技术总结
本发明涉及一种分泌表达海藻糖合酶基因工程菌的构建方法与应用。构建方法步骤如下：(1)PCR扩增NprE信号肽序列和海藻糖合酶序列ps TreS；(2)制备NprE‑ps TreS片段；(3)将NprE‑ps TreS片段经双酶切后，与同样经双酶切后的pHT01质粒连接，转入大肠杆菌DH5α中，制得重组质粒pHT01‑NprE‑ps TreS；(4)将重组质粒通过电转化的方法转入枯草芽孢杆菌中，通过氯霉素平板筛选后，制得分泌表达海藻糖合酶基因工程菌。本发明首次在重组载体中加入信号肽片段NprE，该信号可以将目的蛋白海藻糖合酶分泌到重组工程菌的细胞外进行表达，从而极大简化了后续酶分离纯化的步骤。
技术研发人员：苏静;张云霄;王瑞明
受保护的技术使用者：齐鲁工业大学
文档号码：201610675597
技术研发日：2016.08.16
技术公布日：2017.01.04