一种新型内切木聚糖酶及其编码基因和应用的制作方法

专利名称：一种新型内切木聚糖酶及其编码基因和应用的制作方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，涉及一种新型内切木聚糖酶及其编码基因和应用。
背景技术：
木聚糖简介。木聚糖，是植物细胞壁中半纤维素的主要成份，由木糖分子 (DXylose)以β _1，4-连结成主链；阿拉伯呋喃糖苷基、葡糖醛酸基或乙酰基等连结成支链。在自然界中是除纤维素之外含量最为丰富的可再生植物多糖。木聚糖的来源。富含木聚糖的原料来源广泛，包括硬木、软木、秸秆、稻草、麸皮等农、林、工业废弃物及城市固体垃圾等。且不同植物所含木聚糖的多少也有所差别，一般硬材中所含木聚糖比软材中多，硬材中能占到干重的15 30%，软材中一般占干重的7 12%。而在一些一年生植物如小麦、甘煎、棉子壳中，木聚糖含量则高达30%以上。木聚糖酶简介。木聚糖酶是一系列糖基水解酶(E.C.3.2. 1.x)的总称。由于组成木聚糖单糖单元的差异、键的类型不同、以及木聚糖中存在许多不同取代基的支链，木聚糖的彻底降解需要多种酶参与，包括内切-1，4-β-木聚糖酶(endo-β-Ι， 4-xylanase, EC 3.2.1.8)，β-木糖苷酶(β -xylosidase, EC 3.2.1.37)，α -L- M 拉伯呋喃糖苷酶(α -L-arabinofuranosidase, Ε. C. 3. 2· 1· 39)、β _D_ 葡萄糖酸酸苷酶(β-D-glucuronidase，EC 3. 2. 1. 39)、乙酰木聚糖酯酶(acetyl xylan esterases, Ε. C. 3. 1. 1. 72)以及降解阿拉伯糖侧链残基与酚酸(如阿魏酸或香豆酸)形成的酯键酚酸酯酶(ferulic or p-coumaric acid esterase, Ε. C. 3. 2. 1. 73)等。其中，内切 4-β_木聚糖酶是降解木聚糖最主要的酶。该酶以内切方式作用于木聚糖主链内部的 β-1，4-木糖苷键，将大分子多聚木糖水解为低聚木糖和少量木糖，从而起始多聚糖的逐步 P華角军(Bernier R, Driguez H, Desrochers M Gene 26 :59-65,1983)木聚糖酶在传统产业中的应用。木聚糖酶被广泛应用于包括食品、饲料、造纸、纺织等各种工业部门中，并在其中扮演重要的角色。第一，在食品工业中，木聚糖酶被用于水果、蔬菜和植物加工，以促进浸渍过程，使汁液澄清，提高产量和过滤效率；被用于葡萄酒制造和酿造以促进葡萄皮浸渍和降低成品的混浊度；被用于培烤、磨粉、糕点、糖果的加工中以提高面团的弹性和强度，改善的面包质地；被用于咖啡加工中，以降低咖啡提取物的粘度并改善了干燥/冻干过程。第二，在造纸工业中，木聚糖酶被用于促进制浆处理和代替机械制浆，不仅能有效降低能量消耗还可提高纸浆的原纤维形成和透水性进而提高加工效率和纸张强度。第三，在纺织工业中，木聚糖酶被用于纺织品(亚麻，黄麻，兰麻，大麻等)的酶解返麻中，以减少或替代化学混麻方法。第四，在农牧业中，木聚糖酶被广泛应用于单胃动物(如猪和家禽)以及反刍动物的饲料中。辅助动物有效降解木聚糖，降低饲料中非淀粉多糖的含量，以提高饲料的可消化性和营养价值同时减少环境污染。木聚糖酶在生物能源领域的作用。尤为重要的是，在全球化石资源日益枯竭，开发新型生物能源迫在眉睫的背景下，木聚糖酶可与其他纤维素酶、半纤维素酶共同应用于将木质纤维素转化为燃料乙醇的工业生产中。一方面，木聚糖酶通过降解木质纤维素中与木质素及纤维素骨架链紧密交联的半纤维素链，大大提高纤维素酶接触并作用于纤维素链的频率和效率，从而间接提高纤维素的降解效率；另一方面，随着近年来五碳糖发酵途径及菌株的研究、开发，利用细菌、酵母及丝状真菌发酵木聚糖水解产物木糖生产燃料乙醇的工艺日趋成熟。两方面共同作用使木质纤维素的转化效率大大提高，从而有效降低燃料乙醇的生产成本。木聚糖酶的研究历史。由于木聚糖酶有着广泛的用途，对木聚糖酶的研究早在六十年代就已开始，且已经从不同来源的微生物中分离到大量的不同类型不同功能的木聚糖酶。研究得较为清楚的有iTrichoderma reesei (里氏木霉)、Aspergillus niger (黑曲霉)、Sti^ptomyces Iividans (变铅青链霉菌)、Cellulomonas fimi (粪肥杆菌)、 Clostridium thermocellum(热纤梭菌)、Penicillium simplicissimum(简青霉)等所产生的木聚糖酶。需要指出的是，这些木聚糖酶基因大部分都是从纯培养的微生物中分离出来的，而自然界中可培养微生物的种类尚不足1 %，获得的木聚糖酶在理化特性、催化效率、 产量等方面也远远不能满足现代工业生产的需求。鉴于现有技术中大部分木聚糖酶的活力较低，在理化特性、催化效率、产量等方面也远远不能满足现代工业生产的需求，有必要进一步扩大筛选对象，从中筛选出新的、酶活性高的木聚糖酶，以用于工业生产，提高生产效率。

发明内容
本发明的目的在于提供一种新型内切木聚糖酶及其编码基因和应用。本发明的目的在于提供包括内切木聚糖酶基因的表达载体和宿主细胞，基因的表达和蛋白纯化方法，以及重组蛋白的酶学特性和功能特征。在本发明的第一方面，提供一种分离的多肽，该多肽选自下组(a)如SEQ ID NO 2氨基酸序列的多肽；(b)将SEQ ID NO 2氨基酸序列经过一个或多个(如1_20个，较佳地1_10个；更佳地1-5个；更佳地1-3个)氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a)多肽功能的由(a)衍生的多肽；(c)具有(a)多肽功能的SEQ ID NO 2的蛋白片段。在一个优选例中，所述的多肽来源于高等培菌白蚁肠道系统的元基因组。在本发明的另一方面，提供一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列选自下组(1)编码所述多肽的多核苷酸；(2)与多核苷酸(1)互补的多核苷酸。在另一优选例中，该多核苷酸编码如SEQ ID NO 2所示氨基酸序列的多肽。在另一优选例中，该多核苷酸的核苷酸序列如SEQ ID NO 1所示。在本发明的另一方面，提供一种载体，它含有所述的多核苷酸。在本发明的另一方面，提供一种遗传工程化的宿主细胞，它含有所述的载体，或其基因组中整合有所述的多核苷酸。在本发明的另一方面，提供一种所述的多肽的制备方法，该方法包含(a)培养所述的宿主细胞；
(b)从培养物中分离出所述的多肽。在本发明的另一方面，提供所述的多肽的用途，用于形成简单糖(还原糖)。在另一优选例中，所述的简单糖是低聚木糖或木寡糖(主要包括木二糖、木三糖或木四糖)。在另一优选例中，所述的多肽用于以内切形式水解底物，从而形成简单糖，所述的底物是木聚糖，或含木聚糖的物质(如半纤维素)。在另一优选例中，所述的木聚糖是桦木木聚糖和山毛榉木聚糖。在本发明的另一方面，提供一种组合物，它含有安全有效量的所述的多肽以及食品学或工业上可接受的载体。在另一优选例中，所述的组合物还含有调节酶活性的添加物。在另一优选例中，所述的调节酶活性的添加物是提高酶活性的添加物；较佳地选自=Tris-Cl，Mg2+或在添加至底物后可水解形成Mg2+的物质；或所述的调节酶活性的添加物是抑制酶活性的添加物；较佳地选自EDTA Ag+，Cu2+， Fe3+, Co2+，Ca2+，Mn2+，K+，Ba2+，Ni2+，Zn2+ 或 Al3+ ；或在添加至底物后可水解形成 Ag+，Cu2+，Fe3+, Co2+，Ca2+，Mn2+，K+，Ba2+，Ni2+，Zn2+ 或 Al3+ 的物质。在本发明的另一方面，提供一种形成简单糖的方法，该方法包含用所述的多肽处理待水解的底物，所述的底物包括木聚糖，或含木聚糖的物质。在一个优选例中，所述的木聚糖是桦木木聚糖和山毛榉木聚糖。在本发明的另一方面，提供一种水解、降解、液化或转化含纤维素或半纤维素或木聚糖的物质的方法，该方法包含用所述的多肽或所述的宿主细胞处理含纤维素或半纤维素或木聚糖的物质。在另一优选例中，在pH4_10. 5(较佳地是PH5. 5-10 ；更佳地是PH6. 0-9. 5 ；更佳地是PH7. 0-8. 0 ；最佳地是PH7. 5)条件下，用所述的多肽处理待水解的底物。在另一优选例中，在温度20-70°C (较佳地是40-58°C ；更佳地是50_55°C )条件下，用所述的多肽处理待水解的底物。在另一优选例中，用所述的多肽处理的同时，还加入调节酶活性的添加物。在另一优选例中，所述的调节酶活性的添加物是提高酶活性的添加物；较佳地选自=Tris-Cl，Mg2+或在添加至底物后可水解形成Mg2+的物质；或所述的调节酶活性的添加物是抑制酶活性的添加物；较佳地选自Ag+，Cu2+，Fe2+, Fe3+, Ca2+，Mn2+，K+，Ni2+，Zn2+ 或 Al3+ ；或在添加至底物后可水解形成 Ag+，Cu2+，Fe3+, Co2+，Ca2+， Mn2+，K+，Ba2+，Ni2+，Zn2+ 或 Al3+ 的物质。在另一优选例中，加入所述的Tris-Cl或Mg2+的浓度是1 士0. 5mM ；较佳地 1 士 0. 2mM ；更佳地1 士 0. ImM ；最佳地为ImM。在本发明的另一方面，提供所述的多肽的用途，用于作为食品工业的添加剂；较佳地，用于水果、蔬菜或植物加工，以促进浸渍过程，使汁液澄清，提高产量和过滤效率；用于葡萄酒制造和酿造以促进葡萄皮浸渍和降低成品的混浊度；被用于培烤、磨粉、糕点、糖果的加工中以提高面团的弹性和强度，改善的面包质地；被用于咖啡加工中，以降低咖啡提取物的粘度并改善了干燥/冻干过程；作为造纸工业的脱木素或纸浆漂白或脱墨的添加剂；较佳地，用于促进制浆处理和代替机械制浆，有效降低能量消耗，提高纸浆的原纤维形成和透水性，提高加工效率和纸张强度；作为纺织工业的酶解返麻工艺或织物漂白的添加剂；较佳地，用于的纺织品包括但不限于亚麻，黄麻，兰麻，大麻；作为饲料添加剂；较佳地，用于辅助动物降解木聚糖，降低饲料中非淀粉多糖的含量，以提高饲料的可消化性和营养价值同时减少环境污染；或作为乙醇工业生产的添加物；较佳地，用于降解木质纤维素中与木质素及纤维素骨架链紧密交联的半纤维素链，提高纤维素酶接触并作用于纤维素链的频率和效率，提高纤维素的降解效率；或用于微生物(包括细菌、酵母及丝状真菌)发酵木聚糖水解产物木糖生产乙醇。本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。


图1为重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET2^(+)-xyl6E7菌体PCR后的电泳图。图2为重组大肠杆菌BL21 (DE3)/pET22b (+)-xyl6E7在含桦木木聚糖的平板活性检测图。图3为内切-1，4_β-木聚糖酶基因xyl6E7的表达(左图)、表达产物的纯化(右图)SDS-PAGE图。其中左图泳道1为细胞裂解液总蛋白，泳道2为裂解液上清中的蛋白，泳道3为裂解液沉淀中的蛋白；右图泳道1为IOmM咪唑洗脱液，泳道2为20mM咪唑洗脱液， 泳道3为25mM咪唑洗脱液，泳道4为60mM咪唑洗脱液，泳道5为250mM咪唑洗脱液。图4为Xyl6E7在不同pH条件下的酶活力曲线。图5为Xyl6E7在不同温度条件下的酶活力曲线。图6为Xyl6E7对不同温度的耐受性检测结果。图7为Xyl6E7对桦木木聚糖在不同作用条件下的水解底物的TLC分析。其中，1 标准品X1为木糖，X2为木二糖，X3为木三糖；2 对照组(未与酶作用的桦木木聚糖)； 3:当酶量较少(0.03665U)，作用时间较短(10分钟)时将大分子木聚糖初步水解为一系列低聚木聚糖；4 当酶量较充分(3. 665U)，作用时间较长(12小时)时将其最终水解为木寡糖，主要包括木二糖、木三糖、木四糖。图8为Xyl6E7 pH耐受性测定。图9为Xyl6E7在三个pH值、50°C情况下，随时间延长酶活力的变化。
具体实施例方式本发明人经过大规模的筛选，首次从白蚁肠道的元基因组中分离得到一种新的木聚糖酶(较佳地为内切-1，4- β -木聚糖酶)，其酶活性高，对温度和pH具有较宽的作用范围，可良好地应用于工业生产。所述的木聚糖酶的氨基酸序列与已知氨基酸序列的相似性最高的为71.8%，证明其是一种新的蛋白。本发明的木聚糖酶具有很高的酶活性，在 pH7. 5，55°C下的比活力高于700U/mg。针对传统微生物学中基因筛选方面的缺陷，元基因组学(Metagenomics)技术异军突起。通过直接从环境中抽提微生物核酸并构建元基因组文库(BAC，fosmid或者质粒文库)，可以有效克服由于微生物分离培养技术造成的缺陷，获得群落中所有种群的遗传信息，这些遗传信息就包括了群落中所欲参与生物转化的基因，这些基因编码的酶在克隆宿主中的表达可以用于各种与生物转化相关的酶的筛选，从而有可能获得大量新的基因。众所周知，针对不同用途需要使用不同性质的木聚糖酶，而不同性质的木聚糖酶极有可能蕴藏于自然界不同生态环境下的微生物基因组中。白蚁作为自然生态系统中木质纤维素的重要降解者，其肠道共生微生物群落在纤维素物质转化过程中起到了关键作用。鉴于白蚁肠道生态系统的高效性、独特性和复杂性，本发明以白蚁作为木聚糖酶筛选的体系，利用元基因组学技术进行筛选，对其基因和酶进行挖掘，最终找到了本发明的木聚糖酶。本发明的木聚糖酶可作用于木聚糖长链分子的内部，以内切方式作用于木聚糖主链内部的β-1，4-木糖苷键，将大分子多聚木糖水解为简单糖(如木寡糖)。如本文所用，术语“本发明的多肽”、“本发明的蛋白”、“本发明的木聚糖酶”、 “Xy 16E7蛋白”、“Xy 16E7多肽”或“木聚糖酶Xy 16E7”可互换使用，都指具有木聚糖酶Xy 16E7 氨基酸序列(SEQ ID NO :2或其变异形式或衍生物)的蛋白或多肽。它们包括含有或不含起始甲硫氨酸的木聚糖酶Xyl6E7。如本文所用，术语“本发明的基因”、“xyl6E7基因”、“xyl6E7”指具有木聚糖酶编码基因序列(SEQ ID NO :1或其变异形式或衍生物)的多核苷酸。如本文所用，所述的“简单糖”广义地指木聚糖链被切割后形成的一类糖的总称， 其链长度低于被切割前。例如，所述的简单糖含有1-50个木糖，较佳的，含有1-30个木糖； 更佳的，含有1-15个木糖；更佳地含有1-10个木糖，如2，3，4，5，6，7，8，9个木糖。所述的简单糖包括木二糖、木三糖、木四糖等。本发明中，所述的简单糖又指低聚木糖。如本文所用，所述的“低聚木糖”指由少数单体木糖由β -1，4-糖苷键连接形成的低聚体；所述的“木聚糖”是由大量单体木糖由β_1，4-糖苷键连接形成的高聚体。如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。如本文所用，“分离的Xyl6E7蛋白或多肽”是指Xyl6E7多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化Xyl6E7蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。Xyl6E7 多肽的纯度能用氨基酸序列分析。本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主， 本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本发明还包括Xyl6E7蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、 “衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然Xyl6E7蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或 (iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列，或与抗原IgG片段的形成的融合蛋白)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。在本发明中，术语“Xyl6E7多肽”指具有Xyl6E7蛋白活性的SEQ ID NO 2序列的多肽。该术语还包括具有与Xyl6E7蛋白相同功能的、SEQ ID NO :2序列编码多肽的片段。 的变异形式。这些变异形式包括(但并不限于)一个或多个(通常为1-50个，较佳地1-30 个，更佳地1-20个，更佳地1-10个，最佳地1-5个)氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加或缺失一个或数个(通常为20个以内，较佳地为10个以内，更佳地为5个以内)氨基酸。例如，在本领域中，用性能相近或相似的氨基酸进行取代时，通常不会改变蛋白质的功能。比如，在C末端和/或N末端添加或缺失一个或数个氨基酸通常也不会改变蛋白质的功能；又比如，仅表达该蛋白的催化结构域，而不表达碳水化合物结合结构域也能获得和完整蛋白同样的催化功能。因此该术语还包括Xyl6E7蛋白的活性片段和活性衍生物。该多肽的变异形式包括同源序列、保守性变异体、等位变异体、天然突变体、诱导突变体、在高或低的严紧度条件下能与xyl6E7 DNA杂交的DNA所编码的蛋白、以及利用抗 Xyl6E7多肽的抗体获得的多肽或蛋白。本发明还提供了其他多肽，如包含Xyl6E7多肽或其片段的融合蛋白。除了几乎全长的多肽外，本发明还包括了 Xyl6E7多肽的可溶性片段。通常，该片段具有Xyl6E7多肽序列的至少约10个连续氨基酸，通常至少约30个连续氨基酸， 较佳地至少约50个连续氨基酸，更佳地至少约80个连续氨基酸，最佳地至少约100个连续氨基酸。发明还提供Xyl6E7蛋白或多肽的类似物。这些类似物与天然Xyl6E7多肽的差别可以是氨基酸序列上的差异，也可以是不影响序列的修饰形式上的差异，或者兼而有之。这些多肽包括天然或诱导的遗传变异体。诱导变异体可以通过各种技术得到，如通过辐射或暴露于诱变剂而产生随机诱变，还可通过定点诱变法或其他已知分子生物学的技术。类似物还包括具有不同于天然L-氨基酸的残基(如D-氨基酸)的类似物，以及具有非天然存在的或合成的氨基酸(如β、Y-氨基酸)的类似物。应理解，本发明的多肽并不限于上述例举的代表性的多肽。修饰(通常不改变一级结构)形式包括体内或体外的多肽的化学衍生形式如乙酰化或羧基化。修饰还包括糖基化，如那些在多肽的合成和加工中或进一步加工步骤中进行糖基化修饰而产生的多肽。这种修饰可以通过将多肽暴露于进行糖基化的酶(如哺乳动物的糖基化酶或去糖基化酶)而完成。修饰形式还包括具有磷酸化氨基酸残基(如磷酸酪氨酸，磷酸丝氨酸，磷酸苏氨酸)的序列。还包括被修饰从而提高了其抗蛋白水解性能或优化了溶解性能的多肽。在本发明中，“Xyl6E7蛋白保守性变异多肽”指与SEQ ID NO :2的氨基酸序列相比，有至多20个，较佳地至多10个，更佳地至多5个，最佳地至多3个氨基酸被性质相似或相近的氨基酸所替换而形成多肽。这些保守性变异多肽最好根据表1进行氨基酸替换而产生。表 权利要求
1.一种分离的多肽，其特征在于，该多肽选自下组(a)如SEQID NO 2氨基酸序列的多肽；(b)将SEQID NO :2氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有(a)多肽功能的由(a)衍生的多肽；(c)具有(a)多肽功能的SEQID NO 2的蛋白片段。
2.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列选自下组(1)编码如权利要求1所述多肽的多核苷酸；(2)与多核苷酸(1)互补的多核苷酸。
3.如利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码如SEQID N0:2所示氨基酸序列的多肽。
4.如权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的核苷酸序列如SEQID NO 1所示。
5.一种载体，其特征在于，它含有权利要求2-4任一所述的多核苷酸。
6.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它含有权利要求5所述的载体，或其基因组中整合有权利要求2-4任一所述的多核苷酸。
7.一种权利要求1所述的多肽的制备方法，其特征在于，该方法包含(a)培养权利要求6所述的宿主细胞；(b)从培养物中分离出权利要求1所述的多肽。
8.权利要求1所述的多肽的用途，用于形成简单糖。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述的简单糖是低聚木糖或木寡糖。
10.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述的多肽用于以内切形式水解底物，从而形成简单糖，所述的底物是木聚糖，或含木聚糖的物质。
11.如权利要求10所述的用途，其特征在于，所述的木聚糖是桦木木聚糖和山毛榉木聚糖。
12.一种组合物，其特征在于，它含有安全有效量的权利要求1所述的多肽以及食品学或工业上可接受的载体。
13.如权利要求12的组合物，其特征在于，还含有调节酶活性的添加物。
14.如权利要求13的组合物，其特征在于，所述的调节酶活性的添加物是提高酶活性的添加物；较佳地选自Tris_Cl，Mg2+或在添加至底物后可水解形成Mg2+的物质；或所述的调节酶活性的添加物是抑制酶活性的添加物；较佳地选自EDTA，Ag+，Cu2+，i^3+， Co2+，Ca2+，Mn2+，K+，Ba2+，Ni2+，Zn2+ 或 Al3+ ；或在添加至底物后可水解形成 Ag+，Cu2+，Fe3+, Co2+， Ca2+，Mn2+，K+，Ba2+，Ni2+，Zn2+ 或 Al3+ 的物质。
15.一种形成简单糖的方法，其特征在于，该方法包含用权利要求1所述的多肽或权利要求6所述的宿主细胞处理待水解的底物，所述的底物包括木聚糖，或含木聚糖的物质。
16.一种水解、降解、液化或转化含纤维素或半纤维素或木聚糖的物质的方法，其特征在于，该方法包含用权利要求1所述的多肽或权利要求6所述的宿主细胞处理含纤维素或半纤维素或木聚糖的物质。
17.如权利要求15或16所述的方法，其特征在于，在PH4-10.5条件下，用权利要求1所述的多肽处理待水解的底物。
18.如权利要求15或16所述的方法，其特征在于，在温度20-70°C条件下，用权利要求 1所述的多肽处理待水解的底物。
19.如权利要求15或16所述的方法，其特征在于，用权利要求1所述的多肽处理的同时，还加入调节酶活性的添加物。
20.权利要求1所述的多肽的用途，用于 作为食品工业的添加剂；作为造纸工业的脱木素或纸浆漂白或脱墨的添加剂； 作为纺织工业的酶解返麻工艺或织物漂白的添加剂； 作为饲料添加剂；或作为乙醇工业生产的添加物。
全文摘要
本发明涉及一种新型内切木聚糖酶及其编码基因和应用。本发明还涉及含有所述编码基因的表达载体和宿主细胞。本发明还涉及利用所述木聚糖酶形成简单糖的方法。本发明的木聚糖酶的酶活性高，具有宽的pH值和温度适用性，可良好地应用于工业生产。
文档编号C12N15/63GK102286447SQ201110179148
公开日2011年12月21日 申请日期2011年6月20日 优先权日2010年6月18日
发明者严兴, 刘宁, 周志华, 王倩, 王升跃, 王玥珠, 苗雪霞, 谢磊, 黄勇平 申请人:中国科学院上海生命科学研究院