1.一种整合缺陷型慢病毒载体,其特征在于,所述慢病毒载体在pCMV-dR8.91慢病毒质粒的4846-4848位碱基编码的苯丙氨酸突变为丙氨酸和/或在pCMV-dR8.91慢病毒质粒的4328-4830位碱基编码的组氨酸突变为丙氨酸。
2.根据权利要求1所述的慢病毒载体,其特征在于,所述苯丙氨酸突变为丙氨酸是通过pCMV-dR8.91慢病毒质粒的4846-4848位的碱基由CA突变为GC。
3.根据权利要求1或2所述的慢病毒载体,其特征在于,所述组氨酸突变为丙氨酸是通过pCMV-dR8.91慢病毒质粒的4828-4830位的碱基由TT突变为GC。
4.一种重组慢病毒,其特征在于,如权利要求1-3中任一项所述的慢病毒载体与pFUGW表达载体及包膜载体pVSV-G载体进行共转染哺乳细胞得到的重组慢病毒。
5.一种宿主细胞,其特征在于,包括如权利要求1-3中任一项所述的慢病毒载体或如权利要求4所述的重组慢病毒;
优选地,所述宿主细胞为293T、293FT或293LTV中的任意一种或至少两种的组合,优选为293T细胞。
6.一种如权利要求1-3中任一项所述的慢病毒载体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)根据序列设计引物,以pCMV-dR8.91慢病毒质粒为模板进行扩增,得到一个突变的基因片段;
任选地,(2)将步骤(1)扩增得到的基因片段作为模板进行扩增,得到具有两个突变的基因片段;
(3)将步骤(1)或步骤(2)扩增得到的基因片段连接到pCMV-dR8.91慢病毒质粒中,构建重组质粒;
(4)将重组质粒转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述引物为SEQ ID NO.1-6所示的序列。
8.根据权利要求6或7所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)扩增的引物为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.6所示的序列。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)所述将扩增得到的基因片段连接到pCMV-dR8.91慢病毒质粒的Acc65I和EcoRI克隆位点。
10.一种如权利要求1-3中任一项所述的慢病毒载体或如权利要求4所述的重组慢病毒在制备基因治疗药物中的应用。