4] 三嗪-4-基）吡啶-3-磺酰胺（0.050 g，0.11 mmol)和 3-氟苯胺（0.151 g，1.36 mmol) 的混合物12 h。减压除去挥发性组分，用制备型HPLC (条件B-6,如通用方法所述）纯化 所得残余物得到N-(叔丁基）-5-(1-((3-氟苯基）氨基）-8-苯基啦略并[1，2_d] [1，2, 4] 三嗪-4-基）吡啶-3-磺酰胺（0.022 g，38%)，为浅黄色固体。LCMS方法B-7:保留时间 2. 14 min, [M+1] = 517. 0，纯度 94. 7%。LCMS 方法 B-8 :保留时间 1. 74 min, [M+1]= 517.0，纯度 95.4%。1H NMR (400 MHz, DMS0-d6) δ ppm :1.19 (s，9 Η), 6.82 (td，/ =2.0 Hz, /= 8. 4 Hz, I H), 6.95 (dd, / = I. 6 Hz, / = 8. 0 Hz, I H), 7.12 (d, J = 2.8 Hz, I H), 7.27-7.31 (m, I H), 7.50-7.64 (m, 6 H), 7.70 (dt, / = 2.4 Hz, J= 12.0 Hz, I H), 7.75 (d, / = 2.8 Hz, I H), 7.96 (s, I H), 8.71 (t, / = 2.0 Hz, I H), 9.20 (d，/= 2.0 Hz, I H), 9.31 (d，/= 2.0 Hz, I H)。
[0133] 将N-(叔丁基）-5-(I-((3-氣苯基）氨基）-8-苯基吡略并[1，2_d] [1，2, 4]二 嘆-4_基）吡啶_3_横醜胺（0· 020 g, 0· 039 mmol)溶于TFA (0. 500 mL, 6. 48 mmol)，并 在65°C加热4 h。减压除去TFA，用饱和的NaHCO3 (10 mL)稀释所得残余物。用EtOAc (3 X 20 mL)萃取反应混合物，用无水~干燥合并的有机萃取物、过滤并减压浓缩得到 残余物。用制备型HPLC (条件B-9,如通用方法所述）纯化该残余物得到5-(1-((3-氟苯 基）氨基）-8_苯基吡咯并[1，2-d] [1，2, 4]三嗪-4-基）吡啶-3-磺酰胺（0. 010 g，56%)， 为浅黄色固体。LCMS方法B-7 :保留时间L 79 min, [M+1] = 461. 0，纯度99. 6%。LCMS 方法 B-8 :保留时间 1. 30 min, [M+1] = 461. 0，纯度 100%。1H NMR (400 MHz, DMS〇-d6) δ ppm ：6. 82 (td, / = 2. 0 Hz, / = 8. 4 Hz, I H), 6.95 (dd, / = I. 6 Hz, / = 8. 4 Hz, I H), 7.12 (d, /= 2.8 Hz, I H), 7.27-7.33 (m, I H), 7.50-7.65 (m, 6 H), 7.71 (dt, /= 2. 4 Hz, J= 12.0 Hz, I H), 7.77 (br s, 2 H), 7.81 (d, / = 2. 8 Hz, I H), 8.70 (t, /= 2.0 Hz, I H), 9.20 (d, / = 2.0 Hz, I H), 9.31 (d, / = 2.0 Hz, I H)〇
[0134] 实施例3 2_(二氟甲基）-5-(8-苯基-1-(吡啶-2-基甲基氨基）吡咯并[1，2-d] [1，2, 4]三 嗪-4-基）吡啶-3-磺酰胺
在〇°C下，向3, 5-二溴吡啶-2-甲醛（3. 00 g，11. 3 mmol)的DCM (60 mL)溶液中添 加 DAST (2. 99 mL，22. 6 mmol)。搅拌反应混合物I h。通过加入NaHCO3 (100 mL)使反应 混合物缓慢终止反应，并用EtOAc (200 mL)萃取。有机层用盐水（50 mL)洗涤，用似2304干 燥、过滤并减压浓缩。残余物经CombiFlash Isco (REDISEP?, SiO2, 40 g, 0-15% EtOAC/ 石油醚）纯化得到3, 5-二溴-2-(二氟甲基）吡啶（3. 00 g, 92. 0%)，为淡黄色液体。LCMS 方法 B-IO :保留时间 2. 11 min, [M+2] = 288.2。1H NMR (400 MHz, DMS0-d6) δ ppm: 7.15 (t, J= 52.8 Hz, I Η), 8.68 (dd, J= 0.8 Hz, 2.0 Hz, I H), 8.85 (d, J = 2. 0 Hz, I H) 〇
[0135] 在(TC下，向 3, 5-二溴-2-(二氟甲基）吡啶（3.00 g, 10.5 mmol)的 DMF (100 mL)溶液中添加 K2CO3 (1.45 g，10.5 mmol)。用0.5 h通过漏斗加入苯基甲硫醇（1.30 g, 10. 5 mmol)的DMF (50 mL)溶液并在环境温度下搅拌反应混合物14 h。将反应混合 物溶于EtOAc (300 mL)并用冰冷的水（2 X 150 mL)洗涤。分离有机相，用Na2SO4干燥、过 滤并减压浓缩。残余物用 CombiFlash Isco (REDISEP?, SiO2, 12 g, 0-13% EtOAc/石油 醚）纯化得到两种位置异构体的混合物。用制备型HPLC (条件B-16,如通用方法所述）分 离这两种位置异构体得到5-(苄基硫基）-3-溴-2-(二氟甲基）吡啶（0.700 g，20.3%)， 为无色液体和3-(苄基硫基）-5-溴-2-(二氟甲基）吡啶（0. 900 g，26. 1%)，为浅黄色液 体。
[0136] 5_(苄基硫基）-3_溴-2-(二氟甲基）吡啶：LCMS方法B-IO :保留时间2. 34 min, [M+2] = 330.0。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm :4.19 (s，2 H)，6.83 (t，/ = 54.0 Hz, I H), 7.28-7.34 (m, 5 H), 7.76 (dd, /= I. 2 Hz, / = 2. 0 Hz, I H), 8.45 (d, / = 2. 0 Hz, I H)； 3-(苄基硫基）-5-溴-2-(二氟甲基）吡啶：LCMS方法B-IO :保留时间2. 33 min, [M+2] = 330.0。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm :4. 10 (s，2 Η)，6.87 (t，/= 54.0 Hz, I Η), 7.21-7.23 (m, 2 Η), 7.28-7.33 (m, 3 Η), 7.74 (dd, /= 1.2 Hz, / = 2.0 Hz, I Η)，8· 56 (d，/ = 2· 0 Hz, I Η) 〇
[0137] 将 3-(苄基硫基）-5-溴-2-(二氟甲基）吡啶（0· 900 g，2· 73 mmol)溶于 CCl4(75 mL)和水（15 mL)中，并将所得的两相溶液冷却至0-5°C。然后用氯气缓慢吹扫通过反 应混合物5 min并在室温下搅拌30 min。用水（10 mL)和CCl4 (100 mL)稀释反应混合物。 分离出有机层，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将所得残余物溶于干燥的THF (5 mL)中并 在0-5°C下缓慢添加到2-甲基丙-2-胺（5. 00 mL, 2. 73 mmol)中。在密封管中于60°C下 加热反应混合物6 h，然后冷却至环境温度并用EtOAc (300 mL)稀释。将溶液转移至分液 漏斗中并用水（50 mL)洗涤，然后用盐水（25 mL)洗涤。有机层经Na2SO4干燥、过滤并减压 浓缩。所得残余物用 CombiFlash Isco (REDISEP?, SiO2, 40 g, 0-15% EtOAc/石油醚） 纯化得到5-溴-N-(叔丁基）-2-(二氟甲基）吡啶-3-磺酰胺（0. 80 g, 85%)，为棕色液 体。LCMS 方法 B-Il :保留时间 2. 19 min, [M+2] = 345.0。1H NMR (400 MHz, DMS0-d6) δ ppm ：1. 15 (s, 9 Η), 7.59 (t, J= 52.8 Hz, I Η), 8.25 (br s, I Η), 8.54 (dd, / = 0· 8 Ηζ，/ = 2· 0 Hz, 1 Η)，9· 12 (d，/ = 2· 0 Hz, 1 Η) 〇
[0138] 在环境温度下，向5-溴-N-(叔丁基）-2-(二氟甲基）吡啶-3-磺酰胺（0· 750 g，2. 19 mmol)和 4, 4, 4'，4'，5, 5, 5'，5' -八甲基-2, 2' -双（1，3, 2-二氧杂硼杂环戊烷） (0.832 g, 3.28 mmol)的 1,4-二噁烷（2 mL)溶液中添加 KOAc (0.643 g, 6.56 mmol)。 用氮气吹扫反应混合物10 min。加入PdCl2(Clppf)-CH2Cl2 (〇· 178 g，0.219 mmol)并继续 用氮气再吹扫10 min。在微波辐射下、在100°C下搅拌所得混合物I h。将反应混合物冷却 至室温，经硅藻土过滤并用EtOAc (2 X 50 mL)洗涤滤饼。在减压下浓缩滤液得到N-(叔丁 基）-2-(二氟甲基）-5- (4, 4, 5, 5-四甲基-1，3, 2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基）吡啶-3-磺 酰胺（0.810 g)。残余物未经进一步纯化直接用于下一步。LCMS方法B-Il :保留时间1.68 min, [M+1] = 309.0。
[0139] 向N_(叔丁基）-2-(二氟甲基）-5-(4, 4, 5, 5-四甲基-1，3, 2-二氧杂硼杂环戊 烷-2-基）吡啶-3-磺酰胺（0.118 g，0.303 mmol)和1，4_二氯-8-苯基吡咯并[l，2-d] [1，2, 4]三嗪（0.080 g，0.30 mmol)的 1,4-二噁烷（4 mL)和水（0.8 mL)溶液中添加 K3PO4 (0.129 g，0.606 mmol)，并用氮气吹扫反应混合物10 min。加入三环己基鱗四氟 硼酸盐（0.011 g, 0.030 mmol)，然后加入 Pd2 (dba)3 (0.014 g, 0.015 mmol)并继续用氮 气再吹扫5 min。在100°C下加热反应混合物4 h，然后冷却至环境温度。将反应混合物经 娃藻土过滤并用EtOAc (2 X 50 mL)洗涤滤饼。用水（50 mL)洗涤滤液，分离出有机层并 再用EtOAc (50 mL)萃取水相。用无水似2504干燥合并的有机萃取物、过滤并减压浓缩。 所得残余物用 CombiFlash Isco (REDISEP?, SiO2, 40 g, 0-50% EtOAc/石油醚）纯化得 到N-(叔丁基）-5-(1-氯-8-苯基吡咯并[1，2-d] [1，2, 4]三嗪-4-基）-2-(二氟甲基） 吡啶-3-磺酰胺（0.052 g，35%)，为浅黄色固体。LCMS方法B-12:保留时间2. 24 min, [M+1] = 492.001H NMR (400 MHz, DMS〇-d6) δ ppm :1.19 (s, 9 Η), 7.25 (d, J= 2.8 Hz, I Η), 7.41-7.54 (m, 5 Η), 7.73 (t, J= 52.4 Hz, I Η), 7.99 (d, / = 2.8 Hz, I Η)，8· 37 (s，I Η)，8· 90 (br s，I Η)，9· 45 (d，/ = 2· 0 Hz, 1 Η)。
[0140] 在密封管中于100°C下加热Ν-(叔丁基）-5-(1-氯-8-苯基吡咯并[l，2-d] [1，2, 4]三嗪-4-基）-2-(二氟甲基）吡啶-3-磺酰胺（0.050 g，0.10 mmol)的吡啶-2-基 甲胺（0.110 g, 1.02 mmol)的溶液6 h。减压除去挥发性组分，所得残余物用CombiFlash Isco (REDISEP?，SiO2, 24 g，0-60% EtOAc/石油醚）纯化得到 N-(叔丁基）-2-(二氟甲 基）-5-(8-苯基-1-((吡啶-2-基甲基）氨基）吡咯并[l，2-d] [1，2, 4]三嗪-4-基）吡 啶-3-磺酰胺（0.035 g，61%)，为棕色固体。LCMS方法B-4:保留时间1.12 min, [M+1] =564. S01H NMR (400 MHz, DMS〇-d6) δ ppm :1.18 (s, 9 Η), 4.63 (d, J= 6.0 Hz, 2 Η), 6.61 (dd, /= 4.4 Hz, /= 6.0 Hz, I Η), 6.98 (d, / = 2. 8 Hz, I Η), 7.33-7.70 (m，8 Η)，7· 72 (d，/ = 2· 8 Hz, I Η)，7· 98-8. 05 (m，I Η)，8· 32 (d，/ = 4· 8 Hz, I Η), 8.35 (s，I Η), 8.80 (br s，I Η), 9.41 (d，/= 2.0 Hz, 1 Η)。
[0141] 将N-(叔丁基）-2-(二氟甲基）-5-(8-苯基-1_((吡啶-2-基甲基）氨基）吡咯 并[1，2-d] [1，2, 4]三嗪-4-基）吡啶-3-磺酰胺（0· 035 g，0· 062 mmol)溶于 TFA (2. 00 mL，26.0 mmol)中并在室温下搅拌4 h。减压除去TFA，用饱和的NaHCO3 (10 mL)稀释反 应混合物。用EtOAc (3 X 20 mL)萃取反应混合物。合并的有机萃取物经无水似2304干 燥、过滤并减压浓缩。用制备型HPLC (条件B-13,如通用方法所述）纯化所得残余物得 到 2-(二氟甲基）-5-(8-苯基-1-((吡啶-2-基甲基）氨基）吡咯并[1，2-d] [1，2, 4]三 嗪-4-基）吡啶-3-磺酰胺（0. 004 g，10%)，为浅黄色固体。LCMS方法B-7 :保留时间 1. 55 min, [M+1] = 508. 0，纯度 99. 3%。LCMS 方法 B-8 :保留时间 1. 14 min, [M+1]= 508.0，纯度 99.3%。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm :4. 77 (s，2 Η), 6.96 (d，/ = 2.8 Hz, I Η), 7.26-7.29 (m, I Η), 7.40 (d, / = 7.6 Hz, I Η), 7.51-7.66 (m, 6 Η), 7. 70 (d, / = 2. 8 Hz, 1 Η), 7. 75-7. 79 (m, 1 Η), 8. 34 (br d, / = 5. 2 Hz, 1 Η), 8.89 (dd，/= 0.8 Ηζ，1.2 Hz, 1 Η), 9.35 (d，/= 2.0 Hz, 1 Η)。
[0142] 实用性 一般而言，本发明化合物，例如前述实施例中所公开的具体化合物，已显示抑制电 压-门控K+通道的K V1亚族（例如，通过在例如下述的测试中，在0. 3微摩尔浓度下显示 彡14%、优选彡30%、更优选彡40%、甚至更优选彡50%的％抑制率）。通过显示作为电压-门 控K+通道的K V1亚族抑制剂的活性，预期本发明化合物可用于治疗与电压-门控K+通道的 KvI亚族相关的人类疾病。
[0143] 用以测定化合物作为1_抑制剂的活性程度的测试方法为本领域所熟知且描述于 例如 ^ Gen. Physiol, 101 (4) :513-543 (1993 年 4 月）和份J. Pharmacol, 115(2):267-274 (1995年5月）等参考文献中。
[0144] 用以测定化合物作为KvI亚族的其它成员的抑制剂的活性程度的测试方法也为 本领域所熟知。例如，KvL 1、KvL 2和KvL 3的抑制可使用由Grissmer，S.等人， Pharmacol, 45 (6) : 1227-1234 (1994年6月）所述的步骤测定；Κν1· 4的抑制可使用由 Petersen, Κ. R.等人，ArcA , 437 (3) : 381_392 (I"9 年 2 月）所述的步骤 测定；Κν1· 6 的抑制可使用由 Bowlby, Μ. R.等人，^ Neurophysiol 73 (6) : 2221-2229 (1995年6月）所述的步骤测定；以及KvL 7的抑制可使用由Kalman，Κ.等人，J； BioL Chem., 273(10) :5851-5857 (1998 年 3 月 6 日）所述的步骤测定。
[0145] 测定了实施例1-9 (如表2中所示)对注射人类Kv I. 5 mRNA且稳定地表达蛋 白的膜片钳制（patch clamped)的哺乳动物L-929细胞中Ililff电流的阻断（如下文所述的 参考文献中所述）。各实施例在0.3 mM浓度下的抑制数据示于表2中。
[0146] I. Synders, D. J.等："A rapidly activating and slowly inactivating potassium channel cloned from human heart: functional analysis after stable mammalian cell culture expression'，，J. Gen. Physiol. , 101:513-543(1993)。
[0147] 2. Zhou, Z.等，"Block of HERG potassium channels by the antihistamine astemizole and its metabolites desmethylastemizoIe and norastemizole'，· Jounal of Cardiovasc. Electrophysiol.， 10 (6), 836-843 (1999) 〇
[0148] 表 2
[0149] 在本发明范围内的化合物抑制电压-门控K+通道的K V1亚族，且因此相信可用于 治疗和/或预防各种疾病：心律不齐，包括室上性心律不齐、房性心律不齐、心房扑动、心房 纤维性颤动、心肌缺血并发症，和用作心率控制剂，包括维持正常窦性节律；心绞痛，包括变 异性心绞痛症状（Prinzmetal's symptom)、血管痉挛症状和变型症状的缓解；胃肠疾病，包 括反流性食道炎、功能性消化不良、胃肠动力障碍（包括便秘和腹泻）和肠易激综合征；血 管和内脏平滑肌的疾病，包括哮喘、慢性阻塞性肺病、成人呼吸窘迫综合征、周边血管疾病 (包括间歇性跛行）、静脉机能不全、性无能、大脑和冠状动脉痉挛和雷诺氏病（Raynaud's disease);炎性和免疫性疾病，包括炎性肠病、类风湿性关节炎、移植物排斥、哮喘、慢性阻 塞性肺病、囊性纤维化和动脉粥样硬化；细胞增殖性疾病，包括再狭窄和癌症（包括白血 病）；听觉系统疾病；视觉系统疾病，包括黄斑变性和白内障；糖尿病，包括糖尿病性视网膜 病、糖尿病性肾病和糖尿病性神经病；肌肉疾病，包括肌强直和消耗病；周边神经病变；认 知障碍；偏头痛；记忆丧失，包括阿兹海默氏病（Alzheimer's)和痴呆；CNS介导的运动性 功能障碍，包括帕金森氏病（Parkinson's disease)和共济失调；癫痫；和其它离子通道介 导的疾病。
[0150] 作为电压-门控IT通道的KvI亚族的抑制剂，相信本发明化合物可用于治疗多种 其它疾病，包括因器官或组织移植所致的抵抗、由骨髓移植引起的移植物抗宿主疾病、类风 湿性关节炎、全身性红斑狼疮、桥本氏甲状腺炎（Hashimoto' s thyroiditis)、多发性硬化、 重症肌无力、I型糖尿病性葡萄膜炎、幼发型或近发型糖尿病、后葡萄膜炎、变应性脑脊髓 炎、肾小球肾炎、传染性疾病、炎性和增生性皮肤病、牛皮癣、特应性皮炎、接触性皮炎、湿疹 性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔藓、天泡疮、大疱性类天疱疮、大包性表皮松解、荨麻疹、血管性 水肿、血管炎、红斑、皮肤性嗜酸性粒细胞增多症、红斑性狼疮、痤疮、斑秃、角膜结膜炎、春 季结膜炎、与白塞氏病（Behcet's disease)相关的葡萄膜炎、角膜炎、疱疹性角膜炎、圆锥 形角膜、角膜上皮营养不良、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦氏溃疡（Mooren's ulcer入巩膜炎、 格拉夫斯眼病（Graves' ophthalmopathy)、小柳-原田氏综合征（Vogt-Koyanagi-Harada syndrome)、类肉瘤病、花粉过敏、可逆性阻塞性气道疾病、支气管哮喘、过敏性哮喘、内因性 哮喘、外因性哮喘、尘埃性哮喘、慢性或长期哮喘、晚期哮喘和气道高反应性、支气管炎、胃 溃疡、由缺血性疾病和血栓形成引起的血管损伤、缺血性肠病、炎性肠病、坏死性小肠结肠 炎、与热灼伤和白三烯M-介导疾病相关的肠性病灶、乳糜泄、直肠炎、嗜酸细胞性胃肠炎、 肥大细胞增多、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、偏头痛、鼻炎、湿疹、间质性肾炎、肺出血综合 征（Good-pasture's syndrome)、溶血性尿毒综合征、糖尿病性肾病变、多发性肌炎、格巴二 氏综合征（Guillain-Barre syndrome)、美尼尔氏病（Meniere's disease)、多神经炎、多 发性神经炎、单神经炎、神经根病变、甲状腺机能充进、巴西多氏病（Basedow's disease)、 纯红血球发育不全、再生障碍性贫血、再生不良性贫血、特发性血小板减少性紫癫、自体 免疫性溶血性贫血、粒性白血球缺乏症、恶性贫血、巨幼细胞性贫血、红细胞发生不能、骨 质疏松症、类肉瘤病、肺纤维变性、特发性间质性肺炎、皮肌炎、寻常性白斑病、寻常性鱼鳞 癣、光过敏性敏感（photoallergic sensitivity)、皮肤T细胞淋巴瘤、动脉硬化、动脉粥 样硬化、主动脉炎综合征、结节性多动脉炎、心肌病、硬皮症、韦格纳氏肉芽肿（Wegener's granuloma)、干燥综合征（Sj5gren' s syndrome)、肥胖症、嗜酸性筋膜炎、牙銀病变、牙周 膜、齿槽骨、牙骨质损伤（substantia osses dentis)、肾小球肾炎、通过预防脱发或得到毛 发萌发和/或促进毛发生成和毛发生长的男性型