胞、SP2/0细胞、L5. 1细胞、杂交瘤细胞或人类细胞。
[0045] 待用根据本发明培养基培养的细胞可以是正常细胞、患病细胞、经转化的细胞、突 变细胞、体细胞、生殖细胞、干细胞、前体细胞或胚胎细胞，所述任一细胞可以是建立的或者 经转化的细胞系或者获自天然来源的细胞。
[0046] 不含蛋白胨或胰蛋白胨的细胞培养基是不含任何蛋白胨或胰蛋白胨或者通过蛋 白的部分水解产生的其他肽的细胞培养基。
[0047] 在优选的实施方案中，不含蛋白胨或胰蛋白胨的细胞培养基也不包含任何蛋白质 或其他天然来源的聚合物如琼脂。在非常优选的实施方案中，不含蛋白胨或胰蛋白胨的细 胞培养基是在化学上确定成分的细胞培养基。
[0048] 在化学上确定成分的细胞培养基是不含任何在化学上未确定成分的物质的细胞 培养基。这指的是在化学上确定成分的培养基中所使用的化学组成和全部化学品的结构都 是已知的。在化学上确定成分的培养基不含任何酵母、动物或植物组织；它们不含饲养细 胞、血清、提取物或消化物或者可能有助于将在化学上未确定成分的蛋白质引入至培养基 中的其他组分。在化学上未确定或未完全确定的化学结构是化学组成和结构未知的那些化 学结构，或者只能用大量的实验尝试确定的化学结构，与蛋白质如白蛋白或酪蛋白的化学 组成和结构的评定相当。
[0049] 在一个实施方案中，根据本发明不含蛋白胨或胰蛋白胨的细胞培养基仅含有一种 或多种糖类组分、一种或多种氨基酸、一种或多种维生素、一种或多种盐、一种或多种缓冲 剂组分、一种或多种辅因子以及一种或多种核酸组分。
[0050] 颗粒大小指的是颗粒的平均直径。颗粒直径通过在硅油中的激光散射测定。
[0051] 糖类组分是全部单糖或二糖，如葡萄糖、半乳糖、核糖或果糖（单糖的实例）或者 蔗糖、乳糖或麦芽糖（二糖的实例）。
[0052] 根据本发明氨基酸的实例是蛋白（proteinogenic)氨基酸，特别是必需氨基酸， 亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸和缬氨酸，以及非蛋白氨基 酸如D-氨基酸。
[0053] 维生素的实例是维生素A(视黄醇、视黄醛、多种类视黄醇和四种类胡萝卜素）、 维生素匕（硫胺素）、维生素B2 (核黄素）、维生素B3 (烟酸、烟酰胺）、维生素B5 (泛酸）、维 生素B6(吡哆醇、吡哆胺、吡哆醛）、维生素B7(生物素）、维生素B9(叶酸、亚叶酸）、维生素 B12 (氰钴氨素、羟钴胺素、甲基钴胺素）、维生素C(抗坏血酸）、维生素D(麦角钙化醇、胆钙 化醇）、维生素E(生育酚、生育三烯酚）和维生素K(叶绿醌、甲基萘醌类）。还包括维生素 前体。
[0054] 盐的实例是包含无机离子的组分例如碳酸氢盐、钙盐、氯化物、镁盐、磷酸盐、钾盐 和钠盐或者包含微量元素如Co、Cu、F、Fe、Mn、Mo、Ni、Se、Si、Ni、Bi、V和Ζη的组分。
[0055] 缓冲剂的实例是C02/HC03、HEPES、PIPES、ACES、BES、TES、MOPS和TRIS。
[0056] 辅因子的实例是硫胺素衍生物、生物素、维生素C、NAD/NADP、钴胺素、黄素单核苷 酸及衍生物、谷胱甘肽、血红素核苷酸磷酸及衍生物。
[0057] 根据本发明的核酸组分是核碱基，如胞嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤、胸腺嘧啶或尿嘧啶， 核苷如胞苷、尿苷、腺苷、鸟苷和胸苷，以及核苷酸如腺苷一磷酸或腺苷二磷酸或腺苷三磷 酸。
[0058] 稳定的细胞培养基是指这样的培养基，与用相同配方的新鲜制备的培养基相比 较，在贮藏一段时间后的所述培养基仍显示出至少80 %，优选地至少90 %，更优选地至少 97 %，最优选地相同的生物学和生物化学活性。
[0059] 本发明基于如下发现：也可以以干的颗粒状形式提供不含蛋白胨或胰蛋白胨或者 相似组分的培养基。这是非常出乎意料的，因为到目前为止，只有具有蛋白胨或胰蛋白胨的 细胞培养基可以是干的颗粒状。认为蛋白胨或胰蛋白胨的粘着性质对于干的颗粒状培养基 的广生是必需的。
[0060] 已经发现，特定的压实方法使得也能产生不含蛋白胨或胰蛋白胨的干颗粒状培养 基。
[0061] 根据本发明的压实方法以两个基本步骤实施：
[0062] a)以培养基组分的混合粉末形式提供细胞培养基；
[0063] b)在辊式压制机中压实所述混合的粉末。
[0064] 在步骤a)中，提供了培养基组分的细磨干粉。彻底混合全部组分，以使粉末混合 物的所有部分都具有几乎相同的组成。就组成的均一性而言，该混合物应当具有与商品化 的干粉细胞培养基相同的品质。就均一的细胞生长而言，组合物的均一性越高，得到的干 颗粒状培养基的品质越好。适合于产生细磨粉末的研磨机例如是球磨机、卧式研磨机、喷 射式磨机或旋转式叶片筛磨机（rotatingbladesievemill)。粉末的颗粒大小通常低于 500μm，优选地低于200μm。
[0065] 为了提供培养基组分的混合粉末，可以例如首先将组分混合，然后细磨成混合物， 或者可以将它们单独地或者以亚组研磨，然后组合和混合。
[0066] 优选地，混合物的全部组分都是干的。这意味着，如果它们包含水，那么它们仅 包含结晶的水，并且按未结合的或者未配位的（uncoordinated)水分子的重量计，不超过 5 %，优选地不超过2 %，最优选地不超过1 %。
[0067] 如果一种或多种混合物组分对氧化是敏感的，那么可以在惰性保护气体下进行混 合和研磨
[0068] 在第二步（步骤b))中，粉末混合物是在辊式压制机中压实的。
[0069] 辊式压制机，也称为辊式压实机，是本领域技术人员已知的。通常，辊式压制机包 含两个反向旋转的辊，其位于相互约〇. 5-3mm，优选地l-2mm的小距离。合适的辊式压制机 通常具有10至50cm之间宽度的辊，导致辊之间的空隙具有10至50cm的长度。然而，取决 于辊式压制机的大小，辊的大小和由此导致的辊之间的空隙的长度可以变化。在优选的实 施方案中，该空隙具有10至15cm之间的长度。
[0070] 将混合的粉末物质在反向旋转的辊之间抽出，并在辊之间的空隙中压实。辊与其 表面结构之间的距离对得到的颗粒状微粒的最终大小和结构具有影响。
[0071] 辊的表面优选地是槽沟状的。槽沟帮助使粉末与辊粘着，并通过挤压将其拉伸。
[0072] 辊式压制机的挤压能力通常在20至150kN/cm辊宽之间，优选地用30至80kN之 间，最优选地在40至60kN之间的力一起挤压辊。
[0073] 如果细胞培养基的组分是非常敏感的，那么可以在惰性保护气体环境下进行压实 步骤。此外，因为一些组分通常是热敏感的，并且将经受不住由于压实可能产生的轻微增高 的温度，所以通常冷却辊式压制机的辊，以维持恒定的温度。
[0074] 在优选的实施方案中，直接测量从辊式压制机中释放的经压实的细胞培养基的大 小。这可以例如通过，如用一个或多个振动筛来筛滤进行。筛子中孔的直径取决于待收集 的颗粒的大小。对于根据本发明的方法，一般的直径在〇.5-5mm之间，优选地约1-3_。特 别地，如果辊式压制机中的干颗粒形成了更大的压实物或者薄片，优选地将筛磨机（sieve mill)用于使压实物或薄片成为合适大小的颗粒。一种合适的筛磨机是具有l-3mm筛眼孔 径的振动筛磨机，型号FC200、BepexGmbH。
[0075] 适合于根据本发明方法的辑式压制机可以例如购自Alexanderwerk，Sahut Coreur，Hosokawa或Fitzpatrick公司。
[0076] 如已说明，干的颗粒状细胞培养基的颗粒大小取决于处理从辊式压制机中出来的 经压实培养基的方式。如果从辊式压制机中直接收集培养基，那么其通常包含较大的压实 物或薄片。如果筛滤培养基，那么可以通过筛孔大小测定颗粒大小。但是，进一步的处理如 包装通常也会影响平均颗粒大小，因为颗粒状细胞培养基的一些颗粒可能破裂成碎片。
[0077] 在优选的实施方案中，在压实和筛滤后，颗粒状细胞培养基的80%以上的颗粒具 有大于0. 5mm的大小。
[0078] 在非常优选的实施方案中，颗粒状细胞培养基的90%以上的颗粒具有大于0. 5mm的大小。
[0079] 已经发现，如果将从辊式压制机中释放的具有小于0. 5,优选地小于0. 2mm的颗粒 大小的经压实的培养基的级分连续地再引入到辊式压制机的进料物中，以再次与粉末混合 物再混合并再挤压，那么可以进一步改善根据本发明颗粒状细胞培养基的质量。这减少了 最终的干的颗粒状细胞培养基的粉末部分，并额外地改善了产品的均一性。
[0080] 图1给出了一种可能的生产组装的示意图。辊式压制机显示为辊R1和辊R2。将 粉末混合物P1从储罐进料到辊式压制机中。用筛子S筛分从辊式压制机中释放的经压实 的混合物。移除产物级分，用于进一步的处理和包装，将具有低于〇. 2_颗粒大小的粉末级 分P2连续地再引入到辊式压制机的进料中。
[0081] 已经发现，可以在不添加增加混合物的粘性的物质的情况下进行根据本发明的干 颗粒形成。
[0082] 然后可以进一步加工得到的干的颗粒状细胞培养基。可以包装和/或灭菌培养 基。合适的容器是本领域技术人员已知的。实例是袋子、盒子、瓶子、硬纸盒、真空包装形式 等。可以在灭菌之前或之后进行包装。