一种新的间苯三酚类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从苦荞麦的干燥成熟种子中分离得到的一种 具有治疗慢性粒细胞白血病作用的间苯三酚类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 寥科(Polygonacea)荞麦属Fagopyrum Mill.植物在全世界有15种，广泛分布于亚 洲和欧洲，我国有10个种1个变种，有2个种为栽培种。常见的有荞麦Fagopyrum esculentum Moench、苦养麦F· Tataricum(L· )Gaertn ·和金养麦F·Dibotrys(D·Don)Hara，前两种主要作 为粮食作物，金荞麦的根茎供药用，具有清热解毒、排脓祛瘀的功效。苦荞麦又名野荞麦、鞑 靼荞、万年荞、野南荞，在我国西南、中南、华北等省区均有分布。苦荞麦有悠久的入药历史。 《齐民要术》："头风畏冷者，以面汤和粉为饼，更令罨出汗，虽数十年亦愈"。《图经本草》："实 肠胃，益气力"。《本草纲目》："降气宽肠磨积滞，消热肿风痛。除白浊血滞，脾积泄泻"。并记 载苦荞麦味苦，性平、寒，有益气力、续精神、利耳目、降气宽肠，健胃的作用。《植物名实图 考》："性能消积，俗呼净肠草"。《全国中草药汇编》："理气止痛，健脾利湿"。苦荞麦还是当今 世界上集营养、保健、医疗于一体的天然保健食品之一，被称为"食药两用"的粮食珍品。
[0003] 苦荞麦除了含有其他谷类所不具有的黄酮类成分外，还含有留体类、酚类、活性蛋 白、矿质元素等物质。近年来从苦荞麦粉、种子、麸皮和芽中分离出的成分主要为黄酮类和 甾体类物质。
[0004] 现代药理研究表明，苦荞麦具有降血糖、抗氧化、镇痛抗炎、改善微循环等多种药 理作用。对由腹腔注射四氧嘧啶高血糖模型的大鼠，通过灌胃苦荞麦粉或者苦荞麦胶囊可 明显降低血糖浓度;苦荞麦中的黄酮类物质能降低血脂;苦荞麦中的芦丁、槲皮素等黄酮类 物质可清除超氧阴离子、羟自由基等自由基;苦荞麦中的黄酮化合物主要为芦丁，具有软化 血管、改善微循环、维持毛细血管的抵抗力、降低其通透性及脆性、促进细胞增殖、防止血细 胞的凝集等作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从苦荞麦的干燥成熟种子中分离得到的一种具有治疗 慢性粒细胞白血病作用的间苯三酚类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I)，
[0009]所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将苦荞麦的干燥成熟种子 粉碎，用80~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和 水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤 (a)中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用75%乙醇洗脱 10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙 醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、55 :1、30:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲 醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20: 1、15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅 烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体 积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0010]进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0011] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为85%。
[0012] -种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的载 体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备治疗慢性粒细胞白血病的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗慢性粒细胞白血病的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物(I)结构式；
[0019 ]图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0020]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023]制备方法：（a)将苦荞麦的干燥成熟种子(8kg)粉碎，用85 %乙醇热回流提取(25L X3次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和 水饱和的正丁醇(3L X 3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(355g)和正丁醇 萃取物；（b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体 积，再用75%乙醇洗脱10个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏 (136g);(c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8个柱体 积）、55:1 (8个柱体积）、30:1 (6个柱体积）、15 :1 (8个柱体积)和1:1 (5个柱体积）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(31g)用正相硅胶进一步分离，依次用 体积比为20:1(8个柱体积）、15:1(10个柱体积)和10:1(6个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2(llg)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积 百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到 纯的化合物（I)(228mg)。
[0024] 结构确证：黄色胶状物；册43頂3显示[1+似]+为111/2 505.2918，结合核磁特征可 得分子式为C3QH42〇5，不饱和度为10。核磁共振氢谱数据δ Η(ρρπι，DMS〇-d6，400MHz): H-7 (2.47，m)，H-7(2.05，dd，J=13.7,7.4)，H-8(1.84，m)，H-10(1.79，m)，H-10(1.41，m)，H-ll (2.06，m)，H-ll(1.73，m)，H-12(2.38，m)，H-14(2.84，d，J=14.3)，H-14(1.92，d，J=14.3)， H-15(1.35，s)，H-16(1.27，s)，H-17(2.89，m)，H-17(2.90，m)，H-18(5.13，t，J=7.5)，H-20 (1.55，s)，H-21(1.68，s)，H-22(2.62，dd，J=13.1，8.1)，H-22(2.41，dd，J=13.1，8.2)，H-23(4.78，t，J = 8.1)，H-25(1.46，s)，H-26(1.37，s)，H-28(3.72，m)，H-29(0.94，d，J = 6.8)， H-30(1.16，d，J = 6.8);核磁共振碳谱数据 δ。(ppm，DMS〇-d6，100MHz): 197 · 1 (C，1 -C)，111 · 3 (C，2-C)，197.2(C，3-C)，59.6(C，4-C)，208.5(C，5-C)，60.4(C，6-C)，26.9(CH2,7-C)，42.8 (CH，8-C)，78.3(C，9-C)，40.4(CH2，10-C)，22.6(CH2，11-C)，44.8(CH，12-C)，70.6(C，13-C)， 38.7(CH2，14-C)，27.8(CH 3，15-C)，23.6(CH3，16-C)，33.5(CH2，17-C)，118.3(CH，18-C)， 135.6(C，19-C)，25.7(CH 3,20-C)，17.8(CH3,2hC)，41.6(CH2,22-C)，116.2(CH，23-C)， 138.3(C，24-C)，25.5(CH 3,25-C)，17.5(CH3,26-C)，209.1(C，27-C)，35.8(CH，28-C)，18.1 (〇1 3,29-〇，19.7(〇13,3〇-〇;碳原子标记参见图1。1!1匪1?谱显示八个甲基信号0!1〇.94， 1 · 16，1 · 27，1 · 35，1 · 37，1 · 46，1 · 55，1 · 68)，以及两个烯属次甲基质子（δΗ4 · 78和5 · 13) </3C NMR谱显示30个碳信号，包括八个甲基，六个亚甲基，五个次甲基(两个烯属次甲基），以及十 一个季碳(三个酮羰基，三个烯属季碳，两个含氧季碳，以及一个烯属含氧季碳hHMBC谱中 H2-7和H2-14与C-3，C-4和C-5，Me-15与C-12，C-13和C-14，Me-16与C-8，C-9和C-10，以及H2- 17和H2-22与C-l，C-5和C-6的相关性表明该化合物为间苯三酚类化合物。HMBC谱中，H2-17和 H2-22与C-l，C-5和C-6，Me-20和Me-21 与C-19和C-18，以及Me-25和Me-26与C-24和C-23的相 关性表明〇6位连有两个2-甲基-2-丁烯基团。根据两个含氧碳信号[3070.6((：-13)和78.3 (C-9)]，以及核磁数据和不饱和度，可知C-9和C-13之间存在一个氧桥。HMBC谱中，Me-29和 Me-30与C-27和C-28的相关性表明该化合物含有一个异丙基。NOESY谱中，Η-14β与H-12和H-7β的相关性表明Β环为椅式构象。NOESY谱中Η-8与Me-16和H-12，Me-15与Η-12和Η-14β的相 关性表明H-8，Me-15和Me-16为β构型。此外，Η-18与Η-7β，以及Η-23与Η-14β