专利名称：作为蛋白激酶抑制剂的2,7-取代的噻吩并[3,2-d]嘧啶化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种具有蛋白激酶抑制活性的2，7-取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物、一种药学上可接受的盐和一种包括该化合物作为有效成分的用于预防并治疗由异常细胞生长引起的疾病的药物组合物。
背景技术：
蛋白激酶是对蛋白的酪氨酸、丝氨酸和苏氨酸残基上的羟基的磷酸化起催化作用的酶。它在细胞的生长、分化和增殖中涉及的生长因子的信号转导方面起着重要作用。为了保持体内稳态，需要在信号转导系统的启动和关闭方面保持良好的平衡。然而，特异的蛋白激酶的突变或过表达破坏正常细胞中的信号转导系统，并引起包括癌、炎症、代谢性疾病、脑疾病等的各种疾病。导致由异常细胞生长引起的疾病的典型蛋白激酶包括 Raf、KDR、Fms, Tie2、SAPK2a、Ret、Abl.Abl (T315I)、ALK, Aurora A、Bmx, CDK/cyclinE、Kit、Src, EGFR、EphAl、FGFR3、Flt3、Fms, IGF-1R、IKKb, IR、Itk、JAK2、KDR、Met、mTOR、PDGFRa, PlkU Ret, Syk、Tie2、TrtB 等。据估计有518种不同类型的人类蛋白激酶基因，构成全部人类基因的大约I. 7%[Manning等，Science，2002，298，1912]。人类蛋白激酶主要分为(90种或更多种)酪氨酸特异的蛋白激酶和丝氨酸/苏氨酸特异的蛋白激酶。酪氨酸特异的蛋白激酶可以分为58种受体酪氨酸激酶和32种细胞质/非受体酪氨酸激酶，前者被分成20个亚族，后者被分成10亚族。受体酪氨酸激酶具有能够结合到生长因子的细胞外结构域和能够使酪氨酸残基磷酸化的细胞质活性位。当生长因子在受体酪氨酸激酶的细胞外生长因子受体位结合时，受体酪氨酸激酶形成二聚物，并且细胞质中的酪氨酸残基自动磷酸化。然后，下游的蛋白顺序地磷酸化，并且随着信号转导在细胞核中进行，最终，引起癌的转录因子被过表达。粘着斑激酶(FAK)是在细胞质中存在的125kD酪氨酸特异的蛋白激酶。FAK通过调节整合素和生长因子的信号转导系统而在细胞的迁移、增殖和存活方面起着关键作用。在 包括鳞状细胞癌、侵入性直肠癌/乳腺癌、转移性前列腺癌、黑素瘤和神经胶质瘤的各种癌细胞中，发现FAK蛋白和FAK mRNA被过表达/激活。通过三个动物模型(HeyA8、SK0V3ipl和 HeyA8-MDR)，证实 Novartis 的 FAK 抑制剂 TAE226[Cancer Invest. 2008，26 (2)，145]对乳腺癌有效[Cancer Res. 2007，67 (22)，10976)]。并且，Pfizer 的 FAK 抑制剂 PF-573，228[Proc. Am. Assoc. Cancer Res. ,2006,47, Abst. 5072]在临床试验下是成功的。通过动物模型，它显示出对前列腺癌(PC-3M)、乳腺癌(BT474)、胰腺癌(BxPc3)、肺癌(H460)和脑癌(U87MG)有效。另外，在动物模型中，FAK抑制剂(TAE226)和多西他赛(docetaxel)的同时给药显示出优异的功效(肿瘤减小了 85-97%，P值< 0.01) [Cancer Res. 2007，67 (22)，10976]。FAK参与整合素的信号传导。当整合素受体响应于来自外部的各种刺激而聚集时，整合素的细胞质结构域(细胞质尾区)结合到细胞骨架和信号传导蛋白。FAK的FERM (4. Iprotein/ezrin/radixin/moesin)结构域和 FAT (focal adhesion targeting,粘着斑定位)结构域独立地与整合素的细胞质结构域结合，并使FAK定位在粘着斑位处。靠近粘着斑位聚集的FAK经由Y397残基的分子内或分子间磷酸化而被激活。然后，Src激酶的SH2结构域结合到FAK的磷酸化的Y397残基，从而形成FAK/Src复合体。结合到FAK的Src激酶进一步使FAK的其它酪氨酸残基(Y407、Y576/577、Y861和Y925)磷酸化。另外，FAK/Src复合体结合到各种信号传导蛋白(P130Cas、Grb2、PI3K和Grb7)，并介导磷酸化。在正常细胞中，通过FAK的信号转导在严格的调节下被介导。然而，在肿瘤化的细胞中，FAK被过表达和激活，由此展现出恶性肿瘤的各种特征。FAK利于肿瘤细胞的增殖，增加了肿瘤细胞的侵入和迁移。此外，还已知的是，FAK抑制癌细胞凋亡并加快血管生成。FAK是被包括表皮生长因子受体(EGFR)和血小板衍生生长因子受体(I3DGFR)的许多生长因子受体以及整合素作为靶的蛋白。受体的过表达或被激活的受体的表达将正常细胞转变为肿瘤细胞。因此，FAK是在受体的与肿瘤相关的信号转导中涉及的重要激酶。已经报道了 FAK的N端FERM结构域结合到EGFR，在由表皮生长因子(EGF)介导的细胞迁移中 涉及FAK的C端结构域。即，FAK通过N端FERM结构域识别来自EGFR受体的信号，并通过C端FAT结构域识别来自整合素的信号，由此整合来自细胞外部的信号。可通过以各种方式抑制FAK来引起细胞凋亡。由FAK介导的细胞存活主要通过磷酸肌醇3-激酶(PI 3-激酶)来进行。FAK的磷酸化的Y397位结合到PI 3-激酶，并合成作为使蛋白激酶B (PKB，还称作AKT)移动到细胞膜的第二信使的PI (3，4，5)P3和PI (3，4)P2，从而它可以被3'-磷酸肌醇依赖性激酶(PDK)磷酸化。如此激活的PKB使凋亡蛋白(例如，p21WAF、FKHR、Bad和GSK-3)灭活，由此抑制细胞凋亡。用于存活的另一信号是pl30Cas的SH3结构域结合到FAK的富脯氨酸模体，因此，FAK/Src引起pl30Cas的酪氨酸残基的磷酸化，并且Ras被激活。如下解释FAK在细胞周期中的作用。如果Y925位被磷酸化，则FAK结合到生长因子受体结合蛋白2(Grb2)，由此激活Ras/Erk通路。FAK的过表达有助于Gl到S相转变，FAK相关非激酶(FRNK)(即，FAK的抑制剂)的表达抑制细胞周期蛋白Dl的表达，并引起⑶K抑制剂p21的表达，由此延迟细胞周期的进程。然而，细胞周期蛋白Dl的过表达将细胞从FRNK引起的细胞周期阻滞中解救出来。FAK的唯一亚型(即，富脯氨酸的酪氨酸激酶2 (PYK2))最高程度地分布在神经细胞中。近来，报道了其在用于小细胞肺癌[Oncogene. 2008，27 (12)，1737]、前列腺癌[Oncogene. 2007，26 (54)，7552]、肝细胞癌[Br. J. Cancer. 2007，97 (I)，50]和神经胶质瘤[Neoplasia. 2005，7 (5)，435]的抗癌药物的开发中作为有用的分子靶。FAK 包括四个结构域I) 4. lprotein/ezrin/radixin/moesin (FERM)结构域是与整合素受体、血小板衍生生长因子受体(TOGFR)、表皮生长因子受体(EGFR)等相互作用的氨基端结构域，并通过与激酶结构域的直接相互作用来抑制激酶活性；2)激酶结构域；3)三个富脯氨酸(PR)域；以及4)位于羧基端的粘着斑定位(FAT)结构域与桩蛋白(paxil I in)、踝蛋白(talin)、pl90RhoGEF、RhoA特异的⑶P/GTP交换因子等相互作用。FAK的选择性剪接产物(即，FAK相关非激酶结构域(FRNK))包括PRl结构域、PR2结构域和FAT结构域，并用作FAK的对抗性调节因子。对于将被激活的FAK，需要位于FERM和激酶结构域的结合处的Y397的自动磷酸化。Src激酶结合到磷酸化的Y397，并继续使Y576和577磷酸化。当最终Y925被磷酸化时，FAK的信号转导通过Grb2被导通。当前正在开发的FAK抑制剂显示出，通过将激酶结构域的ATP结合位作为靶来抑制Y397的自动磷酸化。在使用动物模型的功效试验中，Y397自动磷酸化的抑制程度是重要的量度(生物标志)。在低分子量FAK抑制剂的开发中已经做出了如下进展。在对FAK抑制剂已经提出的26种先导化合物中，只有Pfizer的PF-562271目前正处于I期临床试验。PF-562271是ATP竞争性的FAK抑制剂 (IC5tl= I. 5nM)和同源Pyk2抑制剂(13nM)。它在成纤维细胞、上皮细胞和癌细胞中抑制FAK Y397位处的自动磷酸化。此外，它抑制大多数癌细胞的迁移，但不影响正常细胞的生长。还未观察到特殊毒性，并且在人体内移植瘤试验(25-100mg/kgp.ο.)中，对于前列腺癌PC-3、乳腺癌BT-474、结肠LoVo、肺癌NCI-H460、恶性胶质瘤U-87MG和胰腺癌BxPC-3细胞，观察到肿瘤生长或肿瘤恶化被抑制了 42-90%。血管内皮生长因子受体(VEGFRs)是受体酪氨酸激酶(RTKs)，并且是血管生成的重要调节因子。它们参与血管和淋巴管的形成，并参与体内稳态，并且对神经细胞有重要影响。血管内皮生长因子(VEGF)主要通过血管内皮细胞、造血细胞和基质细胞在缺氧条件下或者通过来自诸如TGF、白介素和I3DGF的生长因子的刺激而生成。VEGF结合到VEGFR_1、_2和-3。每种VEGF异构体结合到特异的受体，由此引起受体纯合子或杂合子的形成，并激活每个信号转导系统。VEGFR的信号特异性进一步由诸如neuropilin、硫酸乙酰肝素、钙粘素和整合素等的共同受体来微调。VEGF 的生物学功能通过 III 型 RTK、VEGFR-I (Flt-I)、VEGFR-2 (KDR/Flk-Ι)和VEGFR-3 (Flt-4)介导。VEGFR与Fms、Kit和TOGFR密切相关。每种VEGF结合到特异的受体。VEGF-A 结合到 VEGFR-I、-2 和受体合子，而 VEGF-C 结合到 VEGF_2、_3。PIGF 和 VEGF-B专门与VEGFR-I相互作用，VEGF-E仅与VEGFR-2相互作用。VEGF-F与VEGFR-I或-2相互作用。然而，对于血管的形成，优先地需要VEGF-A、-B和PIGF，VEGF-C和-D在淋巴管的形成中是必需的。因为血管生成向肿瘤供给营养物质和氧并为向癌细胞的转变提供途径，所以血管生成在肿瘤的增殖和转变中是必需的。通常，血管生成通过血管生成刺激物和血管生成抑制物达到平衡。如果该平衡被破坏，像在癌细胞的那样，则最影响血管内皮细胞的生长因子(即，VEGF)激活其受体VEGFR。目前，正在对使用低分子量合成物质抑制VEGF的受体酪氨酸激酶的抑制剂进行各种研究，低分子量合成物质的优点在于它们也可适用于实体瘤，并具有较少的副作用，因为它们仅抑制癌细胞中的血管生成。Tie2是一种受体酪氨酸激酶，并与血管生成和脉管系统高度相关。在所有脊椎动物中，Tie2的域结构得到很高程度的保存[Lyons等，1998]。Tie2的配体是血管生成素(Ang)。Ang2不引起Tie2的自动磷酸化,但通过Angl干扰Tie2的激活。在内皮细胞中，Tie2通过Ang2的激活引起PI3K_Akt的激活[Jones等，1999]。在丝裂素激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导通路(其是Tie2的主要信号转导系统)中，接头蛋白GRB2和蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2在Tie2受体酪氨酸激酶通过自动磷酸化的二聚化中起到关键作用。Ang/Tie2和VEGF信号转导通路在癌细胞的血管生成中是重要的。Tie2在血管内皮细胞中被表达。特别地，此表达在被癌细胞侵入的位上显著地增加。在乳腺癌中观察到Tie2的过表达[Peters等，1998]，并且还在子宫癌、肝癌和脑癌中观察到Tie2的过表达。已经合成出具有噻吩并[3，2_d]嘧啶结构的若干化合物。然而，本发明的在噻吩并[3，2-d]嘧啶的2位和7位具有特定取代基的取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物是没有在任何文献中公开的新型化合物。此外，没有在任何文献中预测到在2位和7位具有特定取代基的取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物的对各种蛋白激酶的抑制活性或者该可能性。
发明内容
技术问题本发明的目的是提供一种在噻吩并[3，2_d]嘧啶的2位和7位具有特定取代基的新型2，7-取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物及其药学上可接受的盐。本发明的另一目的是提供一种包括该新型2，7_取代的噻吩并[3，2_d]嘧啶化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分的用于预防并治疗由异常细胞生长引起的疾病的药物组合物。
问题的解决方案本发明提供一种由化学式I表示的2，7_取代的噻吩并[3，2_d]嘧啶化合物、其药学上可接受的盐、其水合物或其溶剂合物[化学式I]
HN N \其中A表不包括从氮原子、氧原子和硫原子中选择的1-4个杂原子的5-14兀杂芳基；Ra表不氢、齒素、氧代(=O) X1-C6烧基、C1-C6烧氧基X1-C6烧基擬基、C1-C6烧氧羰基、氨基C1-C6烷氧基、单(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷氧基、二(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷氧基、取代的或未取代的杂环、或者取代的或未取代的苯基；L不存在或者表示-NH-或-N (C1-C6烷基)_ ;B表示苯基或者包括从氮原子、氧原子和硫原子中选择的1-4个杂原子的5-14元单杂芳基或稠合杂芳基；Rb表示氢、硝基、氨基、羟基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、-(CH2)n-R1, -C(O)OR2、-C (O) NR3R4' -NR2C (O) R3、-NR2C (O) NR3R4' -SO2NR3R4 或-NR2SO2R3 ；η表示O至3的整数；R1表示氢、C1-C6烷基、卤代烷基、羟基、甲磺酰基、苯基或者取代的或未取代的杂环；R2表示氢或C1-C6烷基；R3和R4相同或不同，并表示氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基或者取代的或未取代的苯基；取代的苯基取代有从卤素、C1-C6卤代烷基、羧基和C1-C6烷氧羰基中选择的取代基；以及
取代的杂环表示取代有从C1-C6烷基和C1-C6羟烷基中选择的取代基的吗啉代、哌啶基或哌嗪基。发明的有益效果由化学式I表示的2，7-取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物、其药学上可接受的盐、其水合物或其溶剂合物具有抑制从ALK、Aurora A、EphAl、FAK、Flt3、Fms、Itk、KDR、Kit、Met、Ret、Src> Syk、Tie2和TrkB中选择的蛋白激酶的活性的优异能力，并且对于预防并治疗由异常细胞生长引起的疾病是有效的。具体地说，根据本发明的化合物可以预防或治疗的由异常细胞生长引起的疾病可以包括从胃癌、肺癌、肝癌、结直肠癌、小肠癌、胰腺癌、脑癌、骨癌、黑素瘤、乳腺癌、硬化性腺病、子宫癌、子宫颈癌、头颈癌、食道癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾癌、肉瘤、前列腺癌、尿道癌、膀胱癌、白血病、多发性骨髓瘤、诸如骨髓增生异常综合症的恶性血液病、诸如霍奇金病和非霍奇金淋巴瘤的淋巴瘤、纤维腺瘤等中选择的各种肿瘤。 用于实施本发明的最佳方式在下文中，将详细描述本发明的实施例。可以通过在本领域中通常采用的方法来制备由化学式I表示的2，7_取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物的药学上可接受的盐。药学上可接受的盐应当对人体具有较小毒性，并且不应当对母体化合物的生物活性以及物理和化学性质具有负面影响。药学上可接受的盐包括游离酸、由化学式I表示的碱化合物的酸加成盐、碱金属盐(例如，钠盐)、碱土金属盐(例如，钙盐)、有机盐、由化学式I表示的羧酸的有机碱加成盐、以及氨基酸加成盐。可用于制备药学上可接受的盐的游离酸包括无机酸或有机酸。无机酸可以是盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、高氯酸、溴酸等。有机酸可以是乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、富马酸、马来酸、丙二酸、苯二甲酸、琥珀酸、乳酸、柠檬酸、葡糖酸、酒石酸、水杨酸、苹果酸、草酸、苯甲酸、亚甲基双羟萘酸(embonic acid)、天冬氨酸、谷氨酸等。可用于制备有机碱加成盐的有机碱包括三(羟基甲基)甲胺、二环己基胺等。可用于制备氨基酸加成盐的氨基酸包括天然存在的氨基酸，例如丙氨酸、氨基乙酸等。除了药学上可接受的盐之外，由化学式I表示的2，7-取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物包括所有水合物和溶剂合物。可以如下制备水合物或溶剂合物将由化学式I表示的2，7_取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物溶于诸如甲醇、乙醇、丙酮或1，4-二氧杂环已烷的水混溶性溶剂中；向其中加入游离酸或游离碱；然后执行结晶或重结晶。因此，除了可通过例如冻干法制备的包含各种量的水的化合物之外，本发明的化合物还包括含有水合物的化学计量的溶剂合物。下面给出与用于限定根据本发明的化合物的取代基有关的详细描述。在本发明中，“卤素原子”是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。在本发明中，“烷基”是指C1-C6脂肪族饱和烃基，其包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、环丙基甲基、正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基、环戊基、环丁基甲基、正己基、异己基、环己基、环戊基甲基等。在本发明中，“卤代烷基”是指一个或多个氢被卤素原子取代的烷基，例如三氟甲基。在本发明中，“烷氧基”是指氢被C1-C6烷基取代基取代的羟基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基。在本发明中，“杂芳基”是指含有从氧原子、氮原子和硫原子中选择的一个或多个杂原子的单环、双环或三环芳香杂烃基，例如吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、三唑基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、二苯并呋喃基、异苯并呋喃基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、二苯并噻吩基、萘啶基、苯并异噻唑基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、酞嗪基、酞嗪基、喹唑啉基等。在本发明中，“杂环”是指含有一个或多个杂原子的杂烃环，例如吗啉基、哌啶基、哌嗪基、N-保护哌嗪基等。优选地，在由化学式I表示的2，7_取代的噻吩并[3，2_d]嘧啶化合物中，A表示从噻吩基、噻唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、萘啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基和二氢喹唑啉基中选择的杂芳基；Ra表示氢、卤素、氧代(=O)、C1-C6烷 基、C1-C6烷基羰基、C1-C6烷氧羰基、氨基C1-C6烷氧基、单(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷氧基、二(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷氧基、吗啉代、哌嗪基、4-(C1-C6烷基)哌嗪基、4-(C1-C6羟烷基)哌嗪基、或者取代的或未取代的苯基；L不存在或表示-NH-或-N(C1-C6烷基)-;B表示苯基或喹啉基；Rb表示氢、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、-(CH2)n-R1, -C (O) NR3R4、-NR2C(O)R3、-NR2C (O) NR3R4、-SO2NR3R4 或-NR2SO2R3 ；n 表示 O 至 3 的整数 J1 表示氢、I，I- 二氧代异噻二唑烷基、吗啉代、哌啶基、哌嗪基或4-(C1-C6烷基)哌嗪基；R2表示氢或C1-C6烷基；R3和R4相同或不同，并表示氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6卤代烷基或者取代的或未取代的苯基；取代的苯基取代有从卤素、C1-C6卤代烷基、羧基和C1-C6烷氧羰基中选择的取代基。特别优选地，在由化学式I表示的2，7-取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物中，A表示吡啶基；Ra表示甲基、乙基、吗啉代、二甲基氨基乙氧基、4-乙基哌嗪基或4-(2-羟乙基)哌嗪基；L不存在；B表示苯基或喹啉基；Rb表示氢、-NHSO2CH3或-C(O)NH-环丙基。由化学式I表示的2, 7-取代的噻吩并[3, 2-d]喃唳化合物的具体示例包括N-(3-(2-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2- (1H-四唑_5_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-氟苯并[d]噻唑_2_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(4，5-二甲基噻唑-2-基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(5-苯基-I，3，4-噻二唑-2-基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2- (4-苯基噻唑_2_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2-(吡嗪-2-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(3H-苯并[d]咪唑_5_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(5，7-二甲基-I，8-萘啶-2-基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-甲基苯并[d]噻唑_2_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2- (6-甲基吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2- (6-吗啉代吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺； N-(3-(2-(6-(2_( 二甲基氨基)乙氧基)吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；3-(5-(7-(3-(甲基亚磺酰氨基)苯基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_2_基氨基)吡啶-2-基)苯甲酸乙酯；4-(5-(7-(3-(甲基亚磺酰氨基)苯基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_2_基氨基)吡啶-2-基)苯甲酸乙酯；5-(7-(3-(甲基亚磺酰氨基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_2_基氨基)烟酸乙酯；N- (3- (2- (6-吗啉代嘧啶-4-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)嘧啶_4_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2- (6- (4_羟乙基哌嗪_1_基)吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(3-甲基_4_氧代_3，4_ 二氢喹唑啉_7_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2- (5-乙酰基噻吩_2_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；7-(4-((4-乙基哌嗪-I-基)甲基)苯基)-N-(6-吗啉代吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N-(6-吗啉代吡啶-3-基)-7-(4-(哌啶-I-基甲基)苯基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-2-胺；7- (4-(吗啉代甲基)苯基)-N- (6-吗啉代吡啶_3_基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N-环丙基-3-(2-(6-(4-乙基哌嗪_1_基)吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯甲酰胺；N-环丙基-3-(2-(6-甲基吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯甲酰胺；N-环丙基-3- (2- (6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯甲酰胺；N-环丙基-3-(2-(6-(4-(2-羟乙基)哌嗪_1_基)_2_甲基嘧啶_4_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯甲酰胺；3-(2-(6-(4-(2-羟乙基)哌嗪_1_基)_2_甲基嘧啶_4_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-7-基)-N-甲基苯磺酰胺；N- (6- (4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基)_7_(喹啉_3_基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-2-胺；N- (6-甲基吡啶-3-基)-7-(喹啉_3_基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_2_胺；N- (6-吗啉代吡啶-3-基)-7-(喹啉_3_基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_2_胺；N- (3- (2- (6-吗啉代吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)环丙酰胺；N- (3- (2- (6-吗啉代吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)乙酰胺；N- (3- (2- (1H-四唑_5_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2- (6-吗啉代吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)异丙酰胺；4-氯-N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-7-基)苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺；N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)乙磺酰胺；N- (3- (2- (6-吗啉代吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)环丙磺酰胺；1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3_ (3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)脲；I-环己基-3-(3-(2-(6-吗啉代吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)脲；I-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)-3-(2，
2,2- 二氟乙基)脲；N-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N- (6-吗啉代吡啶-3-基)-7- (2_ (三氟甲基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_2_胺；N-(3-(2-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)-N-甲基甲磺酰胺；N-甲基-N-(3-(2-(6-甲基吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-甲基-N- (3- (2- (6-吗啉代吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N2-(6-吗啉代吡啶-3-基)-N7-(3，4，5-三甲氧基苯基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_2，7~ 二胺；N7-甲基-N2-(6-吗啉代吡啶-3-基)-N7-(3，4，5-三甲氧基苯基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-2，7- 二胺；
7-(3-(1，1_ 二氧代-2-异噻二唑烷基)苯基)-N-(6_(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；以及
N-(3-(2-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶_3_基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺盐酸盐。本发明还提供了用于制备由化学式I表示的2，7-取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物的方法。典型的示例是方案I。根据方案1，通过两个偶联反应来制备由化学式I表示的2，7_取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物[方案I]
Pd2(PPIW)CI2, rx> +
ZOWNa2CO3, Cl N
BrRb二氧杂环己烷，卯。C)
(2)(3)W N-7
Rb
八 Pd(OAc)2,
ΓΧΧ> . T2 xantphos，
1^(J)二氧“烷，卜
\jj n100-120 °c
_bR3Ri3
WR(5)(1)其中，A、B、RlP Rb与上面定义的相同。在第一偶联反应中，使由化学式2表示的7-溴-2-氯噻吩并[3，2_d]嘧啶与由化学式3表示的硼酸化合物经历Suzuki偶联反应或Buchwald胺化反应，以制备由化学式4表示的在C-7位上引入了基团B的化合物。在第二偶联反应中，使由化学式4表示的化合物与由化学式5表示的胺化合物经历Buchwald胺化反应，以制备由化学式I表示的2，7-取代的噻吩并[3，2_d]嘧啶化合物。在方案I的Suzuki偶联反应和Buchwald胺化反应中，可以使用Pd2 (dba) 3、Pd(OAc)2' PdCl2(PPh3)2^ Pd(PPh3)4 等作为金属催化剂。并且，可以使用 Xantphos (CAS号161265-03-8)、Davephos (CAS 号:213697-53-1), Johnphos (CAS 号224311-51-7)、X-phos (CAS 号564483-18-7)、叔丁基 Xphos (CAS 号564483_19_8)等作为配体。并且，可以使用碱金属或碱土金属的碳酸盐、硫酸盐、磷酸盐、醇盐等作为碱。具体示例包括K2C03、CsC03、Na2C03、K3PO4, NaOt-Bu, KOt-Bu 等。在偶联反应中，可以使用常用有机溶剂作为反应溶剂，包括四氢呋喃、二氧杂环己烷、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲亚砜、2-丁醇、2-戊醇等。反应温度保持在50°C至200°C，优选地保持在80°C至150°C。可以根据方案2来制备用作方案I中的起始材料的由化学式2表示的7-溴-2-氯噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-胺化合物[方案2]
权利要求
1.一种由化学式I表示的2，7_取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物、其药学上可接受的盐、其水合物或其溶剂合物 化学式I
2.根据权利要求I所述的化合物，其中，A表示从噻吩基、噻唑基、噻二唑基、四唑基、批啶基、嘧啶基、吡嗪基、萘啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、喹唑啉基和二氢喹唑啉基中选择的杂芳基；Ra表示氢、卤素、=OX1-C6烷基、C1-C6烷基羰基、C1-C6烷氧羰基、氨基C1-C6烷氧基、单(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷氧基、二(C1-C6烷基)氨基C1-C6烷氧基、吗啉代、哌嗪基、^(C1-C6烷基)哌嗪基、4-(C1-C6羟烷基)哌嗪基、或者取代的或未取代的苯基；L不存在或表示-NH-或-N(C1-C6烷基)-；B表示苯基或喹啉基；Rb表示氢、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、-(CH2) n-RJ、-C (O) NR3R4, -NR2C (O) R3、-NR2C (O) NR3R4, -SO2NR3R4 或-NR2SO2R3 ；n 表示 O 至 3的整数A1表示氢、I，I-二氧代异噻二唑烷基、吗啉代、哌啶基、哌嗪基或4-(C1-C6烷基)哌嗪基；R2表示氢或C1-C6烷基；R3和R4相同或不同，并表示氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基X1-C6卤代烷基、或者取代的或未取代的苯基；以及取代的苯基取代有从卤素、C1-C6卤代烷基、羧基和C1-C6烷氧羰基中选择的取代基。
3.根据权利要求I所述的化合物，其中，A表示吡啶基；Ra表示甲基、乙基、吗啉代、二甲基氨基乙氧基、4-乙基哌嗪基或4-(2-羟乙基)哌嗪基；L不存在；B表示苯基或喹啉基；以及Rb表示氢、-NHSO2CH3或-C (O) NH-环丙基。
4.根据权利要求I所述的化合物，所述化合物选自于由以下物质组成的组N-(3-(2-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；Ν-(3-(2-(1Η-四唑-5-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-氟苯并[d]噻唑-2-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(4，5-二甲基噻唑-2-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(5-苯基-1，3，4-噻二唑-2-基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(4-苯基噻唑-2-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(吡嗪-2-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(3H-苯并[d]咪唑-5-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(5，7-二甲基-I，8-萘啶-2-基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-甲基吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-(2-( 二甲基氨基)乙氧基)吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)甲磺酰胺；3-(5-(7-(3-(甲基亚磺酰氨基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基氨基)吡啶-2-基)苯甲酸乙酯；4-(5-(7-(3-(甲基亚磺酰氨基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基氨基)吡啶-2-基)苯甲酸乙酯；5-(7-(3-(甲基亚磺酰氨基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-基氨基)烟酸乙酯；N-(3-(2-(6-吗啉代嘧啶-4-基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N- (3- (2- (6- (4-乙基哌嗪-I-基)嘧啶-4-基氨基)噻吩并 [3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-(4-羟乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(3-甲基_4_氧代-3，4-二氢喹唑啉-7-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(5-乙酰基噻吩-2-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；7-(4-((4-乙基哌嗪-I-基)甲基)苯基)_N(6-吗啉代吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N-(6-吗啉代吡啶-3-基)-7-(4-(哌啶-I-基甲基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；7-(4-(吗啉代甲基)苯基)-N(6-吗啉代吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_2_胺；N-环丙基-3-(2-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯甲酰胺；N-环丙基-3-(2-(6-甲基吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯甲酰胺；N-环丙基-3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯甲酰胺；N-环丙基-3-(2-(6-(4-(2-羟乙基)哌嗪-I-基)-2-甲基嘧啶_4_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯甲酰胺；3-(2-(6-(4-(2-羟乙基)哌嗪_1_基)_2_甲基嘧啶_4_基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)-N-甲基苯磺酰胺；N-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基)-7-(喹啉-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N- (6-甲基吡啶_3_基)_7_ (喹 啉-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N- (6-吗啉代吡啶-3-基)-7-(喹啉-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2_d]嘧啶-7-基)苯基)环丙酰胺；N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)乙酰胺；N- (3- (2- (1H-四唑-5-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶_7_基)苯基)异丙酰胺；4_氯-N- (3- (2- (6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺；N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)乙磺酰胺；N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)环丙磺酰胺；I-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)脲；I-环己基-3-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)脲；1-(3-(2-(6_吗啉代吡啶_3_基氛基)喔吩并[3, 2-d]卩密唳-rJ-基)苯基)-3- (2, 2, 2_ 二氣乙基)服；N_ (6- (4-乙基喊嗪-I-基)吡啶-3-基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N-(6-吗啉代吡啶-3-基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；N-(3-(2-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)-N-甲基甲磺酰胺；N-甲基-N-(3-(2-(6-甲基吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N-甲基-N-(3-(2-(6-吗啉代吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺；N2-(6-吗啉代吡啶-3-基)-N7-(3，4，5-三甲氧基苯基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2，7- 二胺；N7-甲基-N2- (6-吗啉代吡啶-3-基)-N7- (3,4, 5-三甲氧基苯基)噻吩并[3, 2-d]嘧啶-2，7-二胺；7-(3-(1，1-二氧代-2-异噻二唑烷基)苯基)-N-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-2-胺；以及N-(3-(2-(6-(4-乙基哌嗪-I-基)吡啶-3-基氨基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)苯基)甲磺酰胺盐酸盐。
5.一种药物组合物，所述药物组合物包括根据权利要求I至4中的任一项所述的化合物作为有效成分。
6.根据权利要求5所述的药物组合物,所述药物组合物用于通过抑制从ALK、AuroraA、EphAl、FAK、Flt3、Fms, Itk、KDR、Kit、Met、Ret、Src, Syk、Tie2 和 TrkB 中选择的蛋白激酶来预防或治疗癌。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中，所述癌选自于由胃癌、肺癌、肝癌、结直肠癌、小肠癌、胰腺癌、脑癌、骨癌、黑素瘤、乳腺癌、硬化性腺病、子宫癌、子宫颈癌、头颈癌、食道癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾癌、肉瘤、前列腺癌、尿道癌、膀胱癌、白血病、多发性骨髓瘤、诸如骨髓增生异常综合症的恶性血液病、包括霍奇金病和非霍奇金淋巴瘤的淋巴瘤、以及纤维腺瘤组成的组。
8.一种用于预防并治疗癌的药剂，所述药剂包括根据权利要求I至4中的任一项所述的化合物作为有效成分。
9.一种用于制备由化学式I表示的2，7_取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物的方法，所述方法包括下述步骤 使由化学式2表示的7-溴-2-氯噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物与由化学式3表示的硼酸化合物经历Suzuki偶联反应或Buchwald胺化反应，以制备由化学式4表示的在C-7位上引入了基团B的化合物
10.根据权利要求9所述的制备方法，其中，在从Pd2 (dba) 3、Pd (OAc)2, PdCl2 (PPh3) 2和Pd (PPh3) 4中选择的金属催化剂的存在下执行Suzuki偶联反应或Buchwald胺化反应。
全文摘要
本发明公开了一种具有蛋白激酶抑制活性的2，7-取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物、一种药学上可接受的盐和一种包括该化合物作为有效成分的用于预防并治疗由异常细胞生长引起的疾病的药物组合物。因为该新型2，7-取代的噻吩并[3，2-d]嘧啶化合物对生长因子信号转导中涉及的各种蛋白激酶展现出优异的抑制活性，所以它作为用于预防或治疗由异常细胞生长引起的疾病的药剂是有用的。
文档编号A61P35/00GK102712656SQ201080059034
公开日2012年10月3日 申请日期2010年10月15日 优先权日2009年10月22日
发明者咸泳搢, 崔焕根, 李贞宪, 沈台辅, 河廷美, 田恩镇, 金焕 申请人:韩国科学技术研究院