一种利用枯草芽孢杆菌生产饲用抗菌肽的工艺及其应用的制作方法

文档序号:12248574阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一株枯草芽孢杆菌BW115,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌BW115保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC M 2016402。

2.一种利用如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌BW115生产饲用抗菌肽的工艺,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1 获得生产菌株

将家蚕抗菌肽CAD基因克隆到质粒中形成重组质粒,然后将得到的重组质粒转化枯草芽孢杆菌,再筛选出稳定表达抗菌肽CAD的生产菌株即权利要求1所述的枯草芽孢杆菌BW115,将其保存备用;

步骤2 液体种子发酵培养

将步骤1中得到的生产菌株活化后接种基础发酵培养基,进行液体种子发酵培养获得种子发酵液;

步骤3 发酵罐中发酵培养

将步骤2中得到的种子发酵液接种于发酵罐中,经流加补充碳源和氮源中的任意一种或者其组合,进行发酵培养获得发酵液;

步骤4 获得抗菌肽产品

将步骤3中所获得的发酵液,添加辅料,经60-600℃,进行喷雾干燥处理后,得到抗菌肽产品。

3.根据权利要求2所述的生产饲用抗菌肽的工艺,其特征在于,所述步骤1中质粒是pPIC9K质粒。

4.根据权利要求2所述的生产饲用抗菌肽的工艺,其特征在于,所述步骤3中补充的碳源选自乳糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、玉米粉、玉米淀粉、玉米浆干粉、玉米浆中的一种或几种。

5.根据权利要求2所述的生产饲用抗菌肽的工艺,其特征在于,所述步骤3中补充的氮源选自牛骨蛋白胨、鱼蛋白胨、大豆蛋白胨、胰蛋白胨、酪蛋白胨、䏡蛋白胨、水解乳蛋白、酵母膏、酵母浸粉、酵母粉、牛肉膏、牛肉浸粉、大豆粕粉、大豆饼粉中的一种或几种。

6.根据权利要求2所述的生产饲用抗菌肽的工艺,其特征在于,所述步骤3中发酵培养条件为:发酵温度是20-40℃;搅拌转速是100-500r/min;通气比是1:(0.5-2.0);罐压是0.01-0.10Mpa。

7.根据权利要求2所述的生产饲用抗菌肽的工艺,其特征在于,所述步骤3中所获得的发酵液,其生物效价达到10,000uU/ml以上。

8.根据权利要求2所述的生产饲用抗菌肽的工艺,其特征在于,所述步骤4中所获得的抗菌肽产品含水量小于5%,并且其生物效价达到80,000uU/g以上。

9.根据权利要求2-8中任意一项所述的工艺生产得到的抗菌肽。

10.根据权利要求2-8中任意一项所述的工艺所制备的抗菌肽在饲料领域中的应用。

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