脂肪间充质干细胞的培养方法与流程

文档序号:12097123阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种脂肪间充质干细胞的培养方法,其特征在于,包括如下培养步骤:

将获取的原代脂肪间充质干细胞接种至干细胞培养基中进行培养处理,其中,所述干细胞培养基中含有干细胞因子和白介素3因子,且所述干细胞因子与白介素3因子的含量比为(5-20μmol/L):(5-20ug/ml)。

2.根据权利要求1所述的培养方法,其特征在于:所述培养处理是在被包被处理的培养器中进行,所述包被处理的包被液含有纤连蛋白。

3.根据权利要求2所述的培养方法,其特征在于:所述纤连蛋白在所述包被液中的浓度为5-20μg/ml。

4.根据权利要求1-3任一所述的培养方法,其特征在于:所述白介素3因子是以经优化后的人全长IL-3基因为靶基因进行诱导后的重组人IL-3,所述优化后的人全长IL-3基因序列如下:

5'-ATG AGC CGC CTG CCC GTC CTG CTC CTG CTC CAA CTC CTG GTC CGC CCC GGA CTC CAA GCT CCC ATG ACC CAG ACA ACG CCC TTG AAG ACA AGC TGG GTT AAC TGC TCT AAC ATG ATC GAT GAA ATT ATA ACA CAC TTA AAG CAG CCA CCT TTG CCT TTG CTG GAC TTC AAC AAC CTC AAT GGG GAA GAC CAA GAC ATT CTG ATG GAA AAT AAC CTT CGA AGG CCA AAC CTG GAG GCA TTC AAC AGG GCT GTC AAG AGT TTA CAG AAC GCA TCA GCA ATT GAG AGC ATT CTT AAA AAT CTC CTG CCA TGT CTG CCC CTG GCC ACG GCC GCA CCC ACG CGA CAT CCA ATC CAT ATC AAG GAC GGT GAC TGG AAT GAA TTC CGG AGG AAA CTG ACG TTC TAT CTG AAA ACC CTT GAG AAT GCG CAG GCT CAA CAG ACG ACT TTG AGC CTC GCG ATC TTT TGA-3'。

5.根据权利要求1-3任一所述的培养方法,其特征在于:所述干细胞因子在所述干细胞培养基中的浓度为5-20μmol/ml。

6.根据权利要求1-3任一所述的培养方法,其特征在于:所述培养处理过程中,24小时后更换新的所述干细胞培养基,之后每隔两天更换一次所述干细胞培养基。

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