凝固的混合物转移至具保温套管的超声管中，超声温度为 7CTC，加2mL乙醇和8ml超纯水，用超声波细胞粉碎机在超声功率400W的条 件超声36次，每次超声5S、间隔5S，之后保温(70°C)吸取超声之后的分散液，趁热过0.22pm微孔滤膜，滤液在室温下冷却并充氮气熔封，即得葫芦素固 体脂质纳米粒制剂，室温条件下避光放置。 实施例3
本发明也可由葫芦素E0.05g、山嵛酸甘油酯0.3g、单硬脂酸甘油酯0.2g、 泊洛沙姆188 0.2g、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油0.3g、超纯水20ml制成，其中， 精密称取各成分，将山嵛酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆188在95。C温 度下加热熔融后，加入葫芦素E，用玻璃棒快速搅拌混匀，置冰箱冷冻层使之凝 固，再将凝固的混合物转移至具保温套管的超声管中，超声温度为8(TC，加20ml 超纯水，用超声波细胞粉碎机在超声功率600W的条件超声18次，每次超声IOS、 间隔10S，之后保温(8(TC)吸取超声之后的分散液，过0.22pm微孔滤膜，滤 液在室温下冷却并充氮气熔封，即得葫芦素固体脂质纳米粒制剂，室温条件下 避光放置。
实施例4
本发明由葫芦素BE 0.005g、山嵛酸甘油酯0. 35 g、单硬脂酸甘油酯0.15g、 泊洛沙姆188 0.25g和超纯水10ml制成，其中，精密称取各成分，将山嵛酸甘 油酯、单硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆188在95'C温度下加热熔融后，加入葫芦素 BE，用玻璃棒快速搅拌混匀，置冰箱冷冻层使之凝固，再将凝固的混合物转移 至具保温套管的超声管中，超声温度为8(TC，加10ml超纯水，用超声波细胞粉 碎机在超声功率500W的条件超声16次，每次超声5S、间隔5S，之后保温吸取 超声之后的分散液，过0.22[im微孔滤膜，滤液在室温下冷却并充氮气熔封，即 得葫芦素固体脂质纳米粒制剂，室温条件下避光放置。
实施例5
本发明也可由葫芦素BE 0.008g、山嵛酸甘油酯1.00g、单硬脂酸甘油 酯0.60g、泊洛沙姆188 1.40 g、超纯水40ml制成，其中，将山嵛酸甘油酯、 单硬脂酸甘油酯及泊洛沙姆188避光加热熔融后加入葫芦素BE，搅拌使之充分 混匀，在8(TC保温条件下进行以下操作混合物中首先加10ml同温超纯水，磁 力搅拌10min后补充30ml同温超纯水，用高速分散机以10000r/min的转速分散 10min，将初分散液趁热在18k的设定压力下用微射流反复匀化10次，匀化液过0.45)im微孔滤膜，过滤后在室温下冷却并充氮气熔封，即得。 实施例6
本发明是由葫芦素BE 0.012g、山嵛酸甘油酯1.00 g、泊洛沙姆188 0.70 g、超纯水40ml制成，其中，精密称取各成分，将山嵛酸甘油酯及泊洛沙姆188 在95"C温度下加热熔融后，加入葫芦素BE，搅拌使之充分混匀，在8(TC保温 条件下进行以下操作混合物中首先加10ml同温超纯水，磁力搅拌10min后补 充30ml同温超纯水，用高速分散机以9500r/min的转速分散10min，将初分散液 趁热在18k的设定压力下用微射流反复匀化10次，匀化液过0. 45pm微孔滤膜， 过滤后在室温下冷却并充氮气熔封，即得葫芦素固体脂质纳米粒制剂，室温条 件下避光放置。
实施例7
本发明由葫芦素BE 0.004g、山嵛酸甘油酯0. 50 g、泊洛沙姆188 0.35 g、 超纯水10ml制成，其中，精密称取各成分，将山嵛酸甘油酯、泊洛沙姆188在 95'C温度下避光加热熔融后，加入葫芦素BE，搅拌使之充分混匀，8(TC保温条 件下进行以下操作混合物中首先加6ml同温超纯水，在磁力搅拌8min后补充 4ml同温热水，用高速分散机以21500r/min的转速分散10min，之后保温(80 'C)吸取分散液，过0.45pm微孔滤膜，滤液在室温下冷却并充氮气熔封，即得 葫芦素固体脂质纳米粒制剂，室温条件下避光放置。
实施例8
本发明由葫芦素BE0.004g、十六酸0.05g、硬脂酸0.05g、单硬脂酸甘油 酯0.40g、泊洛沙姆407 0.35g、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油O.lg、超纯水10ml制
成，其中，精密称取各成分，将十六酸、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯和泊洛沙姆 407、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油在在95。C温度下避光加热熔融后，加入葫芦素 BE，用玻璃棒快速搅拌混匀，置冰箱冷冻层使之凝固，再将凝固的混合物转移 至具保温套管的超声管中，超声温度为8(TC，加10ml超纯水，用超声波细胞粉 碎机在超声功率400W的条件超声18次，每次超声IOS、间隔IOS，之后保温(80 °C)吸取超声之后的分散液，过0.22nm微孔滤膜，滤液在室温下冷却并充氮气 熔封，即得葫芦素固体脂质纳米粒制剂，室温条件下避光放置。实施例9
本发明由葫芦BE0.004g、三硬脂酸甘油酯0.005g、硬脂酸棕榈酸甘油酯 0.25g、单硬脂酸甘油酯0.2(^、泊洛沙姆188 0.20g、吐温80 0.05g、超纯水 10ml制成，其中，精密称取各成分，将三硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕榈酸甘油酯、 单硬脂酸甘油酯和泊洛沙姆188在卯'C温度下避光加热熔融后，加入葫芦素BE， 用玻璃棒快速搅拌混匀，置冰箱冷冻层使之凝固，再将凝固的混合物转移至具 保温套管的超声管中，超声温度为75'C，加溶解处方量吐温80的10ml超纯水， 用超声波细胞粉碎机在超声功率500W的条件超声36次，每次超声5S、间隔5S， 之后保温(75°C)吸取超声之后的分散液，过0.22pm微孔滤膜，滤液在室温下 冷却并充氮气熔封，即得葫芦素固体脂质纳米粒制剂，室温条件下避光放置。
本发明产品经测定和试验，其包封率高，质量稳定，具体情况如下 制剂表征方法及结果 (一)表征方法
l含量测定采用HPLC法测定制剂的含量
取40 u 1待测SLN样品置于5ml量瓶中，加入0. 5ml甲醇和1. Oml 二氯甲 垸溶解，用甲醇定容，过0.45um的有机微孔滤膜，取滤液20 ul进样测定， 记录记录色谱图及峰面积。将所得值代入标准曲线，计算葫芦素SLN中的葫戶 素B含量。
色谱柱Hypersil BDS C18(4. 6X250mm， 5Mm); 流动相乙腈-O. 06mol 1_1 KH2P04(45 : 55);流速l.Oml/min;紫外检测波长233nm;柱温室温；进样
量20Ug/ml;
2粒径及zeta电位
精密量取400pL的SLN制剤，用超纯水稀释50倍，通过纳米电位粒度测定 仪进行平均粒径及zeta电位的测定，样品池选用DTS1060-Disposable Zeta Cell,温度设为25r，得到3个Z均粒径值及3个zeta电位值。
3.包封率
采用离心-超滤法测定葫芦素固体脂质纳米粒的包封率。先离心移取游离药 物沉淀，再超滤得到游离药物溶液的方式，采用HPLC法测定，两者药量之和即为游离药物总量。
包封率(％)=(游离药物沉淀量+游离药物溶液量)/药物总量，具体见表2。 (二)表征结果
表l各实施例粒径的初步稳定性考査结果(n=3)
保存时 间参数S固SLN2SLN3SLN4SLN5SLN6SLN7SLN8SLN9
粒径118.4151.2121.063.3128.2216.0164.828.297.3
制备 初时±1.5±1.6±0.9±2. 1±3.2±4. 5±1. 5±2. 5±1. 1
PDI0. 23 +0. 24 +0.23 +0. 45 +0.45 +0. 46 +0. 39 +0. 55 +0. 28 +
0. 030. 020. 030. 050.060. 030. 040. 070. 03
粒径117.9 ±1.7153.1129.2 ±1. 164.5 ±2. 3129.1 ±3.5220.3 ±3.5162.5 ±2.429.3 ±1.897. 9 ±1.2
4个月PDI0.23 +0.25 +0.24 +0.47 +0.47 +0.45 +0.40 +0.53 ±0,28 ±
0. 050. 020. 050.040. 080. 050. 070. 060. 05
注PDI:粒径分布的多分散系数
由上表可知，各制剂室温避光条件下保存4个月，其粒径及分布与制备初时 相比均未发生显著变化，说明制剂具有较好的物理稳定性，在考察期间没有粒 子聚集现象发生。
表2综合稳定性及包封率试验结果(以实施例l为例，n二3)
保存时间含量％粒径(Z均)PDI (多分散 系数)zeta电位包封率％
制备初时100118.4±1.50. 23±0. 03-20. 37±1. 1797±2. 5
l个月101±0. 5119.5±2. 00. 24±0. 05-18. 88±2. 3598±3. 7
3个月98±2.6116. 1±2.60. 25±0. 03-19. 65±2,2997±4. 0
6个月99%±1. 6118. 7±1.80.23±0.06-18.65±3. 1296±2.8
由上表可知，制剂在6个月的储藏期间，各项指标均无显著变化，这说明 该制剂不仅具有较好的物理稳定性，还具有较好的化学稳定性。
权利要求
1、一种葫芦素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于，葫芦素、脂质材料和表面活性剂以重量比计为0.001-30∶0.01-99∶0.01-50，葫芦素、脂质材料与表面活性剂之和，为纳米粒制剂原料总重量的0.1-40％。
2、 根据权利要求1所述的葫芦素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于，所说 的葫芦素、脂质材料与表面活性剂之重量比为0.01-10:50-80:20-50。
3、 根据权利要求1或2所述的葫芦素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于， 所说的葫芦素、脂质材料与表面活性剂之和，为纳米粒制剂原料总重量的 0.1-10%。
4、 根据权利要求1或2或3所述的葫芦素固体脂质纳米粒制剂，其特征在 于，所说的葫芦素为葫芦素有效部位提取物、葫芦素单体、葫卢素BE、葫芦素 B、葫芦素E的任何一种，或其两种以上的混合物。
5、 根据权利要求1或2或3所述的葫戸素固体脂质纳米粒制剂，其特征在 于，所说的脂质材料为单、二或三脂肪酸甘油酯、脂肪酸、脂肪醇、蜡类、胆 固醇中的任何一种或两种以上的混合物。
6、 根据权利要求1或5所述的葫芦素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于， 所说的脂质材料为硬脂酸、十八醇、三硬脂酸甘油酯、棕榈酸、肉豆蔻酸、单 硬脂酸甘油酯、硬脂酸棕榈酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、十六酸的任何一种，或 其两种以上的混合物。
7、 根据权利要求5所述的葫芦素固体脂质纳米粒制剂，其特征在于，所说 的单硬脂酸甘油酯硬脂酸棕榈酸甘油酯/山嵛酸甘油酯的重量比为2 4 : 6 8。
8、 根据权利要求1或2或3所述的葫芦素固体脂质纳米粒制剂，其特征在 于，所说的表面活性剂为泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、泊洛沙姆124、泊洛沙 姆237、泊洛沙姆338、卵磷脂、聚氧乙烯醚(35)蓖麻油、苄泽、吐温、司盘 中的一种或两种以上的混合物。
9、 权利要求1所述的葫芦素固体脂质纳米粒制剂的制备方法，其特征在于， 将脂质材料、表面活性剂和葫芦素避光加热熔融并充分混匀，加水相分散至纳 米级，保持熔融状态下过滤并冷却，其步骤是1) 含药相的制备在高于脂质熔点1(TC以上的温度，将脂质材料和表面活 性剂加热熔融，加入葫芦素快速混合搅拌均匀，备用，或在高于脂质熔点l(TC 以上的温度，先将脂质材料加热熔融，再将表面活性剂与葫芦素混合后快速与 熔融的脂质材料搅拌混合均匀，备用；2) 水相的制备将处方中含药相以外的其它成分加入水中混匀；3) 粒子分散在高于脂质熔点温度条件下，将水相加入到含药相中，用磁 力搅拌器或搅拌分散机等初步混匀，再采用超声波细胞粉碎机、微射流、高压 乳匀机、剪切式高速分散机、胶体磨等中的一种或者几种进行操作将制剂进一 步分散至纳米级粒子，或采用超声法，将含药相与水相混合后直接分散至纳米 级。4) 过滤分散好的制剂在保温条件下挤压通过孔径为0.1-0.8 um的微孔滤膜；5) 储存密封后室温18-25"C条件下避光放置。
10、权利要求1所述的葫芦素固体脂质纳米粒制剂在制备治疗疾病的注射 剂、合剂、软胶囊、软膏、凝胶剂、栓剂、喷雾剂、滴鼻剂、滴丸剂型药物中 应用。
全文摘要
本发明之目的就是提供一种葫芦素固体脂质纳米粒制剂及其制备方法，可有效解决稳定性差、质量差的问题，其解决的技术方案是，该制剂由葫芦素、脂质材料和表面活性剂以重量比计为0.001-30∶0.01-99∶0.01-50，葫芦素、脂质材料与表面活性剂之和，为纳米粒制剂原料总重量的0.1-40％；其制备方法是将脂质材料、表面活性剂和葫芦素避光加热熔融并充分混匀，加水相分散至纳米级，保持熔融状态下过滤并冷却，本发明组方简单科学，配伍科学，用量合理，质量好，使用方便，稳定性好，既具备聚合物纳米粒物理稳定性高、药物泄漏慢的优势，又兼具了脂质体、乳剂的毒性低、能大规模生产的问题，是葫芦素固体脂质纳米粒制剂上的创新，经济和社会效益巨大。
文档编号A61K9/10GK101612119SQ20091006552
公开日2009年12月30日 申请日期2009年7月24日 优先权日2009年7月24日
发明者徐炳欣, 王艳芝, 郑甲信 申请人:郑州大学