UDP‑糖基转移酶的制作方法

文档序号:13426305
UDP‑糖基转移酶的制作方法
UDP-糖基转移酶发明领域本发明涉及一种重组宿主,其包含编码变体UDP-糖基转移酶(UGT)多肽的重组核酸序列。本发明还涉及一种使用这种重组宿主制备糖基化二萜的方法,并且涉及一种可得自这种方法的发酵液。本发明还涉及一种通过这种方法获得或可从这种发酵液获得的糖基化二萜,并且涉及一种包含两种或更多种此类糖基化二萜的组合物。此外,本发明涉及一种包含这种糖基化二萜或这种组合物的食品、饲料或饮料。本发明还涉及一种使用上述重组宿主将第一糖基化二萜转化为第二糖基化二萜的方法。此外,本发明涉及变体UGT多肽、编码此类多肽的核酸序列、包含这种多核苷酸序列的核酸构建体以及一种使用上述重组宿主产生变体UGT多肽的方法。发明背景多年生草本植物甜叶菊(SteviarebaudianaBert.)的叶子积聚大量被称为甜菊醇糖苷的具有强烈甜味的化合物。虽然这些化合物的生物功能尚不清楚,但它们作为替代性高效甜味剂具有商业意义。这些甜的甜菊醇糖苷的功能和感官特性表现为优于许多高效甜味剂的功能和感官特性。此外,研究表明甜菊苷能够降低II型糖尿病患者的血糖水平,并且能够降低轻度高血压患者的血压。甜菊醇糖苷积聚在甜叶菊叶中,其中它们可占叶干重的10%至20%。甜菊苷和莱鲍迪甙A均是热和pH稳定的,并且适用于碳酸饮料和许多其他食物。甜菊苷比蔗糖甜110与270倍之间,莱鲍迪甙A比蔗糖甜150与320倍之间。此外,莱鲍迪甙D也是在甜叶菊叶中积聚的高效二萜糖苷甜味剂。它可比蔗糖甜约200倍。莱鲍迪甙M是另一种高效二萜糖苷甜味剂。它在某些甜叶菊品种叶中以痕量存在,但已表明其具有优异的味道特征。传统上已从甜叶菊植物中提取了甜菊醇糖苷。在甜叶菊中,(-)-贝壳杉烯酸(赤霉酸(GA)生物合成中的中间体)被转化成四环二萜甜菊醇,其然后通过多步糖基化途径进行以形成各种甜菊醇糖苷。然而,产率可以是可变的,并且受到农业和环境条件的影响。此外,甜叶菊种植需要大量的土地面积、在收获前的很长时间、密集劳动以及用于提取和纯化糖苷的额外成本。最近,使用发酵工艺生产甜菊醇糖苷的兴趣日益增长。WO2013/110673和WO2015/007748中描述了可用于产生至少甜菊醇糖苷莱鲍迪甙A和莱鲍迪甙D的微生物。此类微生物的进一步改进是令人希望的,以便可产生更高量的甜菊醇糖苷和/或另外或新的甜菊醇糖苷和/或更高量的特异性甜菊醇糖苷和/或具有期望比例的不同甜菊醇糖苷的甜菊醇糖苷的混合物。发明概述在甜叶菊中,甜菊醇由GGPP合成,所述GGPP由脱氧木酮糖5-磷酸途径形成。两种二萜环化酶(-)-柯巴基二磷酸合酶(CPS)和(-)-贝壳杉烯合酶(KS)的活性导致形成(-)-贝壳杉烯,所述(-)-贝壳杉烯然后在三步反应中通过(-)-贝壳杉烯氧化酶(KO)氧化以形成(-)-贝壳杉烯酸。在甜叶菊叶中,(-)-贝壳杉烯酸然后通过对映-贝壳杉烯酸13-羟化酶(KAH)羟基化以形成甜菊醇。甜菊醇然后通过一系列UDP-糖基转移酶(UGT)糖基化,从而形成许多甜菊醇糖苷。具体地说,这些分子可被视为甜菊醇分子,其羧基氢原子被葡萄糖分子代替以形成酯,并且羟基氢被葡萄糖和鼠李糖的组合代替以形成缩醛。这些途径可在重组宿主例如酵母如酵母属(Saccharomyces)和耶氏酵母属(Yarrowia)中重建。本发明涉及新的变体UDP-糖基转移酶(UGT)多肽的鉴定,其与当前已知的那些相比通常具有改进的性质。这些多肽可用于产生重组宿主,所述重组宿主产生更高量的甜菊醇糖苷和/或另外或新的甜菊醇糖苷和/或更高量的特异性甜菊醇糖苷和/或具有期望比例的不同甜菊醇糖苷的甜菊醇糖苷的混合物。因此,本发明还涉及一种能够产生糖基化二萜(即二萜糖苷如甜菊醇糖苷)的重组宿主,所述糖基化二萜如甜菊单糖苷、甜菊双糖苷、甜菊苷、莱鲍迪甙A、莱鲍迪甙B、莱鲍迪甙C、莱鲍迪甙D、莱鲍迪甙E、莱鲍迪甙F、莱鲍迪甙M、甜茶苷、杜克苷A、甜菊醇-13-单糖苷、甜菊醇-19-单糖苷或13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳衫-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯甜菊醇-19-双糖苷,因此,本发明涉及一种重组宿主,其包含通常具有UDP-糖基转移酶(UGT)活性如UGT2活性的重组核酸序列,所述重组核酸序列编码多肽,所述多肽:a.与SEQIDNO:1中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;b.与SEQIDNO:3中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;c.与SEQIDNO:6中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;d.与SEQIDNO:9中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;e.与SEQIDNO:11中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;f.与SEQIDNO:14中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;g.与SEQIDNO:17中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;h.与SEQIDNO:20中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;i.与SEQIDNO:22中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;或j.与SEQIDNO:25中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性。本发明还涉及:–一种用于制备糖基化二萜的方法,所述方法包括在合适的发酵培养基中发酵本发明的重组宿主,并且任选地回收糖基化二萜;–一种发酵液,其包含能够通过本发明的方法获得的糖基化二萜;–一种通过这种方法获得或能够从这种发酵液获得的糖基化二萜;–一种包含两种或更多种此类二萜的组合物;–一种包含这种糖基化二萜的食品、饲料或饮料;–一种用于将第一糖基化二萜转化为第二糖基化二萜的方法,所述方法包括:–使所述第一糖基化二萜与本发明的重组宿主、源自这种重组宿主的无细胞提取物或源自其任一者的酶制剂接触;–从而将所述第一糖基化二萜转化为所述第二糖基化二萜。–一种具有UGT2活性的多肽,其中所述多肽选自由以下各项组成的组:(a)包含在SEQIDNO:1、3、6、9、11、14、17、20、22或25中的任一个中列出的氨基酸序列的多肽;或(b)包含与SEQIDNO:1、3、6、9、11、14、17、20、22或25中的任一个的氨基酸序列具有至少约85%序列同一性的氨基酸序列的多肽;或(c)由包含在SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个中列出的多核苷酸序列的多核苷酸编码的多肽;或(d)由包含与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个中的多肽编码序列具有至少50%序列同一性的多核苷酸序列的多核苷酸编码的多肽;或(e)由优选在至少低严格性条件下与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个的互补链杂交的多核苷酸编码的多肽;或(f)由优选在至少低严格性条件下与同SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个具有至少50%序列同一性的多核苷酸的互补链杂交的多核苷酸编码的多肽;或(g)在(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)中定义的多肽的片段。–一种编码这种多肽的多核苷酸序列;–一种包含这种多核苷酸序列的核酸构建体;以及–一种产生本发明的多肽的方法,所述方法包括:(a)在有利于通过本发明的重组宿主产生所述多肽的条件下培养宿主细胞,以及任选地(b)回收所述多肽。附图说明图1示出了质粒pUG7-EcoRV的示意性图示。图2示出了(A)设计ERG20、tHMG1和BTS1过度表达盒并且(B)整合到酵母基因组中的方法的示意性图示。(C)示出了在通过Cre重组酶除去KANMX标记后的最终情况。图3示出了ERG9敲低构建体的示意性图示。所述构建体由ERG9的500bp长的3'部分、TRP1启动子的98bp、TRP1开放阅读框和终止子、随后ERG9的400bp长的下游序列组成。由于在ERG9开放阅读框末端处引入Xbal位点,所以最后一个氨基酸变成Ser,并且终止密码子变成Arg。新的终止密码子位于TPR1启动子中,从而导致18个氨基酸的延伸。图4示出了UGT2如何整合到基因组中的示意性图示。A.在转化中使用的不同片段;B.整合后的情况;C.在Cre重组酶表达后的情况)。图5示出了从GGPP至甜菊醇的途径如何整合到基因组中的示意性图示。A.在转化中使用的不同片段;B.在整合后的情况。图6示出了携带CRE基因的pSH65质粒,其用于除去抗生素标志物。图7示出了质粒pUG7-NAT的图谱。图8示出了用Nat选择标记从STV008置换UGT2_1a。图9示出了从STV008除去NAT标记。图10示出了将UGT2基因整合在Chr09.01基因座处。图11示出了携带UGT2的不同变体的酵母属菌株中的莱鲍迪甙A的产生。图12示出了表达UGT2的不同变体的酵母属菌株中的莱鲍迪甙M的产生,作为表达UGT2_1a的酵母属菌株中的莱鲍迪甙M产生的百分比。图13示出了携带基因tHMG和UGT2_1a的质粒MB6969的图谱。图14示出了携带基因tHMG的质粒MB6856的图谱。图15示出了携带基因tHMG的质粒MB6857的图谱。图16示出了携带基因GGS的质粒MB6948的图谱。图17示出了携带基因GGS的质粒MB6958的图谱。图18示出了携带基因UGT1、UGT3和UGT4的质粒MB7015的图谱。图19示出了携带基因tHMG和GGS的质粒MB6986的图谱。图20示出了携带基因tCPS_SR、tKS_SR、KAH_4、KO_Gib和CPR_3的质粒MB7059的图谱。图21示出了携带基因tCPS_SR、tKS_SR、KAH_4、KO_Gib和CPR_3的质粒MB7100的图谱。图22示出了携带基因tHMG和GGS的质粒MB6988的图谱。图23示出了携带基因tCPS_SR、tKS_SR、KAH_4、KO_Gib和CPR_3的质粒MB7044的图谱。图24示出了携带基因tCPS_SR、tKS_SR、KAH_4、KO_Gib和CPR_3的质粒MB7094的图谱。图25示出了携带CRE基因的质粒MB6128的图谱,其用于除去抗生素标志物。图26示出了在由gsy1整合侧翼侧接的基因UGT2、KanMX、UGT1和KAH_4的质粒中组装的方法。图27示出了图26的质粒的扩增和转化至耶氏酵母属的方法。图28示出了表达UGT2的不同变体的耶氏酵母属菌株中的莱鲍迪甙A的产生。图29示出了表达UGT2的不同变体的耶氏酵母属菌株中的莱鲍迪甙M的产生,作为表达UGT2_1a的耶氏酵母属菌株中的莱鲍迪甙M产生的百分比。图30示出了表达UGT2_6b(左图)或UGT2_7b(右图)的菌株中的RebA(上图)和RebM(下图)的产生。图31示出了导致甜菊醇糖苷的生物合成的潜在途径的示意性图示。图32示出了导致甜菊醇糖苷的生物合成的潜在途径的示意性图示。用星号示出的化合物是13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基]贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯。序列表的描述序列的描述在表13中列出。本文描述的序列可参考序列表或参考本文所列的任何数据库登录号进行定义,例如在表13中。发明详述在本说明书和所附权利要求书中,词语“包含”、“包括”和“具有”以及变化形式应被解释为包含性的。也就是说,这些词语意图表达在上下文允许的情况下可包含未具体叙述的其他要素或整数。不使用数量词修饰时在本文中用于指代一个或一个以上(即一个或至少一个)的语法对象。举例来说,“要素”可意指一个要素或多于一个要素。在本文,“莱鲍迪甙”可缩写为“reb”。即,例如莱鲍迪甙A和rebA意图表示同一分子。在涉及细胞、核酸、蛋白质或载体使用时,术语“重组”指示细胞、核酸、蛋白质或载体已通过引入异源核酸或蛋白质或改变天然核酸或蛋白质来进行修饰,或者指示细胞源自如此修饰的细胞。因此,例如,重组细胞表达在细胞的天然(非重组)形式中未发现的基因或者表达以其他形式异常表达、低表达或完全未表达的天然基因。术语“重组的”与“遗传修饰的”同义。本发明涉及具有UDP-糖基转移酶(UGT)活性的新的变体多肽。出于本发明的目的,具有UGT活性的多肽是具有糖基转移酶活性(EC2.4)的多肽,即可充当单糖单元从活化的核苷酸糖(也称为“糖基供体”)转移至糖基受体分子(通常为醇)的催化剂的多肽。用于UGT的糖基供体通常是核苷酸糖尿苷二磷酸葡萄糖(尿嘧啶二磷酸葡萄糖,UDP-葡萄糖)。本发明的多肽通常具有UGT活性,并且本发明的多核苷酸序列通常编码这种多肽。通常,本发明的多肽是具有UGT2型活性的变体多肽。根据本发明,因此提供了多肽,通常为具有UGT活性的多肽,其中所述多肽选自由以下各项组成的组:(a)包含在SEQIDNO:1、3、6、9、11、14、17、20、22或25中的任一个中列出的氨基酸序列的多肽;或(b)包含与SEQIDNO:1、3、6、9、11、14、17、20、22或25中的任一个的氨基酸序列具有至少约85%序列同一性的氨基酸序列的多肽;或(c)由包含在SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个中列出的多核苷酸序列的多核苷酸编码的多肽;或(d)由包含与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个中的多肽编码序列具有至少50%序列同一性的多核苷酸序列的多核苷酸编码的多肽;或(e)由优选在至少低严格性条件下与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个的互补链杂交的多核苷酸编码的多肽;或(f)由优选在至少低严格性条件下与同SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个具有至少50%序列同一性的多核苷酸的互补链杂交的多核苷酸编码的多肽;或(g)在(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)中定义的多肽的片段。这种多肽可包含与SEQIDNO:1、3、6、9、11、14、17、20、22或25中的任一个具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列。因此,本发明涉及:-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:1具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO3具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:6具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:9具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:11具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:14具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:17具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:20具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:22具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列;以及-通常具有UGT活性的多肽,所述多肽包含与SEQIDNO:25具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列。如本文所用,术语“多肽”是指包含通过肽键连接的氨基酸残基并含有多于五个氨基酸残基的分子。氨基酸由单字母或三字母名称标识。如本文所用的术语“蛋白质”与术语“多肽”同义,并且还可指两种或更多种多肽。因此,术语“蛋白质”、“肽”和“多肽”可互换使用。多肽可任选地进行修饰(例如,糖基化、磷酸化、酰化、法尼基化、异戊二烯化、磺化等)以增加官能度。展现活性的多肽可被称为酶。应理解,作为遗传密码简并的结果,可产生编码给定多肽的许多核苷酸序列。本发明的多肽可包含信号肽和/或前肽序列。在本发明的多肽包含信号肽和/或前肽的情况下,可在成熟多肽序列上计算序列同一性。本发明的多肽通常具有UGT活性,并且更优选地具有UGT2活性。图31和32示出了可通过具有UGT2的多肽催化的反应的非详尽列表。具有UGT2活性的多肽是充当尿苷5'-二磷酸葡糖基:甜菊醇-13-O-糖苷转移酶(也称为甜菊醇-13-单葡糖苷1,2-转葡糖基酶)的多肽,其将葡萄糖部分转移至受体分子甜菊醇-13-O-糖苷的13-O-葡萄糖的C-2'。通常,合适的UGT2多肽也充当尿苷5'-二磷酸葡糖基:甜茶苷转移酶,其将葡萄糖部分转移至受体分子甜茶苷13-O-葡萄糖的C-2'。具有UGT2活性的多肽也可催化利用除甜菊醇-13-O-糖苷和甜茶苷以外的甜菊醇糖苷底物的反应,例如,功能性UGT2多肽可利用甜菊苷作为底物,从而将葡萄糖部分转移至19-O-葡萄糖残基的C-2'以产生莱鲍迪甙E。功能性UGT2多肽还可利用莱鲍迪甙A作为底物,从而将葡萄糖部分转移至19-O-葡萄糖残基的C-2'以产生莱鲍迪甙D。具有UGT2活性的多肽也可催化利用甜菊醇-19-糖苷或甜茶苷作为底物的反应,例如,功能性UGT2多肽可利用甜菊醇-19-糖苷或甜茶苷作为底物,从而将葡萄糖部分转移至19位以分别产生甜菊醇-19-双糖苷或13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯。然而,功能性UGT2多肽通常不将葡萄糖部分转移至在C-13位具有1,3-结合的葡萄糖的甜菊醇化合物,即将葡萄糖部分转移至甜菊醇1,3-双糖苷和1,3-甜菊苷通常不会发生。具有UGT2活性的多肽也可从除尿苷二磷酸葡萄糖以外的供体转移糖部分。例如,具有UGT2活性的多肽充当尿苷5'-二磷酸D-木糖基:甜菊醇-13-O-糖苷转移酶,其将木糖部分转移至受体分子甜菊醇-13-O-糖苷的13-O-葡萄糖的C-2'。作为另一个实例,具有UGT2活性的多肽可充当尿苷5'-二磷酸L-鼠李糖基:甜菊醇-13-O-糖苷转移酶,其将鼠李糖部分转移至受体分子甜菊醇的13-O-葡萄糖的C-2'。一种或多种上述活性可用于定义具有UGT2活性的多肽。与UGT2_1a多肽(SEQIDNO:27)相比,本发明的多肽可在一种或多种上述活性方面具有改善的UGT2活性。本发明的多肽可用于将重组细胞中的甜菊醇糖苷的产生导向所需的甜菊醇糖苷,如莱鲍迪甙A、莱鲍迪甙D或莱鲍迪甙M。例如,优先催化甜菊醇-13-单糖苷转化为甜菊双糖苷和/或甜茶苷转化为甜菊苷的UGT2多肽可有助于使产生转向莱鲍迪甙A,而优先催化甜菊苷转化为rebE或甜茶苷转化为在19位具有另外糖的化合物的UGT2多肽可有助于使产生转向莱鲍迪甙M。也就是说,在13位添加糖部分的优先可有助于使产生转向莱鲍迪甙A,而在19位添加糖部分的优先可有助于使产生转向莱鲍迪甙M。本发明还提供了编码如本文所述的多肽的多核苷酸序列。这种多核苷酸序列可选自由以下各项组成的组:(a)包含SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个或包含与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个的多核苷酸序列具有至少30%序列同一性的多核苷酸序列的多核苷酸序列;或(b)优选在至少低严格性条件下与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个的互补链杂交的多核苷酸序列;或(c)优选在至少低严格性条件下与同SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个具有至少30%序列同一性的多核苷酸的互补链杂交的多核苷酸序列;(d)作为在(a)、(b)或(c)中任一项所定义的多核苷酸序列的遗传密码简并性的结果的简并物的多核苷酸序列;或(e)为在(a)、(b)、(c)或(d)中定义的核苷酸序列的互补物的多核苷酸序列。本发明的多核苷酸序列可与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个具有至少40%、至少50%、至少60%、优选至少70%、更优选至少80%、最优选至少90%、最优选至少93%、最优选至少约95%、最优选至少约96%、最优选至少约97%、甚至最优选至少约98%以及甚至更优选至少99%的序列同一性。如在本发明中使用的术语“核酸”是指包含至少5个核苷酸单元的核苷酸聚合物。核酸是指核糖核苷酸聚合物(RNA)、脱氧核苷酸聚合物(DNA)或任一类型的核酸的修饰形式或其合成形式或上述中的任一种的混合聚合物。核酸可包括通过天然存在和/或非天然存在的核酸键连接在一起的天然存在的核酸和修饰的核酸中的任一者或两者。核酸分子可被化学或生物化学修饰或可含有非天然或衍生化的核酸碱基,如本领域的技术人员所容易了解的。此类修饰包括例如标记、甲基化、以类似物替换一个或多个天然存在的核酸、核苷酸间修饰如不带电键联(例如,膦酸甲酯、磷酸三酯、氨基磷酸酯、氨基甲酸酯等)、带电键联(例如,硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯等)、悬垂(pendent)部分(例如,多肽)、嵌入剂(例如,吖啶、补骨脂素等)、螯合剂、烷基化剂以及修饰的键联(例如,α异头核酸等)。术语核酸还旨在包括任何拓扑构象,包括单链(有义链和反义链)、双链、部分双链体、三链体、发夹、环形和挂锁构象。还包括在经由氢键合和其他化学相互作用在结合至指定序列的能力方面模拟核酸的合成分子。此类分子在本领域中是已知的并且包括例如其中肽键联取代分子骨架中的磷酸酯键的那些分子。提及核酸序列涵盖其互补物,除非另有说明。因此,提及具有特定序列的核酸分子应理解为涵盖其互补链及其互补序列。互补链也适用于例如反义疗法、杂交探针和PCR引物。术语“核酸”、“多核苷酸”和“多核苷酸序列”可在本文中互换使用。如本文所用的,术语“杂交”是指寡聚化合物的基本上互补链的配对。一种配对机制涉及寡聚化合物链的互补核苷酸碱基(核苷酸)之间的氢键合,所述氢键合可以是沃森-克里克(Watson-Crick)、霍氏或反霍氏氢键合。例如,腺嘌呤与胸腺嘧啶是通过形成氢键配对的互补核酸。杂交可在不同情形下发生。本文使用“严格杂交”或“在低严格条件、中等严格条件、高严格条件或非常高严格条件下杂交”来描述用于杂交和洗涤的条件,更具体地说,寡聚化合物将与其靶序列而与最小数量的其他序列杂交的条件。因此,寡聚化合物将与靶序列杂交至比与其他序列杂交可检测到的更高程度。对于进行杂交反应的指导可见于CurrentProtocolsinMolecularBiology,JohnWiley&Sons,N.Y.(1989),6.3.1-6:3.6中。在所述参考文献中描述了水性和非水性方法并且可使用任一方法。严格条件是序列依赖性的并且将在不同情况下有所不同。通常,对于在限定离子强度和pH下的寡聚化合物而言,严格条件被选择为低于热熔点(Tm)约5℃。Tm是50%寡聚化合物与完全匹配探针杂交时所处的温度(在确定离子强度和pH下)。还可通过添加去稳定剂如甲酰胺来实现严格条件。特异性杂交条件的实例如下所示:1)在约45℃下在6X氯化钠/柠檬酸钠(SSC)中、随后至少在50℃下在0.2XSSC、0.1%SDS中洗涤2次的低严格杂交条件(对于低严格条件而言,洗涤的温度可增加至55℃);2)在约45℃下在6XSSC中、随后在60℃下在0.2XSSC、0.1%SDS中洗涤一次或多次的中等严格杂交条件;3)在约45℃下在6XSSC中、随后在65℃下在0.2XSSC、0.1%SDS中洗涤一次或多次的高严格杂交条件;以及4)非常高严格杂交条件是在65℃下0.5M磷酸钠、7%SDS,随后在65℃下在0.2XSSC、1%SDS中洗涤一次或多次。通常,高严格条件如高杂交温度和任选的低盐浓度仅允许高度相似的序列之间的杂交,而低严格条件如低杂交温度和任选的高盐浓度允许在序列相似性更小时的杂交。本发明还提供了包含本发明的多核苷酸序列的核酸构建体。术语“核酸构建体”是指单链或双链的核酸分子,其从天然存在的基因中分离或已经被修饰以含有以否则将不会在自然中存在的方式组合和并置的核酸的区段。当核酸构建体含有表达编码序列所需要的所有控制序列时,术语核酸构建体与术语“表达盒”的含义相同,其中所述控制序列可操作地连接至所述编码序列。本发明的核酸可以是表达载体,其中本发明的多核苷酸序列与至少一个用于在宿主细胞中表达多核苷酸序列的控制序列可操作地连接。如本文所用的术语“可操作地连接”是指物理地连接并且彼此有功能性关系的两个或多个核酸序列元件。例如,如果启动子能够起始或调控编码序列的转录或表达,则启动子可操作地连接至编码序列,在这种情况下,所述编码序列应被理解为在启动子的“控制下”。通常,当两个核酸序列可操作地连接时,它们将处于相同的取向并且通常也在同一阅读框中。它们通常将是基本上连续的,尽管这可能不是必需的。表达载体包含编码本发明多肽的多核苷酸,其可操作地连接至用于在体外或在宿主细胞中表达和/或翻译多核苷酸的适当控制序列(如启动子以及转录和翻译终止信号)。表达载体可以是能够方便地进行重组DNA程序并能使多核苷酸表达的任何载体(例如,质粒或病毒)。载体的选择通常将取决于所述载体与待引入所述载体的细胞的相容性。载体可以是线性或闭合的环状质粒。载体可以是自主复制型载体,即作为染色体外实体而存在、其复制独立于染色体复制的载体,例如,质粒、染色体外元件、微型染色体或人工染色体。或者,载体可以是当被引入宿主细胞时整合至基因组中并与其已整合至其中的染色体一起复制的载体。整合型克隆载体可随机或在预定靶基因座处整合在宿主细胞的染色体中。本发明的载体可包含一个或多个选择性标记,其允许容易地选择转化的细胞。本发明还提供了一种重组宿主,其包含编码本发明多肽的重组核酸序列。也就是说,本发明的重组宿主可包含例如编码以下多肽的重组核酸序列,所述多肽:a.与SEQIDNO:1中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;b.与SEQIDNO:3中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;c.与SEQIDNO:6中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;d.与SEQIDNO:9中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;e.与SEQIDNO:11中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;f.与SEQIDNO:14中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;g.与SEQIDNO:17中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;h.与SEQIDNO:20中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;i.与SEQIDNO:22中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;或j.与SEQIDNO:25中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性。本发明的重组宿主可包含编码本文所述的本发明多肽的任何多核苷酸。本发明的重组宿主通常能够表达本发明的多肽。通常,本发明的重组宿主能够产生糖基化二萜,如甜菊醇糖苷。例如,本发明的重组宿主可能够产生例如甜菊醇-13-单糖苷、甜菊醇-19-单糖苷、13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基]贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯、甜茶苷、甜菊苷、甜菊醇-19-双糖苷、甜菊双糖苷、rebA、rebE、rebD或rebM中的一种或多种。根据本发明的重组宿主可包含一个或多个编码以下中的一种或多种的重组核苷酸序列:具有对映-柯巴基焦磷酸合酶活性的多肽;具有对映-贝壳杉烯合酶活性的多肽;具有对映-贝壳杉烯氧化酶活性的多肽;以及具有贝壳杉烯酸13-羟化酶活性的多肽。出于本发明的目的,具有对映-柯巴基焦磷酸合酶(EC5.5.1.13)的多肽能够催化化学反应:所述酶具有一种底物,香叶基香叶基焦磷酸;以及一种产物,对映-柯巴基焦磷酸。所述酶参与赤霉素生物的合成。所述酶属于异构酶家族,特别是分子内裂解酶的类别。所述酶类别的系统名称是对映-柯巴基-二磷酸裂解酶(脱环)。通常使用的其他名称包括具有对映-柯巴基焦磷酸合酶、对映-贝壳杉烯合酶A和对映-贝壳杉烯合成酶A。编码对映-柯巴基焦磷酸合酶的合适核酸序列可例如包含在WO2015/007748的SEQID.NO:1、3、5、7、17、19、59、61、141、142、151、152、153、154、159、160、182或184中列出的序列。出于本发明的目的,具有对映-贝壳杉烯合酶活性(EC4.2.3.19)的多肽是能够催化以下化学反应的多肽:因此,所述酶具有一种底物,对映-柯巴基二磷酸;以及两种产物,对映-贝壳杉烯和二磷酸。所述酶属于裂解酶家族,特别是作用于磷酸盐/酯的碳-氧裂解酶。所述酶类别的系统名称是对映-柯巴基二磷酸二磷酸-裂解酶(环化,对映-贝壳杉烯形成)。常用的其它名称包括对映-贝壳杉烯合酶B、对映-贝壳杉烯合成酶B、对映-柯巴基-二磷酸二磷酸-裂解酶和(环化)。所述酶参与双萜类生物合成。编码对映-贝壳杉烯合酶的合适核酸序列可例如包含在WO2015/007748的SEQID.NO:9、11、13、15、17、19、63、65、143、144、155、156、157、158、159、160、183或184中列出的序列。对映-柯巴基二磷酸合酶还可具有与相同蛋白质分子相关联的不同对映-贝壳杉烯合酶活性。由对映-贝壳杉烯合酶催化的反应是赤霉素的生物合成途径中的下一步骤。两种类型的酶活性是不同的,并且定点诱变以抑制蛋白质的对映-贝壳杉烯合酶活性导致对映-柯巴基焦磷酸的积累。因此,本发明中使用的单个核苷酸序列可编码具有对映-柯巴基焦磷酸合酶活性和对映-贝壳杉烯合酶活性的多肽。或者,两种活性可被两个不同的分离的核苷酸序列编码。出于本发明的目的,具有对映-贝壳杉烯氧化酶活性(EC1.14.13.78)的多肽是能够催化对映-贝壳杉烯的4-甲基的三次连续氧化以产生贝壳杉烯酸的多肽。这种活性通常需要细胞色素P450的存在。编码对映-贝壳杉烯氧化酶的合适核酸序列可例如包含在WO2015/007748的SEQID.NO:21、23、25、67、85、145、161、162、163、180或186中列出的序列。出于本发明的目的,具有贝壳杉烯酸13-羟化酶活性(EC1.14.13)的多肽是能够催化使用NADPH和O2形成甜菊醇(对映-贝壳杉-16-烯-13-醇-19-酸)的多肽。这种活性也可称为对映-贝壳杉烯酸13-羟化酶活性。编码贝壳杉烯酸13-羟化酶的合适核酸序列可例如包含在WO2015/007748的SEQID.NO:27、29、31、33、69、89、91、93、95、97、146、164、165、166、167或185中列出的序列。本发明的重组宿主可包含编码具有NADPH-细胞色素p450还原酶活性的多肽的重组核酸序列。也就是说,本发明的重组宿主可能够表达编码具有NADPH-细胞色素p450还原酶活性的多肽的核苷酸序列。出于本发明的目的,具有NADPH-细胞色素P450还原酶活性(EC1.6.2.4;也称为NADPH:高铁血红蛋白氧化还原酶、NADPH:血红素蛋白氧化还原酶、NADPH:P450氧化还原酶、P450还原酶、POR、CPR、CYPOR)的多肽通常是一种这样的多肽,其为膜结合酶,从而允许电子从含有FAD和FMN的酶NADPH:细胞色素P450还原酶(POR;EC1.6.2.4)转移至真核细胞的微粒体中的细胞色素P450。根据前述权利要求中任一项所述的重组宿主,其包含一个或多个编码以下中的一种或多种的重组核酸序列:(i)具有UGT74G1活性(UGT3活性)的多肽;(ii)具有UGT85C2活性(UGT1活性)的多肽;以及(iii)具有UGT76G1活性(UGT4活性)的多肽。图31和32示出了导致甜菊醇糖苷的生物合成的潜在途径的示意性图示。本发明的重组宿主通常将包含至少一种编码具有UGT1活性的多肽的重组核酸、至少一种编码具有UGT2活性的多肽的重组核酸、至少一种编码具有UGT3活性的多肽的重组核酸以及至少一种编码具有UGT4活性的多肽的重组核酸。一种核酸可编码两种或更多种此类多肽。编码本发明的多肽的核酸可用于将重组细胞中的甜菊醇糖苷的产生导向期望的甜菊醇糖苷,如莱鲍迪甙A、莱鲍迪甙D或莱鲍迪甙M。例如,编码优先催化甜菊醇-13-单糖苷转化为甜菊双糖苷和/或甜茶苷转化为甜菊苷的UGT2多肽的重组核酸可有助于使产生转向莱鲍迪甙A,而编码优先催化甜菊苷转化为rebE或甜茶苷转化为在19位具有另外糖的化合物的UGT2多肽的重组核酸可有助于使产生转向莱鲍迪甙M。也就是说,在13位添加糖部分的优先可有助于使产生转向莱鲍迪甙A,而在19位添加糖部分的优先可有助于使产生转向莱鲍迪甙M。本发明的重组宿主可包含编码能够催化向甜菊醇中添加C-13-葡萄糖的多肽的核苷酸序列。也就是说,本发明的重组宿主可包含能够催化将甜菊醇转化为甜菊醇单糖苷的反应的UGT。本发明的这种重组宿主可包含编码具有由UDP-糖基转移酶(UGT)UGT85C2所示的活性的多肽的核苷酸序列,由此宿主转化后的核苷酸序列赋予所述宿主将甜菊醇转化为甜菊醇单糖苷的能力。UGT85C2活性是将葡萄糖单元转移至甜菊醇的13-OH。因此,合适的UGT85C2可充当尿苷5'-二磷酸葡糖基:甜菊醇13-OH转移酶和尿苷5'-二磷酸葡糖基:甜菊醇-19-O-糖苷13-OH转移酶。功能性UGT85C2多肽还可催化葡糖基转移酶反应,所述反应利用除甜菊醇和甜菊醇-19-O-糖苷以外的甜菊醇糖苷底物。此类序列可在本文中称为UGT1序列。本发明的重组宿主可包含编码具有UGT活性的多肽的核苷酸序列,可包含编码能够催化向甜菊醇或甜菊醇单糖苷添加C-13-葡萄糖的多肽的核苷酸序列。也就是说,本发明的重组体可包含能够催化将甜菊醇单糖苷转化为甜菊双糖苷的反应的UGT。因此,这种重组宿主可能够将甜菊单糖苷转化为甜菊双糖苷。这种核苷酸序列的表达可赋予宿主产生至少甜菊双糖苷的能力。本发明的重组微生物也包含编码具有UGT活性的多肽的核苷酸序列,可包含编码能够催化向甜菊双糖苷添加C-19-葡萄糖的多肽的核苷酸序列。也就是说,本发明的微生物可包含能够催化将甜菊双糖苷转化为甜菊苷的反应的UGT。因此,这种微生物可能够将甜菊双糖苷转化为甜菊苷。这种核苷酸序列的表达可赋予微生物产生至少甜菊苷的能力。因此,本发明的微生物还可包含编码具有由UDP-糖基转移酶(UGT)UGT74G1所示活性的多肽的核苷酸序列,由此微生物转化后的核苷酸序列赋予细胞将甜菊双糖苷转化为甜菊苷的能力。合适的UGT74G1多肽可能够将葡萄糖单元分别转移至甜菊醇的13-OH或19-COOH。合适的UGT74G1多肽可充当尿苷5'-二磷酸葡糖基:甜菊醇19-COOH转移酶和尿苷5'-二磷酸葡糖基:甜菊醇-13-O-糖苷19-COOH转移酶。功能性UGT74G1多肽还可催化使用除甜菊醇和甜菊醇-13-O-糖苷以外的甜菊醇糖苷底物或者从除尿苷二磷酸葡萄糖以外的供体转移糖部分的糖基转移酶反应。此类序列可在本文中称为UGT3序列。本发明的重组宿主可包含编码能够催化甜菊苷的C-13位置处的葡萄糖的C-3'的葡糖基化的多肽的核苷酸序列。也就是说,本发明的重组宿主可包含UGT,所述UGT能够催化甜菊苷至莱鲍迪甙A的反应。因此,这种重组宿主可能够将甜菊苷转化为莱鲍迪甙A。这种核苷酸序列的表达可赋予宿主产生至少莱鲍迪甙A的能力。因此,本发明的重组微生物还可包含编码具有由UDP-糖基转移酶(UGT)UGT76G1所示的活性的多肽的核苷酸序列,由此微生物转化后的核苷酸序列赋予细胞将甜菊苷转化为莱鲍迪甙A的能力。合适的UGT76G1向受体分子甜菊醇1,2糖苷的C-13-O-葡萄糖的C-3'添加葡萄糖部分。因此,UGT76G1例如充当尿苷5'-二磷酸葡糖基:甜菊醇13-O-1,2葡糖苷C-3'葡糖基转移酶和尿苷5'-二磷酸葡糖基:甜菊醇-19-O-葡萄糖、13-O-1,2双糖苷C-3'葡糖基转移酶。功能性UGT76G1多肽还可催化葡糖基转移酶反应,所述反应使用含有除葡萄糖以外的糖的甜菊醇糖苷底物,例如甜菊醇鼠李糖苷和甜菊醇木糖苷。此类序列可在本文中称为UGT4序列。本发明的重组宿主通常包含编码具有上述所有四种UGT活性的多肽的核苷酸序列。给定核酸可编码具有一种或多种上述活性的多肽。例如,核酸编码具有两种、三种或四种上述活性的多肽。优选地,本发明的重组宿主包含UGT1、UGT2和UGT3以及UGT4活性。合适的UGT1、UGT3和UGT4序列在WO2015/007748的表1中进行了描述。本发明的重组宿主可包含编码具有UGT2活性的额外多肽的重组核酸序列。也就是说,本发明的重组宿主可包含编码本发明的变体UGT2和本发明的一种或多种另外的不同变体或任何另一不同的UGT2的核酸序列。使用编码UGT2_1b、UGT2_2b、UGT2_3b、UGT2_4b、UGT2_5b、UGT2_6b、UGT2_7b、UGT2_8b、UGT2_9b或UGT2_10b多肽(或如本文所述的相关多肽)的核酸序列可适用于改进rebA产生。使用编码UGT2_7b多肽(或如本文所述的相关多肽)的核酸序列可适用于改进rebM的产生。在本发明的重组宿主中,可上调宿主产生香叶基香叶基二磷酸(GGPP)的能力。在本发明的上下文中上调意味着重组宿主比等同的非重组宿主产生更多的GGPP。因此,本发明的重组宿主可包含编码羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶、法尼基-焦磷酸合成酶和香叶基香叶基二磷酸合酶的一个或多个核苷酸序列,由此微生物转化后的所述核苷酸序列赋予微生物产生提高水平的GGPP的能力。因此,根据本发明的重组宿主可包含编码羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶、法尼基-焦磷酸合成酶和香叶基香叶基二磷酸合酶中的一种或多种的一个或多个重组核酸序列。因此,本发明的重组宿主可包含编码以下中的一种或多种的核酸序列:具有羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶活性的多肽;具有法尼基-焦磷酸合成酶活性的多肽;具有香叶基香叶基二磷酸合酶活性的多肽。如本文所定义的宿主或宿主细胞是适于遗传操作的生物体,以及可以适用于目标产物的工业生产的细胞密度培养的生物体。合适的宿主可以是微生物,例如可维持在发酵装置中的微生物。宿主细胞可以是在自然界中发现的宿主细胞或源自遗传操作或传统诱变后的亲本宿主细胞的宿主细胞。如本文所用的,重组宿主是用如本文定义的一个或多个核苷酸序列进行遗传修饰或转化/转染的宿主。所述一个或多个此类核苷酸序列的存在改变微生物产生二萜糖苷、特别是一种或多种甜菊醇糖苷的能力。非重组宿主,即未转化/转染或遗传修饰的宿主通常不包含一个或多个使得细胞能够产生二萜糖苷的核苷酸序列。因此,非重组宿主通常是不天然地产生二萜糖苷的宿主,但是天然产生二萜或二萜糖苷并且已经根据本发明进行了修饰(且因此具有改变的产生二萜糖苷的能力)的宿主被认为是根据本发明的重组宿主。特别地,可行的是选自由对映-柯巴基焦磷酸合酶、对映-贝壳杉烯合酶、对映-贝壳杉烯氧化酶和贝壳杉烯酸13-羟化酶、UGT、羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶、法尼基-焦磷酸合成酶、香叶基香叶基二磷酸合酶和NADPH-细胞色素p450还原酶组成的组的酶对宿主是天然的,并且用一个或多个编码这些酶的核苷酸序列转化对赋予宿主细胞产生二萜糖苷的能力而言可以不是必须的。根据本发明的优选宿主可以是能够天然产生GGPP(即以其非重组形式)的重组宿主。宿主微生物产生二萜糖苷的进一步改进可通过传统菌株改良获得。宿主细胞可以是原核、古细菌或真核宿主细胞。原核宿主细胞可以是但不限于细菌宿主细胞。真核宿主细胞可以是但不限于酵母、真菌、变形虫、藻类、动物、昆虫宿主细胞。真核宿主细胞可以是真菌宿主细胞。“真菌”包括真菌(Eumycotina)亚门的所有物种(Alexopoulos,C.J.,1962,在IntroductoryMycology,JohnWiley&Sons,Inc.(约翰威立出版有限公司),纽约)。因此,术语真菌包括丝状真菌和酵母等等。“丝状真菌”在本文中定义为真核微生物,其包括真菌和卵菌亚门的所有丝状形式(如由Hawksworth等人,1995,同上所定义)。丝状真菌是以由壳多糖、纤维素、葡聚糖、壳聚糖、甘露聚糖以及其它复合多糖构成的菌丝壁为特征。营养体生长是通过菌丝延长,并且碳代谢是专性需氧的。丝状真菌菌株包括但不限于以下各项的菌株:枝顶孢属(Acremonium)、曲霉属(Aspergillus)、伞菌属(Agaricus)、短梗霉属(Aureobasidium)、隐球菌属(Cryptococcus)、棒囊壳属(Corynascus)、金孢子菌属(Chrysosporium)、网孢菌属(Filibasidium)、镰孢菌属(Fusarium)、腐质霉属(Humicola)、稻瘟病菌属(Magnaporthe)、红曲霉属(Monascus)、毛霉菌属(Mucor)、毁丝霉属(Myceliophthora)、被孢霉属(Mortierella)、新美鞭菌属(Neocallimastix)、脉孢菌属(Neurospora)、拟青霉属(Paecilomyces)、青霉菌属(Penicillium)、梨囊鞭菌属(Piromyces)、平革菌属(Phanerochaete)、柄孢壳菌属(Podospora)、密孔菌属(Pycnoporus)、根霉菌属(Rhizopus)、裂褶菌属(Schizophyllum)、粪壳菌属(Sordaria)、踝节菌属(Talaromyces)、篮状菌属(Rasmsonia)、热子囊菌属(Thermoascus)、梭孢壳属(Thielavia)、弯颈霉属(Tolypocladium)、栓菌属(Trametes)以及木霉属(Trichoderma)。可充当宿主细胞的优选丝状真菌菌株属于以下物种:黑曲霉(Aspergillusniger)、米曲霉(Aspergillusoryzae)、烟曲霉(Aspergillusfumigatus)、产黄青霉(Penicilliumchrysogenum)、桔青霉(Penicilliumcitrinum)、枝顶孢霉(Acremoniumchrysogenum)、里氏木霉(Trichodermareesei)、埃默森篮状菌(Rasamsoniaemersonii)(先前称为埃默森踝节菌(Talaromycesemersonii))、酱油曲霉(Aspergillussojae)、鲁克文金孢子菌(Chrysosporiumlucknowense)、嗜热毁丝霉(Myceliophtorathermophyla)。用于比较转化和未转化细胞的发酵特征的参考宿主细胞包括例如黑曲霉CBS120.49、CBS513.88;米曲霉ATCC16868、ATCC20423、IF04177、ATCC1011、ATCC9576、ATCC14488-14491、ATCC11601、ATCC12892;烟曲霉AF293(CBS101355);产黄青霉CBS455.95;桔青霉ATCC38065;产黄青霉P2;枝顶孢霉ATCC36225、ATCC48272;里氏木霉ATCC26921、ATCC56765、ATCC26921;酱油曲霉ATCC11906;鲁克文金孢子菌ATCC44006以及所有这些菌株的衍生株。作为丝状真菌宿主细胞特别优选的是黑曲霉CBS513.88及其衍生株。真核宿主细胞可以是酵母细胞。优选的酵母宿主细胞可选自以下属:酵母属(例如,酿酒酵母(S.cerevisiae)、贝酵母(S.bayanus)、巴斯德酵母(S.pastorianus)、卡尔斯伯酵母(S.carlsbergensis))、酒香酵母属(Brettanomyces)、克鲁维酵母属(Kluyveromyces)、假丝酵母属(Candida)(例如,克鲁斯假丝酵母(C.krusei)、拉考夫假丝酵母(C.revkaufi)、铁红假丝酵母(C.pulcherrima)、热带假丝酵母(C.tropicalis)、产朊假丝酵母(C.utilis))、伊萨酵母属(Issatchenkia)(例如,东方伊萨酵母(I.orientalis))、毕赤酵母属(Pichia)(例如,巴斯德毕赤酵母(P.pastoris))、裂殖酵母属(Schizosaccharomyces)、汉逊酵母属(Hansenula)、克勒克酵母属(Kloeckera)、管囊酵母属(Pachysolen)、许旺酵母属(Schwanniomyces)、毛孢子菌属(Trichosporon)、耶氏酵母属(例如,解脂耶氏酵母(Y.lipolytica)(先前分类为解脂假丝酵母(Candidalipolytica)))、Yamadazyma。原核宿主细胞可以是细菌宿主细胞。细菌宿主细胞可以是革兰氏阴性或革兰氏阳性细菌。细菌的实例包括但不限于,属于以下属的细菌:芽孢杆菌属(Bacillus)(例如,枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)、潘蒂芽孢杆菌(B.puntis)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)、嗜碱芽孢杆菌(B.halodurans)、短小芽孢杆菌(B.pumilus))、不动杆菌(Acinetobacter)、诺卡氏菌属(Nocardia)、黄杆菌属(Xanthobacter)、埃希氏杆菌属(Escherichia)(例如,大肠杆菌(例如,菌株DH1OB、Stbl2、DH5-α、DB3、DB3.1)、DB4、DB5、JDP682和ccdA-over(例如,美国申请号09/518,188)))、链霉菌属(Streptomyces)、欧文氏菌属(Erwinia)、克雷白氏杆菌属(Klebsiella)、沙雷氏菌属(Serratia)(粘质沙雷氏菌(S.marcessans))、假单胞菌属(Pseudomonas)(例如,铜绿假单胞菌(P.aeruginosa))、沙门氏菌属(Salmonella)(例如,鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)、伤寒沙门氏菌(S.typhi))。细菌还包括但不限于光合细菌(例如,绿色非硫细菌(例如,绿弯菌属(Choroflexus)细菌(例如橙黄绿弯菌(C.aurantiacus))、绿丝菌属(Chloronema)(例如,巨大绿丝菌(C.gigateum)))、绿色硫细菌(例如,绿菌属(Chlorobium)细菌(例如,泥生绿菌(C.limicola))、暗网菌属(Pelodictyon)(例如,微黄暗网菌(P.luteolum))、紫色硫细菌(例如,着色菌属(Chromatium)(例如,奥氏着色菌(C.okenii)))以及紫色非硫细菌(例如,红螺菌属(Rhodospirillum)(例如,深红红螺菌(R.rubrum))、红细菌属(Rhodobacter)(例如类球红细菌(R.sphaeroides)、荚膜红细菌(R.capsulatus))和红微菌属(Rhodomicrobium)细菌(例如万尼氏红微菌(R.vanellii)))。宿主细胞可以是来自非微生物生物体的宿主细胞。此类细胞的实例包括但不限于昆虫细胞(例如,果蝇属(Drosophila)(例如,黑腹果蝇(D.melanogaster))、夜蛾属(Spodoptera)(例如,草地贪夜蛾(S.frugiperda)Sf9或Sf21细胞)和粉纹夜蛾属(Trichoplusa)(例如,High-Five细胞));线虫细胞(例如,秀丽线虫(C.elegans)细胞);禽类细胞;两栖动物细胞(例如,非洲爪蟾(Xenopuslaevis)细胞);爬行动物细胞;以及哺乳动物细胞(例如NIH3T3、293、CHO、COS、VERO、C127、BHK、Per-C6、Bowes黑色素瘤和HeLa细胞)。本发明还提供了一种用于产生本发明的多肽的方法,所述方法包括:(a)在有利于通过本发明的重组宿主细胞产生所述多肽的条件下培养所述重组宿主细胞,以及任选地(b)回收所述多肽。根据本发明的重组宿主可能够在本领域中已知的任何合适的碳源上生长,并且将其转化为糖基化二萜,例如,甜菊醇糖苷。重组宿主可能够直接转化植物生物质、纤维素、半纤维素、果胶、鼠李糖、半乳糖、岩藻糖、麦芽糖、麦芽糖糊精、核糖、核酮糖或淀粉、淀粉衍生物、蔗糖、乳糖和甘油。因此,优选的宿主表达酶如用于将纤维素转化成葡萄糖单体和将半纤维素转化成木糖和阿拉伯糖单体所需的纤维素酶(内切纤维素酶和外切纤维素酶)和半纤维素酶(例如内切和外切木聚糖酶、阿拉伯糖酶),能够将果胶转化成葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸的果胶酶或将淀粉转化成葡萄糖单体的淀粉酶。优选地,宿主能够转化选自由以下各项组成的组的碳源:葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、蔗糖、乳糖和甘油。宿主细胞可例如是WO03/062430、WO06/009434、EP1499708B1、WO2006096130或WO04/099381中所描述的真核宿主细胞。因此,另一方面,本发明还提供了一种用于制备糖基化二萜如甜菊醇糖苷的方法,所述方法包括发酵本发明的重组宿主,所述重组宿主能够在合适的发酵培养基中产生至少一种糖基化二萜;以及任选地回收所述糖基化二萜。糖基化萜烯(例如甜菊醇糖苷)可以是甜菊醇-19-单糖苷、甜菊醇-19-双糖苷、甜菊醇-19-三糖苷、甜菊醇-13-单糖苷、甜茶苷、13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯、甜菊双糖苷、甜菊苷、莱鲍迪甙E、莱鲍迪甙B、莱鲍迪甙A、莱鲍迪甙D或莱鲍迪甙M。因此,本发明提供了一种用于产生一种或多种此类甜菊醇糖苷的方法。在用于产生糖基化二萜的方法中使用的发酵培养基可以是允许特定真核宿主细胞生长的任何合适的发酵培养基。发酵培养基的基本要素是本领域的技术人员已知的,并且可适用于所选择的宿主细胞。优选地,发酵培养基包含选自由以下各项组成的组的碳源:植物生物质、纤维素、半纤维素、果胶、鼠李糖、半乳糖、岩藻糖、果糖、麦芽糖、麦芽糖糊精、核糖、核酮糖或淀粉、淀粉衍生物、蔗糖、乳糖、脂肪酸、甘油三酯和甘油。优选地,发酵培养基还包含氮源,如尿素;或铵盐,如硫酸铵、氯化铵、硝酸铵或磷酸铵。根据本发明的发酵方法可以分批、分批补料或连续模式进行。也可应用单独的水解和发酵(SHF)方法或同时糖化和发酵(SSF)方法。这些发酵方法模式的组合对于最佳生产率来说也可以是可行的。如果在发酵方法中使用淀粉、纤维素、半纤维素或果胶作为碳源,则SSF方法可以是特别有吸引力的,其中可需要添加水解酶如纤维素酶、半纤维素酶或果胶酶以水解底物。在用于制备糖基化二萜的方法中使用的重组宿主可以是如上文所定义的任何合适的重组宿主。在所述方法中使用根据本发明的重组真核重组宿主可以是有利的,因为大多数真核细胞不需要用于繁殖的无菌条件并且对噬菌体感染不敏感。此外,真核宿主细胞可在低pH下生长以防止细菌污染。根据本发明的重组宿主可以是兼性厌氧微生物。兼性厌氧重组宿主可以需氧方式繁殖至高细胞浓度。然后可在高细胞密度下进行这种厌氧阶段,这显著地降低了所需的发酵体积并且可使需氧微生物污染的风险最小化。用于产生根据本发明的糖基化二萜的发酵方法可以是需氧或厌氧发酵方法。厌氧发酵方法可在本文中定义为在不存在氧的情况下运行或者基本上不消耗氧(优选小于5、2.5或1mmol/L/h),并且其中有机分子充当电子供体和电子受体两者的发酵方法。根据本发明的发酵方法也可首先在需氧条件下运行,且随后在厌氧条件下运行。发酵方法也可在限氧或微需氧条件下进行。或者,发酵方法可首先在需氧条件下运行,且随后在限氧条件下运行。限氧发酵方法是其中氧消耗受到从气体到液体的氧传递的限制的过程。氧限制的程度由进入气流的量和组成以及所用发酵设备的实际混合/传质特性决定。在根据本发明的方法中产生糖基化二萜可在宿主细胞的生长阶段期间、固定(稳定状态)阶段期间或在两个阶段期间发生。在不同的温度下运行发酵方法可以是可行的。用于产生糖基化二萜的方法可在对于重组宿主来说最佳的温度下进行。对于每种转化的重组宿主而言,最佳生长温度可不同并且是本领域的技术人员已知的。最佳温度可高于野生型生物的最适温度以在非无菌条件下在最低感染敏感性和最低冷却成本的条件下有效生长生物体。或者,所述方法可在对于重组宿主的生长来说不是最佳的温度下进行。用于产生根据本发明的糖基化二萜的方法可在任何合适的pH值下进行。如果重组宿主是酵母,则发酵培养基中的pH优选具有低于6、优选低于5.5、优选低于5、优选低于4.5、优选低于4、优选低于pH3.5或低于pH3.0或低于pH2.5、优选高于pH2的值。在这些低pH值下进行发酵的优点是可防止发酵培养基中污染细菌的生长。这种方法可在工业规模上进行。这种方法的产物是一种或多种糖基化二萜,如一种或多种甜菊醇糖苷,例如13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯、甜菊双糖苷、甜菊苷、莱鲍迪甙E、莱鲍迪甙B、莱鲍迪甙A、莱鲍迪甙D或莱鲍迪甙M中的一种或多种。从发酵培养基中回收糖基化二萜可通过本领域已知的方法进行,例如通过蒸馏、真空萃取、溶剂萃取或蒸发。在用于产生根据本发明的糖基化二萜的方法中,实现高于5mg/l发酵液、优选高于10mg/l、优选高于20mg/l、优选高于30mg/l发酵液、优选高于40mg/l、更优选高于50mg/l、优选高于60mg/l、优选高于70、优选高于80mg/l、优选高于100mg/l、优选高于1g/l、优选高于5g/l、优选高于10g/l、例如高于20g/l的浓度可以是可行的,但通常达约200g/l、如达约150g/l、如达约100g/l、例如达约70g/l的浓度。此类浓度可以是总发酵液或上清液的浓度。本发明还提供了一种包含能够通过本发明的用于制备糖基化二萜的方法获得的糖基化二萜的发酵液。在微生物中表达一种或多种糖基化二萜的情况下,可需要处理此类细胞以释放它们。优选地,在细胞外产生至少一种糖基化二萜,如甜菊醇糖苷,例如rebA或rebM。本发明还提供了一种通过根据本发明的用于制备糖基化二萜的方法获得的或能够从本发明的发酵液获得的糖基化二萜。这种糖基化二萜可以是非天然存在的糖基化二萜,也就是说不在植物中产生的糖基化二萜。本发明还提供了一种包含能够通过本发明的用于制备糖基化二萜的方法获得或能够从本发明的发酵液获得的两种或更多种糖基化二萜的组合物。在这种组合物中,一种或多种糖基化二萜可以是非天然存在的糖基化二萜,也就是说不在植物中产生的糖基化二萜。此外,本发明提供了一种用于将第一糖基化二萜转化为第二糖基化二萜的方法,所述方法包括:–使所述第一糖基化二萜与本发明的重组宿主、源自这种重组宿主的无细胞提取物或源自其任一者的酶制剂接触;–从而将所述第一糖基化二萜转化为所述第二糖基化二萜。在这种方法中,第二糖基化二萜可以是甜菊醇-19-双糖苷、甜菊双糖苷、甜菊苷、RebE、RebD或13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯。在这种方法中,第一糖基化二萜可以是甜菊醇-13-单糖苷、甜菊醇-19-单糖苷、甜茶苷、甜菊苷、莱鲍迪甙A或13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯,并且第二糖基化二萜是甜菊醇-19-双糖苷、甜菊双糖苷、甜菊苷、RebE、RebD或13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯。这些是与通过本发明的具有UGT2活性的多肽催化的反应相关的第一和第二甜菊醇糖苷。也就是说,本发明涉及一种生物转变或生物转化方法。通过根据本发明的发酵方法产生的甜菊醇糖苷或组合物可用于对于此类化合物来说已知的任何应用中。特别地,它们可例如用作甜味剂,例如用于食品或饮料中。因此,根据本发明,提供了一种包含本发明的糖基化二萜如甜菊醇糖苷或组合物的食品、饲料或饮料。例如,本发明的糖基化二萜或组合物可被配制成软饮料、配制为桌面甜味剂、口香糖、乳制品如酸奶(例如原味酸奶)、蛋糕、谷物或基于谷类的食物、营养食品、药物、食用凝胶、糖果产品、化妆品、牙膏或其它口腔组合物等。此外,本发明的糖基化二萜或组合物可用作甜味剂,不仅用于饮料、食品和其它专门用于人消费的产品,而且用于具有改进的特性的动物饲料和草料中。因此,本发明尤其提供了一种包含根据本发明的方法制备的二萜或糖基化二萜的食品、饲料或饮料。在食品、饮料、药物、化妆品、桌面产品、口香糖的制造过程中,可使用诸如混合、捏合、溶解、酸洗、渗透、渗滤、喷洒、雾化、灌注和其它方法的常规方法。本发明的糖基化二萜例如甜菊醇糖苷或组合物可以干或液体的形式使用。它可在食品热处理之前或之后加入。甜味剂的量取决于使用目的。它可单独添加或与其它化合物组合添加。根据本发明的方法产生的化合物可与一种或多种其它非热量或热量甜味剂掺混。这种掺混可用于改进风味或时间特征或稳定性。广泛范围的非热量和热量甜味剂二者可适用于与本发明的糖基化二萜或组合物掺混。例如,非热量甜味剂如罗汉果苷、莫纳甜、阿斯巴甜、安赛蜜盐、环磺酸盐、三氯蔗糖、糖精盐或赤藓糖醇。适用于与本发明的糖基化二萜或组合物掺混的热量甜味剂包括糖醇和碳水化合物如蔗糖、葡萄糖、果糖和HFCS。还可使用甜味氨基酸,如甘氨酸、丙氨酸或丝氨酸。本发明的糖基化二萜或组合物可与甜味剂抑制剂如天然甜味剂抑制剂组合使用。它可与鲜味增强剂如氨基酸或其盐组合。本发明的糖基化二萜或组合物可与多元醇或糖醇、碳水化合物、生理活性物质或功能成分(例如类胡萝卜素、膳食纤维、脂肪酸、皂苷、抗氧化剂、营养食品、类黄酮、异硫氰酸酯、苯酚、植物甾醇或甾烷醇(植物甾醇和植物甾烷醇)、多元醇、益生元、益生菌、植物雌激素、大豆蛋白、硫化物/硫醇、氨基酸、蛋白质、维生素、矿物质和/或基于健康益处如心血管、降胆固醇或抗炎分类的物质组合。具有本发明的糖基化二萜或组合物的组合物可包括调味剂、芳香组分、核苷酸、有机酸、有机酸盐、无机酸、苦味化合物、蛋白质或蛋白质水解产物、表面活性剂、类黄酮、收敛剂化合物、维生素、膳食纤维、抗氧化剂、脂肪酸和/或盐。本发明的糖基化二萜或组合物可作为高强度甜味剂应用,以产生具有改进的味道特征的零卡路里、低卡路里或糖尿病人用饮料和食品。它也可用于不能使用糖的饮料、食品、药物和其他产品中。此外,本发明的糖基化二萜或组合物可用作甜味剂,不仅用于饮料、食品和其它专门用于人消费的产品,而且用于具有改进的特性的动物饲料和草料中。本发明的糖基化二萜或组合物可用作甜味化合物的产品的实例可以是酒精饮料,如伏特加酒、葡萄酒、啤酒、烈酒、清酒等;天然果汁、提神饮料、碳酸软饮料、减肥饮料、零卡路里饮料、低卡路里饮料和食物、酸奶饮料、速溶果汁、速溶咖啡、粉末型速溶饮料、罐装产品、糖浆、发酵大豆酱、酱油、醋、调味品、蛋黄酱、番茄酱、咖喱、汤、速食肉汤、酱油粉、醋粉、多种类型的饼干、香米饼、咸饼干、面包、巧克力、焦糖、糖果、口香糖、果冻、布丁、蜜饯和腌菜、鲜奶油、果酱、橘子酱、糖花膏、奶粉、冰淇淋、冰糕、包装在瓶中的蔬菜和水果、罐装和煮熟的豆类、在甜味酱中煮熟的肉和食物、农业蔬菜食品、海鲜、火腿、香肠、鱼火腿、鱼香肠、鱼酱、油炸鱼制品、干制海产品、冷冻食品、腌渍海带、腊肉、烟草、医药产品等。原则上它可具有无限应用。甜味组合物包含饮料,其非限制性实例包括非碳酸化和碳酸饮料,如可乐、姜汁汽水、根汁汽水、苹果汁、水果味软饮料(例如柑橘味软饮料,如柠檬莱姆或橙汁)、软饮料粉等;来自水果或蔬菜的果汁、包括榨汁等的果汁、含有果粒的果汁、水果饮料、果汁饮料、含果汁的饮料、具有水果调味料的饮料、蔬菜汁、含蔬菜的汁以及含水果和蔬菜的混合果汁;运动饮料、能量饮料、接近水的饮料等(例如具有天然或合成调味剂的水);茶类或喜欢型饮料如咖啡、可可、红茶、绿茶、乌龙茶等;含乳成分饮料如乳饮料、含乳成分咖啡、牛奶咖啡、奶茶、果奶饮料、饮用酸奶、乳酸菌饮料等;以及乳制品。通常,甜味组合物中存在的甜味剂的量取决于甜味组合物的具体类型及其所需的甜度而广泛变化。本领域的普通技术人员可容易确定加入到甜味组合物中的甜味剂的适当量。本发明的糖基化二萜或组合物可以干或液体形式使用。它可在食品热处理之前或之后加入。甜味剂的量取决于使用目的。它可单独添加或与其它化合物组合添加。在食品、饮料、药物、化妆品、桌面产品、口香糖的制造过程中,可使用诸如混合、捏合、溶解、酸洗、渗透、渗滤、喷洒、雾化、灌注和其它方法的常规方法。因此,本发明的组合物可通过本领域的技术人员已知的提供成分的均匀或均质混合物的任何方法来制备。这些方法包括干混、喷雾干燥、团聚、湿法制粒、压实、共结晶等。呈固体形式时,本发明的糖基化二萜或组合物可以适于递送到待甜化的食物中的任何形式提供给消费者,所述形式包括小袋、小包、散装袋或盒、方块、片剂、喷雾或可溶解的条。所述组合物可以单位剂量或散装形式递送。对于液体甜味剂体系和组合物而言,应开发方便范围的流体、半流体、糊状和膏状形式、使用任何形状或形式的适当包装材料的适当包装,其便于携带或分配或储存或运输含有任何上述甜味剂产品或上述产品的组合的任何组合。所述组合物可包含多种填充剂、功能成分、着色剂、调味剂。术语“序列同源性”或“序列同一性”在本文中可互换使用。出于本发明的目的,在此定义为了确定两个氨基酸序列或两个核酸序列的序列同源性或序列同一性的百分比,出于最佳比较目的比对所述序列。为了优化两个序列之间的比对,可在比较的两个序列中的任一个中引入空位。这种比对可在所比较的序列的全长上进行。或者,比对可在更短的长度上进行,例如在约20、约50、约100或更多个核酸/碱基或氨基酸上进行。序列同一性是在所报告的比对区域上两个序列之间的相同匹配的百分比。两个序列之间的序列比较和序列同一性百分比的确定可使用数学算法来完成。本领域的技术人员将意识到以下事实:若干不同的计算机程序可用于比对两个序列并确定两个序列之间的同一性(Kruskal,J.B.(1983)AnoverviewofsequencecomparisonInD.SankoffandJ.B.Kruskal,(编辑),Timewarps,stringeditsandmacromolecules:thetheoryandpracticeofsequencecomparison,第1-44页AddisonWesley)。两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的序列同一性百分比可使用用于两个序列的比对的Needleman和Wunsch算法来确定(Needleman,S.B.和Wunsch,C.D.(1970)J.Mol.Biol.48,443-453)。氨基酸序列和核苷酸序列两者均可通过所述算法进行比对。Needleman-Wunsch算法已在计算机程序NEEDLE中实现。出于本发明的目的,使用了来自EMBOSS包的NEEDLE程序(2.8.0版或更高版本,EMBOSS:TheEuropeanMolecularBiologyOpenSoftwareSuite(2000)Rice,P.Longden,I.和Bleasby,A.TrendsinGenetics16,(6)第276-277页,http://emboss.bioinformatics.nl/)。对于蛋白质序列而言,EBLOSUM62用于取代矩阵。对于核苷酸序列而言,使用EDNAFULL。所使用的任选参数是空位开放罚分为10,以及空位延伸罚分为0.5。技术人员将理解的是,所有这些不同的参数将产生稍微不同的结果,但是当使用不同的算法时,两个序列的总体同一性百分比没有显著改变。在通过如上所述的程序NEEDLE进行比对后,查询序列与本发明的序列之间的序列同一性的百分比计算如下:在两个序列中显示相同氨基酸或相同核苷酸的比对中的相应位置的数目除以在减去比对中的总空位数后比对的总长度。如本文定义的同一性可通过使用NOBRIEF选项从NEEDLE获得,并且在程序的输出中标记为“最长同一性”。本发明的核酸和蛋白质序列可进一步用作“查询序列”以进行针对公共数据库的检索,以例如鉴定其它家族成员或相关序列。此类搜索可使用Altschul等人(1990)J.Mol.Biol.215:403—10的NBLAST和XBLAST程序(2.0版)进行。BLAST核苷酸搜索可用NBLAST程序(得分=100、字长=12)来进行,以获得与本发明的核酸分子同源的核苷酸序列。BLAST蛋白质搜索可用XBLAST程序(得分=50、字长=3)来进行,以获得与本发明的蛋白分子同源的氨基酸序列。为了获得用于比较目的的空位比对,可利用如在Altschul等人,(1997)NucleicAcidsRes.25(17):3389-3402中描述的空位BLAST。当利用BLAST和空位BLAST程序时,可使用相应程序(例如XBLAST和NBLAST)的默认参数。参见美国国家生物技术信息中心http://www.ncbi.nlm.nih.gov/的主页。本发明的一些实施方案:1.一种重组宿主,其包含编码多肽的重组核酸序列,所述多肽:a.与SEQIDNO:1中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;b.与SEQIDNO:3中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;c.与SEQIDNO:6中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;d.与SEQIDNO:9中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;e.与SEQIDNO:11中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;f.与SEQIDNO:14中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;g.与SEQIDNO:17中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;h.与SEQIDNO:20中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;i.与SEQIDNO:22中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性;或j.与SEQIDNO:25中列出的氨基酸序列具有至少约85%同一性。2.根据实施方案1所述的重组宿主,其能够产生糖基化二萜,如甜菊醇糖苷。3.根据实施方案1或2所述的重组宿主,其包含一个或多个重组核苷酸序列,所述重组核苷酸序列编码:具有对映-柯巴基焦磷酸合酶活性的多肽;具有对映-贝壳杉烯合酶活性的多肽;具有对映-贝壳杉烯氧化酶活性的多肽;以及具有贝壳杉烯酸13-羟化酶活性的多肽。4.根据前述实施方案中任一项所述的重组宿主,其包含重组核酸序列,所述重组核酸序列编码具有NADPH-细胞色素p450还原酶活性的多肽。5.根据前述实施方案中任一项所述的重组宿主,其包含编码以下中的一种或多种的重组核酸序列:(i)具有UGT74G1(UGT3)活性的多肽;(ii)具有UGT85C2(UGT1)活性的多肽;以及(iii)具有UGT76G1(UGT4)活性的多肽。6.根据前述实施方案中任一项所述的重组宿主,其包含重组核酸序列,所述重组核酸序列编码具有UGT2活性的额外多肽。7.根据前述实施方案中任一项所述的重组宿主,其中所述宿主属于以下属中的一种:酵母属、曲霉属、毕赤酵母属、克鲁维酵母属、假丝酵母属、汉逊酵母属、腐质霉属、伊萨酵母属、毛孢子菌属、酒香酵母属、管囊酵母属、耶氏酵母属、Yamadazyma或埃希氏杆菌属。8.根据实施方案7所述的重组宿主,其中所述重组宿主是酿酒酵母细胞、解脂耶氏酵母细胞、克鲁斯假丝酵母细胞、东方伊萨酵母细胞或大肠杆菌细胞。9.根据前述实施方案中任一项所述的重组宿主,其中所述宿主产生香叶基香叶基二磷酸(GGPP)的能力被上调。10.根据前述实施方案中任一项所述的重组宿主,其包含一个或多个重组核酸序列,所述重组核酸序列编码羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶、法尼基-焦磷酸合成酶和香叶基香叶基二磷酸合酶。11.根据前述实施方案中任一项所述的重组宿主,其包含核酸序列,所述核酸序列编码以下中的一种或多种:具有羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶活性的多肽;具有法尼基-焦磷酸合成酶活性的多肽;具有香叶基香叶基二磷酸合酶活性的多肽。12.一种用于制备糖基化二萜的方法,所述方法包括在合适的发酵培养基中发酵根据实施方案2至11中任一项所述的重组宿主,并且任选地回收所述糖基化二萜。13.根据实施方案12中任一项所述的方法,其用于制备糖基化二萜,其中所述方法以工业规模进行。14.一种发酵液,其包含能够通过根据实施方案12或13所述的方法获得的糖基化二萜。15.一种糖基化二萜,其通过根据实施方案12或13所述的方法获得或能够从根据实施方案14所述的发酵液获得。16.一种组合物,其包含通过根据实施方案12或13所述的方法获得或能够从根据实施方案14所述的发酵液获得的两种或更多种糖基化二萜。17.一种食品、饲料或饮料,其包含根据实施方案15的糖基化二萜或根据实施方案16的组合物。18.一种用于将第一糖基化二萜转化为第二糖基化二萜的方法,所述方法包括:–使所述第一糖基化二萜与根据实施方案1至11中任一项所述的重组宿主、源自这种重组宿主的无细胞提取物或源自上述任一者的酶制剂接触;–从而将所述第一糖基化二萜转化为所述第二糖基化二萜。19.根据实施方案18所述的方法,其中所述第二糖基化二萜是甜菊醇-19-双糖苷、甜菊双糖苷、甜菊苷、RebE、RebD或13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯。20.根据权利要求19所述的方法,其中所述第一糖基化二萜是甜菊醇-13-单糖苷、甜菊醇-19-单糖苷、甜茶苷、甜菊苷、莱鲍迪甙A或13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯,并且所述第二糖基化二萜是甜菊醇-19-双糖苷、甜菊双糖苷、甜菊苷、RebE、RebD或13-[(β-D-吡喃葡萄糖基)氧基)贝壳杉-16-烯-18-酸2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖基酯。21.一种具有UGT2活性的多肽,其中所述多肽选自由以下各项组成的组:(a)包含在SEQIDNO:1、3、6、9、11、14、17、20、22或25中的任一个中列出的氨基酸序列的多肽;或(b)包含与SEQIDNO:1、3、6、9、11、14、17、20、22或25中的任一个的氨基酸序列具有至少约85%序列同一性的氨基酸序列的多肽;或(c)由包含在SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个中列出的多核苷酸序列的多核苷酸编码的多肽;或(d)由包含与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个中的多肽编码序列具有至少30%序列同一性的多核苷酸序列的多核苷酸编码的多肽;或(e)由优选在至少低严格性条件下与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个的互补链杂交的多核苷酸编码的多肽;或(f)由优选在至少低严格性条件下与同SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个具有至少30%序列同一性的多核苷酸的互补链杂交的多核苷酸编码的多肽;或(g)在(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)中定义的多肽的片段。22.根据实施方案21的多肽,其包含具有与SEQIDNO:1、3、6、9、11、14、17、20、22或25中的任一个具有至少约86%序列同一性、至少约87%、至少约88%、至少约89%、至少约90%、至少约91%、至少约92%、至少约93%、至少约94%、至少约95%、至少约96%、至少约97%、至少约98%、至少约99%序列同一性的氨基酸序列的多肽。23.一种多核苷酸序列,其编码根据实施方案21或22所述的多肽。24.根据实施方案23所述的多核苷酸序列,其中所述多核苷酸序列选自由以下各项组成的组:(a)包含SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个或包含与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个的多核苷酸序列具有至少30%序列同一性的多核苷酸序列的多核苷酸序列;或(b)在优选至少低严格性条件下与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个的互补链杂交的多核苷酸序列;或(c)在优选至少低严格性条件下与同SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个具有至少30%序列同一性的多核苷酸的互补链杂交的多核苷酸序列;(d)作为在(a)、(b)或(c)中任一项所定义的多核苷酸序列的遗传密码简并性的结果的简并物的多核苷酸序列;或(e)为在(a)、(b)、(c)或(d)中定义的核苷酸序列的互补物的多核苷酸序列。25.根据实施方案5所述的多核苷酸序列,其与SEQIDNO:2、4、5、7、8、10、12、13、15、16、18、19、21、23、24或26中的任一个具有至少60%、优选至少70%、更优选至少80%、最优选至少90%、最优选至少93%、最优选至少约95%、最优选至少约96%、最优选至少约97%、甚至最优选至少约98%以及甚至更优选至少99%的序列同一性。26.一种核酸构建体,其包含如实施方案23至25中任一项所述的多核苷酸序列。27.根据实施方案26所述的核酸构建体,其是表达载体,其中根据实施方案23至25中任一项所述的多核苷酸序列与至少一个用于在宿主细胞中表达所述多核苷酸序列的控制序列可操作地连接。28.一种产生如实施方案21或22所述的多肽的方法,所述方法包括:(a)在有利于通过根据实施方案1的宿主细胞产生所述多肽的条件下培养所述宿主细胞,并且任选地(b)回收所述多肽。本文对作为现有技术给出的专利文件或其他事项的引用不应被视为承认所述文件或事项是已知的或者其所含的信息是在任何权利要求的优先权日的公知常识的一部分。本文列出的每个参考文献的公开内容均以引用的方式整体并入本文。通过以下实施例进一步说明本发明:实施例实施例1:酿酒酵母中ERG20、BTS1和tHMG的过度表达对于ERG20、BTS1tHMG1的过度表达而言,使用W02013/076280中描述的技术将表达盒设计为整合在一个基因座中。为了扩增整合基因座的5'和3'整合侧翼,使用了来自CEN.PK酵母菌株(vanDijken等人.EnzymeandMicrobialTechnology26(2000)706-714)的合适的引物和基因组DNA。不同的基因在DNA2.0作为盒(含有同源序列、启动子、基因、终止子、同源序列)订购。这些盒中的基因侧接组成型启动子和终止子。参见表1。将来自DNA2.0的含有ERG20、tHMG1和BTS1盒的质粒DNA溶解至100ng/μl的浓度。在50μlPCR混合物中,20ng模板与20pmol的引物一起使用。将材料溶解至0.5μg/μl的浓度。表1:过度表达构建体的组成启动子ORF终止子Eno2(SEQIDNO:30)ERG20(SEQIDNO:31)Adh1(SEQIDNO:32)Fba1(SEQIDNO:33)tHMG1(SEQIDNO:34)Adh2(SEQIDNO:35)Tef1(SEQIDNO:36)BTS1(SEQIDNO:37)Gmp1(SEQIDNO:38)为了扩增选择标记,使用了pUG7-EcoRV构建体(图1)和合适的引物。使用Zymoclean凝胶DNA回收试剂盒(ZymoResearch)从凝胶中纯化KanMX片段。将酵母菌株Cen.PK113-3C用表2中所列的片段转化。表2:用于转化ERG20、tHMG1和BTS1的DNA片段片段5’YPRcTau3ERG20盒tHMG1盒KanMX盒BTS1盒3’YPRcTau3在30℃下在YEPhD(酵母提取物植物蛋白胨葡萄糖;来自BD的BBL植物蛋白胨)中转化和恢复2.5小时后,将细胞与200μg/mlG418(Sigma)一起接种在YEPhD琼脂上。将板在30℃下孵育4天。通过诊断PCR和测序确定正确的整合。用蛋白质上LC/MS证实过度表达。图2中示出了ERG20、tHMG1和BTS1的组装示意图。此菌株被命名为STV002。此菌株中CRE-重组酶的表达导致KanMX标记的外重组。用诊断PCR确定ERG20、tHMG和BTS1的存在和正确外重组。实施例2.Erg9的敲低为了降低Erg9的表达,设计并使用了Erg9敲低构建体,所述构建体含有修饰的3'端,其继续进入驱动TRP1表达的TRP1启动子。将含有Erg9-KD片段的构建体转化到到大肠杆菌TOP10细胞中。将转化体在2PY(2次植物蛋白胨酵母提取物)、sAMP培养基中生长。将质粒DNA用QIAprep旋转小量制备试剂盒(Qiagen)分离并用SalI-HF(NewEnglandBiolabs)消化。为了浓缩,将DNA用乙醇沉淀。将所述片段转化到酿酒酵母中,并将菌落接种在无色氨酸的无机培养基(Verduyn等人,1992.Yeast8:501-517)琼脂板上。通过诊断PCR和测序证实Erg9-KD构建体的正确整合。进行的Erg9-KD构建体的转化的示意图在图3中示出。所述菌株被命名为STV003。实施例3.UGT21a的过度表达对于UGT2_1a的过度表达,使用如专利申请号W02013/076280和WO2013/144257中所描述的技术。将UGT2_1a在DNA2.0作为盒(含有同源序列、启动子、基因、终止子、同源序列)订购。关于细节,参见表3。为了获得含有标记和Cre-重组酶的片段,使用如专利申请号WO2013/135728中所描述的技术。使用赋予对诺尔丝菌素的抗性的NAT标记用于选择。表3:过度表达构建体的组成合适的引物用于扩增。为了扩增整合基因座的5'和3'整合侧翼,使用了来自CEN.PK酵母菌株的合适的引物和基因组DNA。用表4中列出的片段转化酿酒酵母酵母菌株STV003,并将转化混合物接种在含有50μg/ml诺尔丝菌素(来自JenaBioscience的LexyNTC)的YEPhD琼脂板上。表4:用于转化UGT21a的DNA片段片段5’Chr09.01UGT2_1a盒NAT-CRRE3’Chr09.01CRE重组酶的表达通过半乳糖的存在活化。为了诱导CRE重组酶的表达,将转化体在YEPh半乳糖培养基上重新划线。这导致位于lox位点之间的标记的外重组。通过诊断PCR证实了UGT2_1a的正确整合和NAT标记的外重组。所得菌株被命名为STV004。进行的UGT2_1a构建体的转化的示意图在图4中示出。实施例4.RebA的产生途径的过度表达:CPS、KS、KO、KAH、CPR、UGT1、UGT3和UGT4。使用在专利申请号WO2013/076280和WO2013/144257中描述的技术将导致RebA产生的所有途径基因设计为整合在一个基因座中。为了扩增整合基因座的5'和3'整合侧翼,使用了来自CEN.PK酵母菌株的合适的引物和基因组DNA。不同的基因在DNA2.0作为盒(含有同源序列、启动子、基因、终止子、同源序列)订购(参见表5总述)。将来自DNA2.0的DNA溶解至100ng/μl。将此储备溶液进一步稀释至5ng/μl,其中1μl用于50μl-PCR混合物中。所述反应物含有25pmol的每种引物。在扩增后,用NucleoSpin96PCR清洁试剂盒(Macherey-Nagel)纯化DNA,或者使用乙醇沉淀浓缩。表5用于RebA的产生途径的序列将到RebA的途径的所有片段(标记和侧翼)(参见表6总述)转化到酿酒酵母菌株STV004中。在20℃下在YEPhD中过夜恢复后,将转化混合物接种在含有200μg/mlG418的YEPhD琼脂上。将这些在25℃下孵育3天,并在室温下孵育一夜。表6.用于转化CPS、KS、KO、KanMX、KAH、CPR、UGT1、UGT3和UGT4的DNA片段片段5’INT1CPS盒KS盒KO盒KanMX盒KAH盒CPR盒UGT1盒UGT3盒UGT4盒3’INT1通过诊断PCR和序列分析(3500基因分析仪,AppliedBiosystems)证实了正确的整合。序列反应用BigDye终止子v3.1循环测序试剂盒(LifeTechnologies)进行。每个反应(10μl)均含有50ng模板和3.2pmol引物。将产物通过乙醇/EDTA沉淀纯化,溶解在10μlHiDi甲酰胺中并施加到装置上。所述菌株被命名为STV006。从GGPP到RebA的途径如何整合到基因组中的示意图在图5中示出。表7列出了实施例1至5中使用的菌株。表7.菌株列表实施例5.STV006的KanMX选择标记的去除为了去除菌株中存在的KanMX标记,将含有CRE重组酶的质粒pSH65(图6)转化到STV006中。首先在含有20μg/ml腐草霉素(Invitrogen)的YEPD上选择转化体,然后在YEP半乳糖培养基上重新划线以诱导CRE重组酶表达。通过诊断PCR确定标记的正确外重组。在产生实验中证实了此无标记物菌株的RebA产生。STV006的无标记形式被称为STV008。实施例6.通过NAT选择标记去除STV008中的UGT21a为了去除位于STV008的Chr09.01基因座处的UGT2_1a,使用含有与Chr09.01整合侧翼(图8)同源的额外50nt序列的引物,从质粒pUG7-NAT(图7)扩增了诺尔丝菌素选择(NAT)标记和周围的lox位点。将PCR产物用NucleoSpin凝胶和PCR清洁试剂盒(Macherey-Nagel)纯化,并转化到STV008中。在含有50μg/ml诺尔丝菌素(来自JenaBioscience的LexyNTC)的YEPD上选择转化体。通过诊断PCR证实了NAT标记的正确整合和UGT2_1a的不存在。这种新的菌株被命名为STV009。实施例7.STV009的Nat选择标记的去除为了能够使用相同的整合基因座来测试UGT2变体,必须从菌株STV009中去除NAT标记(图9)。因此,将位于质粒pSH65上的CRE重组酶转化到STV009中,并在含有20μg/ml腐草霉素的YEPD上选择转化体。将菌落在YEP半乳糖琼脂板上重新划线。将板在30℃下孵育。通过诊断PCR证实通过CRE重组酶去除NAT标记。在产生实验中,显示STV009ΔNAT菌株与其亲本STV009积累相同量的甜茶苷。所述新的菌株被称为STV053。实施例8.Chr09.01基因座处UGT2基因变体的整合将编码UGT2活性的不同基因变体(SEQIDNO:4、7、10、12、15、18、21、23和28)通过使用用于重组的含有50bp侧翼同源区段的若干单独的DNA片段单独地整合到Chr09.01基因座中(图10)。用来自CEN.PK酵母菌株(vanDijken等.EnzymeandMicrobialTechnology26(2000)706-714)的基因组DNA的合适引物扩增5'-和3'-Chr09.01整合侧翼。对于5'-侧翼而言,反向引物含有与待使用的启动子序列同源的延伸的50bp序列,即ScENO1启动子(SEQIDNO:60)。3'-侧翼的正向引物含有50bp接头延伸。从pUG7-EcoRV构建体扩增KanMX选择标记。正向引物含有与KIGAP1(SEQIDNO:61)终止子同源的另外50bp序列。反向引物也具有50bp接头延伸。不同的UGT2基因变体在SGI-DNA订购。它们的开放阅读框的上游侧接50bp的pScENO1启动子(SEQIDNO:60),以及下游侧接50bp的Klgap1T终止子(SEQIDNO:61)。通过使用与这些启动子和终止子序列退火的引物,从SGI-DNA构建体扩增了基因。使用NucleoSpin96PCR清洁试剂盒(Macherey-Nagel)纯化PCR产物。对于待测试的每种UGT2变体,组合了等摩尔量的5'-Chr09.01侧翼、ENO1启动子、UGT2基因、KIGAP1终止子、KanMX选择标记和3'-Chr09.01侧翼。制备含有UGT2_1a的一种另外的混合物。将这些混合物转化到STV053中并接种在含有200μg/mlG418的YEPD上。对于每种UGT2变体而言,在产生实验中测试了若干重复转化体。实施例9.用酿酒酵母产生莱鲍迪甙A将预培养物与来自YEPD琼脂的菌落物质一起接种。将预培养物在具有葡萄糖作为碳源的200μl无机培养基中生长。将预培养物在27℃、750rpm和80%湿度的Infors孵育箱中孵育72小时。使用40μl预培养物来接种具有葡萄糖作为碳源的2.5ml无机培养基。将主要培养物在27℃、550rpm、80%湿度下在Infors孵育箱中孵育120小时。通过来回移液将培养物良好均化,并将1ml培养物转移到96孔板中。将96孔板在95℃下在水浴中孵育15分钟并冷却至室温。向每个孔中添加0.5ml乙腈,并通过来回移液均化。通过在3000xg下离心10分钟来使细胞碎片沉淀。将上清液在33%乙腈中稀释200倍。使用LC/MS分析样品的RebA。使用RebA(RV0141-94,DAEPyungCo.Ltd.)作为标准。发现与含有UGT2_1a的菌株相比,如所描述的具有特定UGT2基因变体的菌株产生更高的RebA滴度,如表8和图11中所示。表8:表达UGT2变体酶的酵母属菌株中的莱鲍迪甙A产生UGT2变体RebA(mg/L)UGT2_1b30,8UGT2_2b38,4UGT2_3b40,6UGT2_4b26,5UGT2_5b41,8UGT2_6b28,1UGT2_7b33,3UGT2_8b25,2UGT2_9b26,7UGT2_1a25,0实施例10:用酿酒酵母产生莱鲍迪甙M将预培养物与来自YEPD琼脂的菌落物质一起接种。将预培养物在具有葡萄糖作为碳源的200μl无机培养基中生长。将预培养物在27℃、750rpm和80%湿度的Infors孵育箱中孵育72小时。使用40μl预培养物来接种具有葡萄糖作为碳源的2.5ml无机培养基。将主要培养物在27℃、550rpm、80%湿度下在Infors孵育箱中孵育120小时。通过来回移液将培养物良好均化,并将1ml培养物转移到96孔板中。将96孔板在95℃下在水浴中孵育15分钟并冷却至室温。向每个孔中添加0.5ml乙腈,并通过来回移液均化。通过在3000xg下离心10分钟来使细胞碎片沉淀。将上清液在33%乙腈中稀释200倍。通过用配备有AcellaLC和WatersAcquityUPLCBEH酰胺1.7μm2.1*150mm柱的LTQ轨道阱(Thermo)分析的LC和MS来确认RebM的存在。用于分离的洗脱液是A:10mM于MilliQ水中的乙酸铵,B:乙腈,并且梯度以65%A开始,并且将此保持1.5分钟,然后在0.5分钟内增加至95%B,并将此保持0.5分钟,之后在65%A下再生1.5分钟。流速是0.6ml/分钟,并且柱温保持在50C。以电喷雾负电离模式进行质谱分析,从m/z100-1800以7500的分辨率进行扫描。RebM在tr=0.72分钟时洗脱,刚好在tr=0.63时的rebD之后。RebM的特征在于m/z1289.5286的去质子化分子。能使用精确的质量分析来估计元素组成。发现与含有UGT2_1a的菌株相比,如所描述的具有特定UGT2基因变体的菌株产生更高的RebM滴度,如图12和表9中所示。表9.相较于UGT21a的百分比,表达UGT2变体酶的酵母属菌株中的莱鲍迪甙M产生UGT2变体RebM(相对于UGT2_1a)UGT2_7b555UGT2_9b256UGT2_1a100实施例11:甜菊醇糖苷产生菌株ML14094(MAT-A谱系)的描述将接合型MATA和MATB的两种解脂耶氏酵母菌株工程化以用于甜菊醇糖苷的产生。将这些菌株接合,二倍体孢子形成,并选择具有甜菊醇糖苷产生的孢子。将这些孢子中的一个进一步开发用于产生甜菊醇糖苷,包括产生莱鲍迪甙A。步骤1:用5个限定的DNA片段转化菌株ML10371(MAT-A、lys1-、ura3-、leu2-)。所有转化通过乙酸锂/PEG真菌转化方案方法进行,并在适当的基本培养基YPD+100μg/ml诺尔丝菌素或YPD+100μg/ml潮霉素上选择转化体。1)在质粒MB6969(图13)的HindIII/NotI消化后通过凝胶纯化分离的7.0kbDNA片段。此构建体编码用于过度表达连接至一起侧接lox位点(Guldener等人,1996,Lambert等人,2007)的pPGM启动子(SEQIDNO:62)和xprT终止子(SEQIDNO:69)以及HPH潮霉素抗性基因的UGT2_1a(SEQIDNO:29)的合成构建体,以及用于过度表达缺乏连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的5'膜锚定序列(tHMGopt:SEQIDNO:75)的密码子优化的解脂耶氏酵母羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶开放阅读框的合成构建体。2)在MB6856(图14)的HindIII/SspI消化后通过凝胶纯化分离的2.7kbDNA片段。此构建体编码连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的tHMGopt(SEQIDNO:75)。3)在MB6857(图15)的SspI消化后通过凝胶纯化分离的2.5kbDNA片段。此构建体编码连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的tHMGopt(SEQIDNO:75)。4)在MB6948(图16)的SspI消化后通过凝胶纯化分离的2.0kbDNA片段。此构建体编码用于过度表达连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的密码子优化的解脂耶氏酵母香叶基-香叶基-焦磷酸合成酶(GGSopt:SEQIDNO:76)的合成构建体。5)在MB6958(图17)的HindIII/SspI消化后通过凝胶纯化分离的2.2kbDNA片段。此构建体编码连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的GGSopt(SEQIDNO:76)。所得菌株被指定为ML13462。步骤2.用在质粒MB7015(图18)的SfiI消化后通过凝胶纯化分离的9.7kb片段转化菌株ML13462。此构建体编码用于过度表达连接至pENO(SEQIDNO:65)启动子和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的UGT1(SEQIDNO:77),连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和pgmT终止子(SEQIDNO:72)的UGT3(SEQIDNO:78),连接至pCWP(SEQNO:66)启动子和pgkT终止子(SEQIDNO:73)的UGT4(SEQIDNO:79),以及lox-侧接的诺尔丝菌素抗性标记(NAT)的合成构建体。注意,lox位点的放置允许随后通过CRE重组酶介导的重组去除诺尔丝菌素抗性。诺尔丝菌素抗性分离株被指定为ML13500。步骤3.用在质粒MB6986(图19)的PvuI/SapI消化后通过凝胶纯化分离的9.1kb片段转化菌株ML13500。此构建体编码连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的tHMGopt(SEQIDNO:75)、lox侧接的URA3冲击(URA3blaster)原养型标记以及连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的GGSopt(SEQIDNO:76)。在缺乏尿嘧啶的基本培养基上选择转化体。一种选择的尿嘧啶原养型被指定为ML13723。步骤4.用在质粒MB7059(图20)的SfiI消化后通过凝胶纯化分离的18.1kb片段转化菌株ML13723。MB7059编码连接至pCWP启动子(SEQIDNO:66)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的tCPS_SR(SEQIDNO:80),连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的tKS_SR(SEQIDNO:81),连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和pgmT终止子(SEQIDNO:72)的KAH_4(SEQIDNO:92),连接至pTPI启动子(SEQIDNO:67)和pgkT终止子(SEQIDNO:73)的KO_Gib(SEQIDNO:83),连接至pENO启动子(SEQIDNO:65)和xprT终止子(SEQIDNO:69)的CPR_3(SEQIDNO:84),以及天然解脂耶氏酵母LEU2基因座。一种选择的莱鲍迪甙A产生转化体被指定为ML14032。步骤5.将菌株ML14032划线至YPD并生长过夜,然后划线至5-FOA板,以允许在步骤3中引入的URA3标记的重组介导的丧失。一种选择的5-FOA抗性转化体被指定为ML14093。步骤6.用在质粒MB7100(图21)的SfiI消化后通过凝胶纯化分离的19.0kb片段转化菌株ML14093。MB7100编码连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的tCPS_SR(SEQIDNO:80),连接至pCWP启动子(SEQIDNO:66)和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的tKS_SR(SEQIDNO:81),连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和pgmT终止子(SEQIDNO:72)的KAH_4(SEQIDNO:82),连接至pENO启动子(SEQIDNO:65)和pgkT终止子(SEQIDNO:73)的KO_Gib(SEQIDNO:83),连接至pTPI启动子(SEQIDNO:67)和xprT终止子(SEQIDNO:69)的CPR_3(SEQIDNO:84),以及URA3冲击原养型标记。在缺乏尿嘧啶的基本培养基上选择转化体。一种选择的莱鲍迪甙A产生尿嘧啶原养型被指定为ML14094。实施例12.甜菊醇糖苷产生菌株ML14087(MAT-B谱系)的描述:步骤1.用5个限定的DNA片段转化菌株ML13206(MAT-B、ade1-、ure2-、leu2-)。所有转化通过乙酸锂/PEG真菌转化方案方法进行,并在适当的基本培养基YPD+100μg/ml诺尔丝菌素或YPD+100μg/ml潮霉素上选择转化体。1)在质粒MB6969(图13)的HindIII/NotI消化后通过凝胶纯化分离的7.0kbDNA片段。此构建体编码用于过度表达连接至一起侧接lox位点(Guldener等人,1996,Lambert等人,2007)的pPGM(SEQIDNO:62)启动子和xprT终止子(SEQIDNO:69)以及HPH潮霉素抗性基因的UGT2_1a(SEQIDNO:29)的密码子对优化的(CpO)ORF的合成构建体,以及用于过度表达缺乏连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的5'膜锚定序列(tHMGopt:SEQIDNO:75)的密码子优化的解脂耶氏酵母羟甲基戊二酰基-辅酶A还原酶开放阅读框的合成构建体。2)在MB6856(图14)的HindIII/SspI消化后通过凝胶纯化分离的2.7kbDNA片段。此构建体编码连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的tHMGopt(SEQIDNO:75)。3)在MB6857(图15)的SspI消化后通过凝胶纯化分离的2.5kbDNA片段。此构建体编码连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的tHMGopt(SEQIDNO:75)。4)在MB6948的SspI消化后通过凝胶纯化分离的2.0kbDNA片段(图16)。此构建体编码用于过度表达连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的密码子优化的解脂耶氏酵母香叶基-香叶基-焦磷酸合成酶(GGSopt:SEQIDNO:76)的合成构建体。5)在MB6958(图17)的HindIII/SspI消化后通过凝胶纯化分离的2.2kbDNA片段。此构建体编码连接至pHYPO(SEQIDNO:64)启动子和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的GGSopt(SEQIDNO:76)。所得菌株被指定为ML13465。步骤2.用2个限定的DNA片段转化菌株ML13465:1).在质粒MB7015(图18)的SfiI消化后通过凝胶纯化分离的9.7kb片段。此构建体编码用于过度表达连接至pENO启动子(SEQIdNO:65)和gpdT(SEQIDNO:71)终止子的UGT1(SEQIDNO:77),连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和pgmT终止子(SEQIDNO:72)的UGT3(SEQIDNO:78),连接至pCWP启动子(SEQNO:66)和pgkT终止子(SEQIDNO:73)的UGT4(SEQIDNO:79),以及lox-侧接的诺尔丝菌素抗性标记(NAT)的合成构建体。注意,lox位点的放置允许随后通过CRE重组酶介导的重组去除诺尔丝菌素抗性。2).在质粒MB6988(图22)的PvuI/SapI消化后通过凝胶纯化分离的9.1kb片段。此构建体编码连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的tHMGopt(SEQIDNO:75)、lox侧接的URA2冲击原养型标记以及连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的GGSopt(SEQIDNO:76)。在YPD+100μg/ml诺尔丝菌素上选择菌株,并将复制物接种到缺乏尿嘧啶的基本培养基上。一种诺尔丝菌素抗性尿嘧啶原养型分离株被指定为ML13490步骤3.将菌株ML13490划线至YPD并生长过夜,然后划线至5-FOA板,以允许在以上步骤3中引入的URA2标记的重组介导的丧失。一种选择的5-FOA抗性转化体被指定为ML13501。步骤4.用在质粒MB6988(图22)的PvuI/SapI消化后通过凝胶纯化分离的9.1kb片段转化菌株ML13501。在缺乏尿嘧啶的基本培养基上选择转化体。一种选择的尿嘧啶原养型微生物被指定为ML13724。步骤5.用在质粒MB7044(图23)的SfiI消化后通过凝胶纯化分离的18.1kb片段转化菌株ML13724。MB7044编码连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的tCPS_SR(SEQIDNO:80),连接至pCWP启动子(SEQIDNO:66)和gpdT终止子(SEQIDNO:70)的tKS_SR(SEQIDNO:81),连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和pgmT终止子(SEQIDNO:72)的KAH_4(SEQIDNO:82),连接至pENO启动子(SEQIDNO:65)和pgkT终止子(SEQIDNO:73)的KO_Gib(SEQIDNO:83),连接至pTPI启动子(SEQIDNO:67)和xprT终止子(SEQIDNO:69)的CPR_3(SEQIDNO:84)以及LEU2基因座。一种选择的莱鲍迪甙A产生转化体被指定为ML14044。步骤6.将菌株ML14044划线至YPD并生长过夜,且然后划线至5-FOA板,以允许在以上步骤4中引入的URA2标记的重组介导的损失。一种选择的5’-FOA抗性转化体被指定为ML14076。步骤7.用在质粒MB7094(图24)的SfiI消化后通过凝胶纯化分离的19.0kb片段转化菌株ML14076。MB7094编码连接至pHYPO启动子(SEQIDNO:64)和cwpT终止子(SEQIDNO:70)的tCPS_SR(SEQIDNO:80),连接至pCWP启动子(SEQIDNO:66)和gpdT终止子(SEQIDNO:71)的tKS_SR(SEQIDNO:81),连接至pHSP启动子(SEQIDNO:63)和pgmT终止子(SEQIDNO:72)的KAH_4(SEQIDNO:82),连接至pENO启动子(SEQIDNO:65)和pgkT终止子(SEQIDNO:73)的KO_Gib(SEQIDNO:83),连接至pTPI启动子(SEQIDNO:67)和xprT终止子(SEQIDNO:69)的CPR_3(SEQIDNO:84)以及URA2冲击原养型标记。在缺乏尿嘧啶的基本培养基上选择转化体。一种选择的莱鲍迪甙A产生尿嘧啶原养型被指定为ML14087。实施例13.接合MATA和MATB谱系并选择甜菊醇糖苷产生子代允许具有互补营养缺陷(ADE1+lys1-和ade1-LYS1+)的相对接合型(ML14094和ML14087)的菌株接合,然后接种在仅允许二倍体生长的选择性培养基(缺乏腺嘌呤和赖氨酸的基本培养基)上。然后诱导二倍体细胞(ML14143)通过饥饿进行减数分裂和孢子形成,并将所得的单倍体子代复制接种以鉴定具有潮霉素和诺尔丝菌素抗性的原养型分离株。一种选择的莱鲍迪甙A产生菌株被指定为ML14737实施例14.使菌株不含UGT21a在用MB6128(图25)转化后从菌株ML14737去除潮霉素抗生素标记和诺尔丝菌素抗生素标记,所述MB6128编码用于组成型过度表达CRE重组酶的构建体。CRE重组酶通过在Lox66和Lox71位点上的重组而缺失抗生素标记。非活性Lox72位点留在基因组中(Guldener等人,1996,Lambert等人,2007)。质粒MB6128是一种CEN质粒,其在解脂耶氏酵母中以附加体的形式复制并且其含有在天然解脂耶氏酵母pHHF启动子和hhfT终止子控制下的CRE重组酶编码区以及在天然解脂耶氏酵母pTEF1启动子和xprT终止子控制下的neoR(编码G418抗性)。在YPD+G418上选择MB6128转化体并通过成功的Cre-Lox重组筛选丧失潮霉素和诺尔丝菌素抗性的转化体后,将敏感菌落生长在非选择性培养基上以去除MB6128CEN质粒(CEN质粒自发丧失)。所得到的不含抗生素标记的变体被指定为ML14869。由于UGT2_1a连同潮霉素抗性的丧失,此菌株不再产生莱鲍迪甙A,而是产生中间体甜茶苷。实施例15.UGT2基因的转化将UGT2基因变体和作为对照的UGT2_1a放置在解脂耶氏酵母pHSP启动子(SEQIDNO:63)后面,并与解脂耶氏酵母终止子gpdT(SEQIDNO:71)组合。与UGT1(SEQIDNO:77)、KAH_4(SEQIDNO:82)、lox-侧接的G418抗性标记(KanMX)和解脂耶氏酵母GSY1整合侧翼一起,将每个UGT2在酿酒酵母中组装到CEN质粒p417[5-3]上的构建体中(参见图26)。表10.在构建具有UGT2变体的菌株中使用的启动子、ORF和终止子将这些构建体(对于每个UGT2为一个)用作PCR中的模板以扩增5'-部分和3'-部分(参见图27)。这个5'部分由3'-GSY1整合侧翼的开始与KanMX开放阅读框的结束之间的一切组成。3'-部分由KanMX开放阅读框的第二个密码子与5'-GSY1整合侧翼的结束之间的一切组成。对于UGT2测试而言,将每个5'-部分和3'-部分组合转化到菌株ML14869中。在含有G418的YPD培养基上选择转化体。从每个转化中选择12个菌落用于产生实验。实施例16.用解脂耶氏酵母产生RebA将预培养物与来自YEPh-D琼脂的菌落物质一起接种。将预培养物在具有葡萄糖作为碳源的200μlYEP中生长。将预培养物在27℃、750rpm和80%湿度的Infors孵育箱中孵育72小时。使用40μl预培养物来接种具有葡萄糖作为碳源的2.5mlYEP。将主要培养物在27℃、550rpm、80%湿度下在Infors孵育箱中孵育120小时。在120小时后,将主培养物以2750rpm离心10分钟。从上清液中取出100μl,并在55%乙腈中稀释2.5倍。在33%乙腈中进一步稀释。结果在图28和表11中示出。可以看出,表达变体UGT2的菌株产生更高的RebA滴度。表11:表达UGT2变体酶的耶氏酵母属菌株中的莱鲍迪甙A的产生样品RebA(mg/L)UGT2_2b254UGT2_3b396UGT2_5b422UGT2_9b246UGT2_10b249UGT2_1a198实施例17.用解脂耶氏酵母产生RebM将预培养物与来自YEPh-D琼脂的菌落物质一起接种。将预培养物在具有葡萄糖作为碳源的200μlYEP中生长。将预培养物在27℃、750rpm和80%湿度的Infors孵育箱中孵育72小时。使用40μl预培养物来接种具有葡萄糖作为碳源的2.5mlYEP。将主要培养物在27℃、550rpm、80%湿度下在Infors孵育箱中孵育120小时。在120小时后,将主培养物以2750rpm离心10分钟。从上清液中取出100μl,并在55%乙腈中稀释2.5倍。在33%乙腈中进一步稀释。结果在图29和表12中示出。可以看出,表达变体UGT2的菌株产生更高的RebM滴度。表12:表达UGT2变体酶的耶氏酵母属菌株中的莱鲍迪甙M的产生样品RebM(mg/L)UGT2_7b37,5UGT2_1a23,3实施例18:为了评估UGT2的不同变体对生物反应器中甜菊醇糖苷产生的影响,选择了实施例15中描述的菌株中的两种。一个菌株表达UGT2_6b,另一菌株表达UGT2_7b。应用的发酵方案是补料分批发酵,并且每日采集全发酵液样品以用于使用LC/MS分析甜菊醇糖苷。如可在图30中看出的,与表达UGT2_7b的菌株相比,表达UGT2_6b的菌株产生更多的RebA。然而,与表达UGT2_6b的菌株相比,表达UGT2_7b的菌株产生显著更多的RebM。两种菌株均产生比RebM更多的RebA。在发酵结束时,在表达UGT2_6b的菌株的情况下,RebA浓度为RebM浓度的20倍,而在表达UGT2_7b的菌株中,RebA浓度为RebM浓度的4倍。不同的产物比率反映了UGT2性质的内在差异,其中与UGT2_6b相比,UGT2_7b在19位上具有更高的葡萄糖糖基化活性。将分别来自甜菊苷和RebA的19位上的糖基化反应的产物如RebE和RebD通过UGT4的活性进一步转化为RebM,参见图32。这说明通过使用在此描述的UGT2的不同变体,生产能够被有效地导向目标产物。表13:序列表的描述序列表<110>帝斯曼知识产权资产管理有限公司<120>UDP-糖基转移酶<130>30995-WO-PCT<150>US62/133606<151>2015-03-16<160>84<170>SIPOSequenceListing1.0<210>1<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_1b变体<400>1MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGln202530LeuAlaLysLeuIleAlaGluLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrArgAsnIleGlnArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnPheValLysLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LeuAlaSerAspGlyLeuGlnGluProLeuThrArgPheLeuGluSer100105110SerSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125GluIleAlaAlaSerLeuGlyValAlaArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaLeuAlaPheMetGlyProSerAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspGlyArgThrGluValGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpIleProPheProThrThrValAlaTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValLeuLysGlyCysAspCysLeuLeuSerArgThrTyr210215220HisGluPheGlyThrGlnTrpLeuProLeuLeuGluGluLeuHisGln225230235240ValProValValProValGlyLeuLeuProProSerIleProGlyAsp245250255GluLysAspGluAsnTrpValSerIleLysAspTrpLeuAspLysGln260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuLeu275280285ThrGluGluGluValValGluLeuAlaLeuGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPhePheTrpAlaTyrArgLysProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheValGluArgThrArgAspArg325330335GlyLeuValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValGlyGlyPheValThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAsnGluGluAspGlyCysLeuThrLysGluSerVal405410415AlaGluSerLeuArgLeuValValValGluLysGluGlyGluIleTyr420425430ArgGluLysAlaArgGluMetSerLysValTyrSerAspThrLysArg435440445GluLysGluTyrValAspGlnPheValAspTyrLeuGluLysAsnAla450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>2<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_1bCpO用于酿酒酵母<400>2atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagaagttgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttgcaattggctaaattgattgctgaaaag120ggtcacaaagtctctttcttgtccaccaccagaaacatccaaagattatcttctcacatt180tctccattgatcaacttcgtcaagttgactttaccaagagttcaagaattgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagttggcttctgat300ggtttgcaagaaccattgactagattcttggaatcttcttctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccagaaattgctgcctctttgggtgttgctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctttggctttcatgggtccatctgctgatgctatgatc480aacggttctgatggtagaaccgaagtcgaagacttcaccgttccaccaaaatggatccca540ttcccaaccactgtcgcttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcttgaagggttgtgactgtttgttg660tccagaacttaccatgaattcggtactcaatggttacctttgttggaagaattgcaccaa720gtcccagttgttccagttggtttgttgcctccttctatcccaggtgacgaaaaggacgaa780aactgggtttccatcaaggactggttagataagcaagaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttgttgactgaagaagaagttgttgaattggctttgggtttg900gaattgtccggtctaccatttttctgggcttacagaaagccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgtcgaaagaaccagagacagaggtttggtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgttggtggtttcgttacc1080cactgtggttctggttccattgtcgaaggtttgatgttcggtcacccattgatcatgttg1140ccaatcttcggtgaccaaccattgaacgctagattattggaagacaagcaagtcggtatt1200gaaatcccaagaaacgaagaagacggttgtttgaccaaggaatctgttgccgaatctcta1260agattggttgttgtcgaaaaggaaggtgaaatctacagagaaaaggctagagaaatgtcc1320aaggtttactctgataccaagagagaaaaggaatatgtcgaccaatttgttgactacttg1380gaaaagaacgctcgtgccgttgccattgaccacgaaagc1419<210>3<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_2b变体<400>3MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGln202530LeuAlaLysLeuIleAlaGluLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrArgAsnIleGlnArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnPheValLysLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrGluPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125SerIleAlaThrLysHisGlyValSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrMetGlyProThrAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspGlyArgThrThrProGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpPheProPheProThrLysValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValLeuLysGlyCysAspCysLeuLeuSerArgThrTyr210215220HisGluPheGlyThrGlnTrpLeuProLeuLeuGluGluLeuHisGln225230235240ValProValValProValGlyLeuLeuProProSerIleProGlyAsp245250255GluLysAspGluAsnTrpValSerIleLysAspTrpLeuAspLysGln260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuLeu275280285ThrGluGluGluValValGluLeuAlaLeuGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPhePheTrpAlaTyrArgLysProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheValGluArgThrArgAspArg325330335GlyLeuValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValGlyGlyPheValThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleGlnArgAsnGluGluAspGlyCysLeuThrLysGluSerVal405410415AlaGluSerLeuArgLeuValValValGluLysGluGlyGluIleTyr420425430ArgGluLysAlaArgGluMetSerLysValTyrSerAspThrLysArg435440445GluLysGluTyrValAspGlnPheValAspTyrLeuGluLysAsnAla450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>4<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_2bCpO用于酿酒酵母<400>4atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagaagttgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttgcaattggctaaattgattgctgaaaag120ggtcacaaagtctctttcttgtccaccaccagaaacatccaaagattatcttctcacatt180tctccattgatcaacttcgtcaagttgactttaccaagagttcaagaattgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagaaggcttctgat300ggtttgcaaccagaagtcactgaattcttggaacaacactctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccatccattgctactaagcacggtgtttctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctattgcttacatgggtccaactgctgatgctatgatc480aacggttctgatggtagaaccactccagaagacttcaccgttccaccaaaatggttccca540ttcccaaccaaggtctgttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcttgaagggttgtgactgtttgttg660tccagaacttaccatgaattcggtactcaatggttacctttgttggaagaattgcaccaa720gtcccagttgttccagttggtttgttgcctccttctatcccaggtgacgaaaaggacgaa780aactgggtttccatcaaggactggttagataagcaagaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttgttgactgaagaagaagttgttgaattggctttgggtttg900gaattgtccggtctaccatttttctgggcttacagaaagccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgtcgaaagaaccagagacagaggtttggtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgttggtggtttcgttacc1080cactgtggttctggttccattgtcgaaggtttgatgttcggtcacccattgatcatgttg1140ccaatcttcggtgaccaaccattgaacgctagattattggaagacaagcaagtcggtatt1200gaaatccaaagaaacgaagaagacggttgtttgaccaaggaatctgttgccgaatctcta1260agattggttgttgtcgaaaaggaaggtgaaatctacagagaaaaggctagagaaatgtcc1320aaggtttactctgataccaagagagaaaaggaatatgtcgaccaatttgttgactacttg1380gaaaagaacgctcgtgccgttgccattgaccacgaaagc1419<210>5<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_2bCpO用于解脂耶氏酵母<400>5atggccacctccgactccattgtcgacgaccgaaagaagctccacattgtcatgttcccc60tggctcgcctttggccacatcattccctacctccagctcgccaagctcattgctgagaag120ggccacaaggtttctttcctctccaccacccgaaacatccagcgactctcttcccacatc180tctcccctcatcaactttgtcaagctcaccctcccccgagtccaggagcttcccgaggat240gctgaggccaccactgatgtccaccccgaggacatcccctacctcaagaaggcttccgac300ggtctgcagcccgaggtcactgagtttctcgagcagcactctcccgactggatcatctac360gactacacccactactggctcccctccattgccaccaagcacggtgtctctcgagcccac420ttctccgtcaccaccccctgggccattgcttacatgggtcccactgccgatgccatgatc480aacggttccgacggccgaaccactcccgaggacttcactgtccctcccaagtggttcccc540ttccccaccaaggtctgctggcgaaagcacgatctcgcccgactcgtcccctacaaggcc600cccggtatctccgacggttaccgaatgggtctggtcctcaagggctgtgactgcctcctc660tctcgaacctaccacgagttcggcacccagtggctccccctccttgaggagctgcaccag720gtccccgttgtccccgtcggtctgctccctccctccatccccggtgacgagaaggacgag780aactgggtttccatcaaggactggctcgacaagcaggagaagggctctgttgtctacgtt840gctctcggctccgaggttctgctcaccgaggaagaggttgttgagctggctctcggtctg900gagctgtccggcctccccttcttctgggcctaccgaaagcccaagggccccgccaagtcc960gactccgtcgagctgcccgacggtttcgtcgagcgaacccgagatcgaggtctggtctgg1020acctcttgggctccccagctccgaatcctctcccacgagtccgttggtggtttcgtcacc1080cactgcggttccggctccatcgtcgagggtctgatgttcggccaccctctcatcatgctc1140cccatcttcggtgaccagcccctcaacgcccgactgctcgaggataagcaggtcggtatc1200gagatccagcgaaacgaagaggacggctgtctgaccaaggagtccgtcgccgagtctctc1260cgactcgttgttgtcgagaaagagggtgagatctaccgagagaaggcccgagagatgtcc1320aaggtctactccgacaccaagcgtgagaaggagtacgtcgaccagttcgtcgactacctc1380gagaagaacgcccgagctgttgccattgaccacgagtct1419<210>6<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_3b变体<400>6MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGln202530LeuAlaLysLeuIleAlaGluLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrArgAsnIleGlnArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnPheValLysLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrGluPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125SerIleAlaThrLysHisGlyValSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrMetGlyProThrAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspGlyArgThrThrProGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpPheProPheProThrLysValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValLeuLysGlySerAspLeuLeuLeuSerArgSerTyr210215220HisGluPheGlyThrGluTrpLeuArgLeuLeuGluThrLeuHisArg225230235240ValProValValProValGlyLeuLeuProProGluIleProGlyAsp245250255GlyGluAspGluSerTrpValSerIleLysAspTrpLeuAspLysLys260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuVal275280285SerGlnGluGluLeuAsnGluLeuAlaLeuGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPheValTrpAlaTyrArgLysProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheGluGluArgThrArgGlyArg325330335GlyValValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValAlaGlyPheLeuThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProLeuPheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAspGluGluAspGlyCysLeuThrLysGluSerVal405410415AlaArgSerLeuArgLeuValMetValGluLysGluGlyGluIleTyr420425430ArgGluLysAlaArgGluMetSerLysIleTyrAsnAsnThrGluVal435440445GluAspGlnTyrValSerGlnPheValGluTyrLeuGluLysAsnAla450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>7<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_3bCpO用于酿酒酵母<400>7atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagaagttgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttgcaattggctaaattgattgctgaaaag120ggtcacaaagtctctttcttgtccaccaccagaaacatccaaagattatcttctcacatt180tctccattgatcaacttcgtcaagttgactttaccaagagttcaagaattgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagaaggcttctgat300ggtttgcaaccagaagtcactgaattcttggaacaacactctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccatccattgctactaagcacggtgtttctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctattgcttacatgggtccaactgctgatgctatgatc480aacggttctgatggtagaaccactccagaagacttcaccgttccaccaaaatggttccca540ttcccaaccaaggtctgttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcttgaagggttctgacttgttgttg660tccagatcttaccatgaattcggtactgaatggttaagattgttggaaactttgcacaga720gtcccagttgttccagttggtttgttgcctcctgaaatcccaggtgacggtgaagacgaa780tcttgggtttccatcaaggactggttagataagaaggaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttggtttctcaagaagaattgaacgaattggctttgggtttg900gaattgtccggtctaccatttgtctgggcttacagaaagccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgaagaaagaaccagaggtagaggtgttgtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgttgctggtttcttgacc1080cactgtggttctggttccattgtcgaaggtttgatgttcggtcacccattgatcatgttg1140ccattgttcggtgaccaaccattgaacgctagattattggaagacaagcaagtcggtatt1200gaaatcccaagagatgaagaagacggttgtttgaccaaggaatctgttgcccgttctcta1260agattggttatggtcgaaaaggaaggtgaaatctacagagaaaaggctagagaaatgtcc1320aagatctacaacaacaccgaagtcgaagaccaatatgtctcccaatttgttgaatacttg1380gaaaagaacgctcgtgccgttgccattgaccacgaaagc1419<210>8<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_3bCpO用于解脂耶氏酵母<400>8atggccacctccgactccattgtcgacgaccgaaagaagctccacattgtcatgttcccc60tggctcgcctttggccacatcatcccttacctccagctcgccaagctcattgctgagaag120ggccacaaggtttccttcctctccaccacccgaaacatccagcgactctcctcccacatc180tctcctctcatcaactttgtcaagctcaccctcccccgagtccaggagctgcccgaggat240gctgaggccaccaccgatgtccaccccgaggacatcccctacctcaagaaggcctccgat300ggcctccagcccgaggtcaccgagttcctcgagcagcactctcccgactggatcatctac360gactacacccactactggctcccctccattgccaccaagcacggtgtctctcgagcccac420ttctccgtcaccaccccctgggccattgcctacatgggtcccactgctgacgccatgatc480aacggttccgacggccgaaccactcccgaggacttcactgtccctcccaagtggttcccc540ttccccaccaaggtctgctggcgaaagcacgacctcgcccgactcgtcccctacaaggct600cccggtatctccgacggctaccgaatgggtctggtcctcaagggctctgatctcctcctc660tctcgatcttaccacgagttcggcaccgagtggctccgactgctcgagactctccaccga720gtccccgttgtccccgtcggtctgctccctcccgagatccccggtgacggtgaggacgag780tcttgggtttccatcaaggactggctcgacaagaaggagaagggctccgttgtctacgtt840gctctcggttccgaggttcttgtctcccaagaggagcttaacgagctggctctcggtctg900gagctgtccggtctgccctttgtctgggcctaccgaaagcccaagggccccgccaagtcc960gactccgtcgagcttcccgacggtttcgaggagcgaacccgaggccgaggtgttgtctgg1020acctcttgggctccccagctccgaatcctctcccacgagtccgtcgccggtttcctcacc1080cactgcggttccggctccattgttgagggtctgatgttcggccaccccctcatcatgctc1140cccctcttcggtgaccagcccctcaacgcccgacttctcgaggacaagcaggtcggtatt1200gagatcccccgagatgaagaggacggctgtctgaccaaggagtctgttgcccgatctctg1260cgactcgtcatggtcgagaaggaaggtgagatctaccgagagaaggcccgagagatgtcc1320aagatctacaacaacaccgaggtcgaggaccagtacgtttcccagttcgtcgagtacctt1380gagaagaacgcccgagctgttgccattgaccacgaatca1419<210>9<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_4b变体<400>9MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGlu202530LeuSerLysLeuIleAlaGlnLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrLysAsnIleAspArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnValValGlnLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LeuAlaSerAspGlyLeuGlnGluProLeuThrArgPheLeuGluSer100105110SerSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125GluIleAlaAlaSerLeuGlyValAlaArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaLeuAlaPheMetGlyProSerAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspGlyArgThrGluValGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpIleProPheProThrThrValAlaTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValLeuLysGlyCysAspCysLeuLeuSerArgThrTyr210215220HisGluPheGlyThrGlnTrpLeuProLeuLeuGluGluLeuHisGln225230235240ValProValValProValGlyLeuLeuProProSerIleProGlyAsp245250255GluLysAspGluAsnTrpValSerIleLysAspTrpLeuAspLysGln260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuLeu275280285ThrGluGluGluValValGluLeuAlaLeuGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPhePheTrpAlaTyrArgLysProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheValGluArgThrArgAspArg325330335GlyLeuValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValAlaGlyPheLeuThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProLeuPheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAspGluGluAspGlyCysLeuThrLysGluSerVal405410415AlaArgSerLeuArgLeuValMetValGluLysGluGlyGluIleTyr420425430ArgGluLysAlaArgGluMetSerLysIleTyrAsnAsnThrGluVal435440445GluAspGlnTyrValSerGlnPheValGluTyrLeuGluLysAsnAla450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>10<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_4bCpO用于酿酒酵母<400>10atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagaagttgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttggaattgtccaaattgattgctcaaaag120ggtcacaaagtctctttcttgtccaccaccaagaacatcgacagattatcttctcacatt180tctccattgatcaacgttgtccaattgactttaccaagagttcaagaattgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagttggcttctgat300ggtttgcaagaaccattgactagattcttggaatcttcttctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccagaaattgctgcctctttgggtgttgctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctttggctttcatgggtccatctgctgatgctatgatc480aacggttctgatggtagaaccgaagtcgaagacttcaccgttccaccaaaatggatccca540ttcccaaccactgtcgcttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcttgaagggttgtgactgtttgttg660tccagaacttaccatgaattcggtactcaatggttacctttgttggaagaattgcaccaa720gtcccagttgttccagttggtttgttgcctccttctatcccaggtgacgaaaaggacgaa780aactgggtttccatcaaggactggttagataagcaagaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttgttgactgaagaagaagttgttgaattggctttgggtttg900gaattgtccggtctaccatttttctgggcttacagaaagccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgtcgaaagaaccagagacagaggtttggtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgttgctggtttcttgacc1080cactgtggttctggttccattgtcgaaggtttgatgttcggtcacccattgatcatgttg1140ccattgttcggtgaccaaccattgaacgctagattattggaagacaagcaagtcggtatt1200gaaatcccaagagatgaagaagacggttgtttgaccaaggaatctgttgcccgttctcta1260agattggttatggtcgaaaaggaaggtgaaatctacagagaaaaggctagagaaatgtcc1320aagatctacaacaacaccgaagtcgaagaccaatatgtctcccaatttgttgaatacttg1380gaaaagaacgctcgtgccgttgccattgaccacgaaagc1419<210>11<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_5b变体<400>11MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGlu202530LeuSerLysLeuIleAlaGlnLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrLysAsnIleAspArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnValValGlnLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrGluPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125SerIleAlaThrLysHisGlyValSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrMetGlyProThrAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspGlyArgThrThrProGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpPheProPheProThrLysValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValLeuLysGlySerAspLeuLeuLeuSerArgSerTyr210215220HisGluPheGlyThrGluTrpLeuArgLeuLeuGluThrLeuHisArg225230235240ValProValValProValGlyLeuLeuProProGluIleProGlyAsp245250255GlyGluAspGluSerTrpValSerIleLysAspTrpLeuAspLysLys260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuVal275280285SerGlnGluGluLeuAsnGluLeuAlaLeuGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPheValTrpAlaTyrArgLysProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheGluGluArgThrArgGlyArg325330335GlyValValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValGlyGlyPheValThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAsnGluGluAspGlyCysLeuThrLysGluSerVal405410415AlaGluSerLeuArgLeuValValValGluLysGluGlyGluIleTyr420425430ArgGluLysAlaArgGluMetSerLysValTyrSerAspThrLysArg435440445GluLysGluTyrValAspGlnPheValAspTyrLeuGluLysAsnAla450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>12<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_5bCpO用于酿酒酵母<400>12atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagaagttgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttggaattgtccaaattgattgctcaaaag120ggtcacaaagtctctttcttgtccaccaccaagaacatcgacagattatcttctcacatt180tctccattgatcaacgttgtccaattgactttaccaagagttcaagaattgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagaaggcttctgat300ggtttgcaaccagaagtcactgaattcttggaacaacactctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccatccattgctactaagcacggtgtttctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctattgcttacatgggtccaactgctgatgctatgatc480aacggttctgatggtagaaccactccagaagacttcaccgttccaccaaaatggttccca540ttcccaaccaaggtctgttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcttgaagggttctgacttgttgttg660tccagatcttaccatgaattcggtactgaatggttaagattgttggaaactttgcacaga720gtcccagttgttccagttggtttgttgcctcctgaaatcccaggtgacggtgaagacgaa780tcttgggtttccatcaaggactggttagataagaaggaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttggtttctcaagaagaattgaacgaattggctttgggtttg900gaattgtccggtctaccatttgtctgggcttacagaaagccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgaagaaagaaccagaggtagaggtgttgtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgttggtggtttcgttacc1080cactgtggttctggttccattgtcgaaggtttgatgttcggtcacccattgatcatgttg1140ccaatcttcggtgaccaaccattgaacgctagattattggaagacaagcaagtcggtatt1200gaaatcccaagaaacgaagaagacggttgtttgaccaaggaatctgttgccgaatctcta1260agattggttgttgtcgaaaaggaaggtgaaatctacagagaaaaggctagagaaatgtcc1320aaggtttactctgataccaagagagaaaaggaatatgtcgaccaatttgttgactacttg1380gaaaagaacgctcgtgccgttgccattgaccacgaaagc1419<210>13<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_5bCpO用于解脂耶氏酵母<400>13atggccacctccgactccattgtcgacgaccgaaagaagctccacattgtcatgttcccc60tggctcgccttcggccacatcatcccttacctggagctgtccaagctcattgcccagaag120ggccacaaggtttctttcctctccaccaccaagaacattgaccgactctcctcccacatc180tctcctctcatcaacgttgtccagctcaccctcccccgagtccaggagcttcccgaggat240gctgaggccaccaccgacgtccaccccgaggacatcccctacctcaagaaggcctccgat300ggcctccagcccgaggtcaccgagttcctcgagcagcactcccccgactggatcatctac360gactacacccactactggctcccctccattgccaccaagcacggtgtctctcgagcccac420ttctccgtcaccaccccctgggccattgcctacatgggtcccactgccgacgccatgatc480aacggttccgacggccgaaccacccccgaggatttcactgtccctcccaagtggttcccc540ttccccaccaaggtctgctggcgaaagcacgacctcgctcgactcgtcccctacaaggcc600cccggtatctccgacggttaccgaatgggtctggttctcaagggctccgatctcctcctc660tctcgatcttaccacgagtttggtactgagtggctccgactgctcgagactctccaccga720gtccccgttgtccccgtcggcctcctccctcccgagatccccggtgatggtgaggacgag780tcttgggtttccatcaaggactggctcgacaagaaggagaagggctctgttgtctacgtt840gctctcggttccgaggtccttgtctctcaagaggagcttaacgagcttgctctgggcctc900gagctgtccggcctccccttcgtctgggcctaccgaaagcccaagggtcccgccaagtcc960gactccgtcgagctgcccgacggtttcgaggagcgaacccgaggccgaggtgttgtctgg1020acctcttgggctccccagctccgaatcctctcccacgagtccgtcggtggctttgtcacc1080cactgcggttccggctccatcgtcgagggtctgatgtttggccaccccctcatcatgctc1140cccatcttcggtgaccagcccctcaacgcccgactccttgaggacaagcaggtcggtatt1200gagatcccccgaaacgaggaagatggttgtctgaccaaggagtctgttgctgagtctctg1260cgactcgttgttgtcgagaaagagggtgagatctaccgggagaaggcccgagagatgtcc1320aaggtctactccgacaccaagcgagagaaggagtacgtcgaccagttcgtcgactacctc1380gagaagaacgcccgagctgttgccattgaccacgaatcc1419<210>14<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_6b变体<400>14MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGlu202530LeuSerLysLeuIleAlaGlnLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrLysAsnIleAspArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnValValGlnLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrGluPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125SerIleAlaThrLysHisGlyValSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrMetGlyProThrAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspGlyArgThrThrProGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpPheProPheProThrLysValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValIleLysGlyCysAspCysLeuLeuSerLysThrTyr210215220HisGluPheGlyThrGlnTrpLeuArgLeuLeuGluThrLeuHisArg225230235240LysProValIleProValGlyLeuLeuProProSerIleProGlySer245250255AspLysAspAspSerTrpValSerIleLysGluTrpLeuAspGlyGln260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuVal275280285ThrGlnAspGluValValGluLeuAlaHisGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPheValTrpAlaTyrArgAsnProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheValGluArgValArgAspArg325330335GlyLeuValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValCysGlyPheLeuThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAsnGluGluAspGlySerPheThrArgAspSerVal405410415AlaGluSerLeuArgLeuValMetValGluGluGluGlyLysIleTyr420425430ArgGluLysAlaLysGluMetSerLysLeuPheGlyAspLysAspLeu435440445GlnAspGlnTyrValAspAspPheValGluTyrLeuGlnLysHisArg450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>15<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_6bCpO用于酿酒酵母<400>15atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagaagttgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttggaattgtccaaattgattgctcaaaag120ggtcacaaagtctctttcttgtccaccaccaagaacatcgacagattatcttctcacatt180tctccattgatcaacgttgtccaattgactttaccaagagttcaagaattgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagaaggcttctgat300ggtttgcaaccagaagtcactgaattcttggaacaacactctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccatccattgctactaagcacggtgtttctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctattgcttacatgggtccaactgctgatgctatgatc480aacggttctgatggtagaaccactccagaagacttcaccgttccaccaaaatggttccca540ttcccaaccaaggtctgttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcatcaagggttgtgactgtttgttg660tccaagacttaccatgaattcggtactcaatggttaagattgttggaaactttgcacaga720aagccagttatcccagttggtttgttgcctccttctatcccaggttctgacaaggacgac780tcttgggtttccatcaaggaatggttagatggtcaagaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttggttactcaagacgaagttgttgaattggctcacggtttg900gaattgtccggtctaccatttgtctgggcttacagaaacccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgtcgaaagagttagagacagaggtttggtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgtttgtggtttcttgact1080cactgtggttctggttctatcgtcgaaggtttgatgttcggtcatcctttgatcatgttg1140cctatctttggtgaccaaccattgaacgctagattgttggaagacaagcaagttggtatt1200gaaattccaagaaacgaagaagatggttctttcaccagagactctgttgctgaatctttg1260agattagtcatggttgaagaagaaggtaagatctacagagaaaaggccaaggaaatgtcc1320aagttgtttggtgacaaagatttgcaagaccaatacgtcgatgacttcgtcgaatacttg1380caaaagcaccgtcgtgccgttgccattgaccacgaatca1419<210>16<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_6bCpO用于解脂耶氏酵母<400>16atggctacttccgactccattgtcgacgaccgaaagaagctccacattgtcatgttcccc60tggctcgcctttggccacatcattccctacctcgagctttccaagctcattgcccagaag120ggccacaaggtttctttcctctccaccaccaagaacattgaccgactctcctcccacatc180tctcctctcatcaacgttgtccagctcaccctcccccgagtccaggagctgcccgaggac240gccgaggccaccaccgatgtccaccccgaggatatcccctacctcaagaaggcctccgac300ggtctgcagcccgaggtcaccgagttcctcgagcagcactctcccgactggatcatctac360gactacacccactactggctcccctccattgccaccaagcacggtgtctctcgagcccac420ttctccgtcaccaccccctgggccattgcctacatgggccccactgctgacgccatgatc480aacggttccgatggccgaaccacccccgaggacttcactgtccctcccaagtggttcccc540ttccccaccaaggtctgctggcgaaagcacgatctggcccgactcgttccctacaaggcc600cccggtatctccgacggctaccgaatgggtctggtcatcaagggctgcgactgtctgctc660tccaagacctaccacgagtttggcacccagtggctccgactcctcgagactctccaccga720aagcccgtcatccccgtcggtctgctccctccctccatccccggctccgacaaggacgac780tcttgggtttccatcaaggagtggctcgacggccaggagaagggctctgttgtctacgtt840gctctcggttccgaggttctcgtcacccaggacgaggttgttgagctggcccacggtctg900gagctgtccggcctccccttcgtctgggcttaccgaaaccccaagggtcccgccaagtcc960gactccgtcgagcttcccgatggtttcgtcgagcgagtccgagatcgaggtctggtctgg1020acctcttgggctccccagctccgaatcctctcccacgagtccgtctgtggtttcctcacc1080cactgcggttccggctccatcgtcgagggtctgatgttcggccaccccctcatcatgctc1140cccatcttcggtgaccagcccctcaacgcccgactccttgaggacaagcaggtcggtatc1200gagatcccccgaaacgaagaggacggttccttcacccgagactctgttgctgagtctctc1260cgactcgtcatggtcgaggaagagggtaagatctaccgagagaaggccaaggagatgtcc1320aagctgttcggtgacaaggatctccaggaccagtacgtcgacgactttgtcgagtacctc1380cagaagcaccgacgagctgttgccattgaccacgagtct1419<210>17<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_7b变体<400>17MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGlu202530LeuSerLysLeuIleAlaGlnLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrLysAsnIleAspArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnValValGlnLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrGluPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125GluIleAlaLysSerLeuGlyValSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrIleGlyProThrAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspTyrArgThrGluLeuGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpPheProPheProThrThrValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValIleLysGlyCysAspCysLeuLeuSerLysThrTyr210215220HisGluPheGlyThrGlnTrpLeuArgLeuLeuGluThrLeuHisArg225230235240LysProValIleProValGlyLeuLeuProProSerIleProGlySer245250255AspLysAspAspSerTrpValSerIleLysGluTrpLeuAspGlyGln260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuVal275280285ThrGlnAspGluValValGluLeuAlaHisGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPheValTrpAlaTyrArgAsnProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheValGluArgValArgAspArg325330335GlyLeuValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValCysGlyPheLeuThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAsnGluGluAspGlySerPheThrArgAspSerVal405410415AlaGluSerLeuArgLeuValMetValGluGluGluGlyLysIleTyr420425430ArgGluLysAlaLysGluMetSerLysLeuPheGlyAspLysAspLeu435440445GlnAspGlnTyrValAspAspPheValGluTyrLeuGlnLysHisArg450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>18<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_7bCpO用于酿酒酵母<400>18atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagaagttgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttggaattgtccaaattgattgctcaaaag120ggtcacaaagtctctttcttgtccaccaccaagaacatcgacagattatcttctcacatt180tctccattgatcaacgttgtccaattgactttaccaagagttcaagaattgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagaaggcttctgat300ggtttgcaaccagaagtcactgaattcttggaacaacactctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccagaaattgctaagtctttgggtgtttctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctattgcttacattggtccaactgctgatgctatgatc480aacggttctgattacagaaccgaattggaagacttcaccgttccaccaaaatggttccca540ttcccaaccactgtctgttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcatcaagggttgtgactgtttgttg660tccaagacttaccatgaattcggtactcaatggttaagattgttggaaactttgcacaga720aagccagttatcccagttggtttgttgcctccttctatcccaggttctgacaaggacgac780tcttgggtttccatcaaggaatggttagatggtcaagaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttggttactcaagacgaagttgttgaattggctcacggtttg900gaattgtccggtctaccatttgtctgggcttacagaaacccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgtcgaaagagttagagacagaggtttggtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgtttgtggtttcttgact1080cactgtggttctggttctatcgtcgaaggtttgatgttcggtcatcctttgatcatgttg1140cctatctttggtgaccaaccattgaacgctagattgttggaagacaagcaagttggtatt1200gaaattccaagaaacgaagaagatggttctttcaccagagactctgttgctgaatctttg1260agattagtcatggttgaagaagaaggtaagatctacagagaaaaggccaaggaaatgtcc1320aagttgtttggtgacaaagatttgcaagaccaatacgtcgatgacttcgtcgaatacttg1380caaaagcaccgtcgtgccgttgccattgaccacgaatca1419<210>19<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_7bCpO用于解脂耶氏酵母<400>19atggccacctccgactccattgttgacgaccgaaagaagctccacattgtcatgttcccc60tggctcgccttcggccacatcattccctacctcgagctttccaagctcattgcccagaag120ggccacaaggtttctttcctctccaccaccaagaacattgaccgactctcctcccacatc180tctcctctcatcaacgttgtccagctcaccctcccccgagtccaggagctgcccgaggat240gctgaggccaccaccgacgtccaccccgaggatatcccctacctcaagaaggcctccgat300ggtctgcagcccgaggtcaccgagttcctcgagcagcactctcccgactggatcatctac360gactacacccactactggctccccgagattgccaagtctctcggtgtctctcgagcccac420ttctccgtcaccaccccctgggccattgcttacatcggtcccactgctgacgccatgatc480aacggctccgactaccgaactgaactcgaggacttcactgttcctcccaagtggttcccc540ttccccaccaccgtctgctggcgaaagcacgatctcgcccgactggtcccctacaaggct600cccggtatctccgacggctaccgaatgggtctggtcatcaagggttgcgactgtctgctc660tccaagacctaccacgagtttggcacccagtggctgcgactcctcgagactctccaccga720aagcccgtcatccccgtcggtctgctgcccccttccatccccggttccgacaaggacgac780tcttgggtttccatcaaggagtggctcgacggccaggagaagggctctgttgtctacgtt840gctctcggctccgaggttctcgtcacccaggacgaggttgtcgagctggcccacggtctg900gagctgtccggtctgcccttcgtctgggcctaccgaaaccccaagggccccgccaagtcc960gactccgtcgagcttcccgatggtttcgtcgagcgagtccgagatcgaggtctggtctgg1020acctcttgggctccccagctccgaatcctctcccacgagtccgtctgcggtttcctcacc1080cactgtggttccggctccattgtcgagggtctgatgttcggccaccccctcatcatgctc1140cccatcttcggtgaccagcccctcaacgcccgactccttgaggacaagcaggtcggtatc1200gagatcccccgaaacgaagaggacggctctttcacccgagactccgttgccgagtctctc1260cgactcgtcatggtcgaggaagagggtaagatctaccgagagaaggccaaggagatgtcc1320aagctctttggtgacaaggatctccaggaccagtacgtcgacgactttgtcgagtacctc1380cagaagcaccgacgagctgttgccatcgaccacgagtcg1419<210>20<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_8b<400>20MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysGlnLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGlu202530LeuSerLysLeuIleAlaGluLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrProLysAsnIleGlnArgLeuSerSerHisLeuSerProLeuIle505560AsnValValGlnLeuProLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrGluPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125SerIleAlaThrLysHisGlyValSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrMetGlyProThrAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspGlyArgThrThrProGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpPheProPheProThrLysValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValIleLysGlyCysAspCysLeuLeuSerLysThrTyr210215220HisGluPheGlyThrGlnTrpLeuArgLeuLeuGluThrLeuHisArg225230235240LysProValIleProValGlyLeuLeuProProSerIleProGlySer245250255AspLysAspAspSerTrpValSerIleLysGluTrpLeuAspGlyGln260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuVal275280285ThrGlnAspGluValValGluLeuAlaHisGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPheValTrpAlaTyrArgAsnProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheValGluArgValArgAspArg325330335GlyLeuValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValCysGlyPheLeuThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAsnGluGluAspGlySerPheThrArgAspSerVal405410415AlaGluSerLeuArgLeuValMetValGluGluGluGlyLysIleTyr420425430ArgGluLysAlaLysGluMetSerLysLeuPheGlyAspLysAspLeu435440445GlnAspGlnTyrValAspAspPheValGluTyrLeuGlnLysHisArg450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>21<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT_8bCpO用于酿酒酵母<400>21atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagcaattgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttggaattgtccaaattgattgctgaaaag120ggtcacaaagtctctttcttgtccaccccaaagaacatccaaagattatcttctcacttg180tctccattgatcaacgttgtccaattgccattaccaagagttcaagaattgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagaaggcttctgat300ggtttgcaaccagaagtcactgaattcttggaacaacactctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccatccattgctactaagcacggtgtttctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctattgcttacatgggtccaactgctgatgctatgatc480aacggttctgatggtagaaccactccagaagacttcaccgttccaccaaaatggttccca540ttcccaaccaaggtctgttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcatcaagggttgtgactgtttgttg660tccaagacttaccatgaattcggtactcaatggttaagattgttggaaactttgcacaga720aagccagttatcccagttggtttgttgcctccttctatcccaggttctgacaaggacgac780tcttgggtttccatcaaggaatggttagatggtcaagaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttggttactcaagacgaagttgttgaattggctcacggtttg900gaattgtccggtctaccatttgtctgggcttacagaaacccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgtcgaaagagttagagacagaggtttggtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgtttgtggtttcttgact1080cactgtggttctggttctatcgtcgaaggtttgatgttcggtcatcctttgatcatgttg1140cctatctttggtgaccaaccattgaacgctagattgttggaagacaagcaagttggtatt1200gaaattccaagaaacgaagaagatggttctttcaccagagactctgttgctgaatctttg1260agattagtcatggttgaagaagaaggtaagatctacagagaaaaggccaaggaaatgtcc1320aagttgtttggtgacaaagatttgcaagaccaatacgtcgatgacttcgtcgaatacttg1380caaaagcaccgtcgtgccgttgccattgaccacgaatca1419<210>22<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_9b变体<400>22MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGln202530LeuSerLysLeuLeuAlaGlnLysGlyHisLysValSerPheIleSer354045ThrProArgAsnIleGlnArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnLeuValGlnLeuProLeuProArgValAspAsnLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrGluPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125GluIleAlaLysSerLeuGlyValSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrMetGlyProThrAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspTyrArgThrGluLeuGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpPheProPheProThrThrValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValLeuLysGlySerAspLeuLeuLeuSerArgSerTyr210215220HisGluPheGlyThrGluTrpLeuArgLeuLeuGluThrLeuHisArg225230235240ValProValValProValGlyLeuLeuProProGluIleProGlyAsp245250255GlyGluAspGluSerTrpValSerIleLysAspTrpLeuAspLysLys260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuVal275280285SerGlnGluGluLeuAsnGluLeuAlaLeuGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPheValTrpAlaTyrArgLysProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheGluGluArgThrArgGlyArg325330335GlyValValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValCysGlyPheLeuThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAsnGluGluAspGlySerLeuThrLysGluSerVal405410415AlaArgSerLeuArgSerValValValGluGluGluGlyLysIleTyr420425430ArgGluLysAlaLysGluMetSerLysLeuPheGlyAspLysAspLeu435440445GlnAspGlnTyrValAspAspPheValGluTyrLeuGlnLysHisArg450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>23<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_9bCpO用于酿酒酵母<400>23atggccacttctgactccatcgttgatgacagaaagaagttgcacatcgttatgttccca60tggttagctttcggtcacattatcccatacttgcaattgtccaaattgttggctcaaaag120ggtcacaaagtctctttcatctccaccccaagaaacatccaaagattatcttctcacatt180tctccattgatcaacttggtccaattgccattaccaagagttgacaacttgccagaagat240gctgaagctaccaccgatgtccatccagaagatatcccatacttgaagaaggcttctgat300ggtttgcaaccagaagtcactgaattcttggaacaacactctccagactggattatctac360gactacactcactactggttaccagaaattgctaagtctttgggtgtttctcgtgctcat420ttctccgttaccactccatgggctattgcttacatgggtccaactgctgatgctatgatc480aacggttctgattacagaaccgaattggaagacttcaccgttccaccaaaatggttccca540ttcccaaccactgtctgttggagaaagcacgatttggccagattagttccatacaaggcc600ccaggtatctctgacggttacagaatgggtttagtcttgaagggttctgacttgttgttg660tccagatcttaccatgaattcggtactgaatggttaagattgttggaaactttgcacaga720gtcccagttgttccagttggtttgttgcctcctgaaatcccaggtgacggtgaagacgaa780tcttgggtttccatcaaggactggttagataagaaggaaaagggttccgttgtctacgtt840gctttgggttctgaagtcttggtttctcaagaagaattgaacgaattggctttgggtttg900gaattgtccggtctaccatttgtctgggcttacagaaagccaaagggtccagctaagtct960gactctgttgaattgccagatggtttcgaagaaagaaccagaggtagaggtgttgtctgg1020acttcctgggctccacaattgagaattttgtcccacgaatctgtttgtggtttcttgact1080cactgtggttctggttccattgtcgaaggtttgatgttcggtcatccattgatcatgttg1140ccaatctttggtgaccaacctttgaacgccagattattggaagacaagcaagttggtatt1200gaaattccaagaaacgaagaagacggttctttgaccaaggaatctgttgccagatctttg1260agatctgttgttgtcgaagaagaaggtaagatctacagagaaaaggccaaggaaatgtcc1320aaattgtttggtgacaaggatttgcaagatcaatatgtcgatgacttcgtcgaatactta1380caaaagcaccgtcgtgctgttgccattgaccatgaaagc1419<210>24<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_9bCpO用于解脂耶氏酵母<400>24atggccacctccgactccattgtcgacgaccgaaagaagctccacattgtcatgttcccc60tggctcgcctttggccacatcattccctacctccagctctccaagctcctcgcccagaag120ggccacaaggtttctttcatctccactccccgaaacatccagcgactctcctcccacatc180tctcctctcatcaacctcgtccagctccccctcccccgagtcgacaacctccccgaggat240gctgaggccaccaccgatgtccaccccgaggacatcccctacctcaagaaggcctccgac300ggcctccagcccgaggtcaccgagttcctcgagcagcactcccccgactggatcatctac360gactacacccactactggctccccgagattgccaagtctctcggtgtctctcgagcccac420ttctccgtcaccaccccctgggccattgcttacatgggtcccactgccgatgccatgatc480aacggctccgactaccgaaccgagcttgaggacttcaccgtccctcccaagtggttcccc540ttccccaccaccgtctgctggcgaaagcacgatctcgcccgactcgtcccctacaaggct600cccggtatctccgacggttaccgaatgggcctcgttctcaagggttccgatctgctgctc660tcccgatcttaccacgagtttggtactgagtggctgcgactcctcgagactctgcaccga720gtccccgttgtccccgtcggtctgctccctcccgagatccccggtgacggtgaggacgag780tcttgggtttccatcaaggactggctcgacaagaaggagaagggctccgtcgtctacgtt840gccctcggctccgaggttctcgtttcccaagaggagcttaacgagcttgctctcggcctc900gagctgtccggtctgccctttgtctgggcctaccgaaagcccaagggccccgccaagtcc960gactccgtcgagctgcccgacggcttcgaggagcgaacccgaggtcgaggtgttgtctgg1020acctcttgggctccccagctccgaatcctctcccacgagtccgtctgtggtttcctgacc1080cactgcggttccggctctatcgtcgagggtctgatgttcggccaccccctcatcatgctc1140cccatcttcggtgaccagcccctcaacgcccgacttctcgaggacaagcaggtcggtatt1200gagatcccccgaaacgaagaggacggctctctcaccaaggagtctgttgctcgatctctg1260cgatccgtcgttgtcgaggaagagggtaagatctaccgagagaaggccaaggagatgtcc1320aagctgttcggtgacaaggatctgcaggaccagtacgtcgacgacttcgtcgagtacctc1380cagaagcaccgacgagctgttgccattgaccacgaatcc1419<210>25<211>473<212>PRT<213>人工序列()<220><223>UGT2_10b变体<400>25MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysLysLeuHisIle151015ValMetPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleIleProTyrLeuGlu202530LeuSerLysLeuIleAlaGlnLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrLysAsnIleAspArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnPheValLysLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrGluPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125GluIleAlaLysSerLeuGlyValSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrMetGlyProThrAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspTyrArgThrGluLeuGluAspPheThrValProPro165170175LysTrpPheProPheProThrThrValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValIleLysGlyCysAspCysLeuLeuSerLysThrTyr210215220HisGluPheGlyThrGlnTrpLeuArgLeuLeuGluGluLeuHisArg225230235240ValProValIleProValGlyLeuLeuProProSerIleProGlySer245250255AspLysAspAspSerTrpValSerIleLysGluTrpLeuAspGlyGln260265270GluLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuVal275280285ThrGlnGluGluValValGluLeuAlaHisGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPhePheTrpAlaTyrArgLysProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheValGluArgValArgAspArg325330335GlyLeuValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValAlaGlyPheLeuThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAsnGluGluAspGlySerPheThrArgAspSerVal405410415AlaGluSerLeuArgLeuValMetValGluGluGluGlyLysIleTyr420425430ArgGluLysAlaLysGluMetSerLysLeuPheGlyAspLysAspLeu435440445GlnAspGlnTyrValAspAspPheValGluTyrLeuGlnLysHisArg450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>26<211>1419<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_10bCpO用于解脂耶氏酵母<400>26atggccacctccgactccattgttgacgaccgaaagaagctccacattgtcatgttcccc60tggctcgcctttggccacatcatcccctatctcgagctttccaagctcattgcccagaag120ggccacaaggtttccttcctctccaccaccaagaacattgaccgactctcctcccacatc180tctcccctcatcaactttgtcaagctcaccctcccccgagtccaggagctgcccgaggac240gccgaggccaccactgatgtccaccccgaggatatcccctacctcaagaaggcctccgac300ggcctccagcccgaggtcactgagttcctcgagcagcactctcccgactggatcatctac360gactacacccactactggctccccgagattgccaagtctctcggtgtctctcgagcccac420ttctccgtcaccaccccctgggccattgcttacatgggtcccactgccgatgccatgatc480aacggttccgactaccgaaccgagcttgaggacttcaccgtccctcccaagtggttcccc540ttccccaccaccgtctgctggcgaaagcacgatctggcccgactcgtcccctacaaggct600cccggtatctccgacggttaccgaatgggcctcgtcatcaagggctgcgactgtctgctc660tccaagacctaccacgagttcggtactcagtggctccgacttctcgaggagctgcaccga720gtccccgtcatccccgttggtctgctccctccctccatccccggctctgacaaggacgac780tcttgggtttccatcaaggagtggctcgacggccaggagaagggctccgttgtctacgtt840gctctcggttccgaggttctcgtcacccaggaagaggttgtcgagcttgctcacggtctg900gagctgtccggtctgcccttcttctgggcctaccgaaagcccaagggtcccgccaagtcc960gactccgtcgagcttcccgatggtttcgtcgagcgagtccgagatcgaggtctggtctgg1020acctcttgggctccccagctccgaatcctctcccacgagtccgttgctggtttcctcacc1080cactgcggttccggctccattgtcgagggcctcatgttcggccaccctctcatcatgctc1140cccatcttcggtgaccagcccctcaacgcccgactccttgaggacaagcaggtcggtatc1200gagatcccccgaaacgaggaagatggttctttcacccgagactctgttgccgagtctctg1260cgactcgtcatggtcgaggaagagggtaagatctaccgagagaaggccaaggagatgtcc1320aagctctttggcgacaaggacctccaggaccagtacgtcgacgactttgtcgagtacctc1380cagaagcaccgacgagctgttgccattgaccacgaaagc1419<210>27<211>473<212>PRT<213>甜叶菊()<400>27MetAlaThrSerAspSerIleValAspAspArgLysGlnLeuHisVal151015AlaThrPheProTrpLeuAlaPheGlyHisIleLeuProTyrLeuGln202530LeuSerLysLeuIleAlaGluLysGlyHisLysValSerPheLeuSer354045ThrThrArgAsnIleGlnArgLeuSerSerHisIleSerProLeuIle505560AsnValValGlnLeuThrLeuProArgValGlnGluLeuProGluAsp65707580AlaGluAlaThrThrAspValHisProGluAspIleProTyrLeuLys859095LysAlaSerAspGlyLeuGlnProGluValThrArgPheLeuGluGln100105110HisSerProAspTrpIleIleTyrAspTyrThrHisTyrTrpLeuPro115120125SerIleAlaAlaSerLeuGlyIleSerArgAlaHisPheSerValThr130135140ThrProTrpAlaIleAlaTyrMetGlyProSerAlaAspAlaMetIle145150155160AsnGlySerAspGlyArgThrThrValGluAspLeuThrThrProPro165170175LysTrpPheProPheProThrLysValCysTrpArgLysHisAspLeu180185190AlaArgLeuValProTyrLysAlaProGlyIleSerAspGlyTyrArg195200205MetGlyLeuValLeuLysGlySerAspCysLeuLeuSerLysCysTyr210215220HisGluPheGlyThrGlnTrpLeuProLeuLeuGluThrLeuHisGln225230235240ValProValValProValGlyLeuLeuProProGluIleProGlyAsp245250255GluLysAspGluThrTrpValSerIleLysLysTrpLeuAspGlyLys260265270GlnLysGlySerValValTyrValAlaLeuGlySerGluValLeuVal275280285SerGlnThrGluValValGluLeuAlaLeuGlyLeuGluLeuSerGly290295300LeuProPheValTrpAlaTyrArgLysProLysGlyProAlaLysSer305310315320AspSerValGluLeuProAspGlyPheValGluArgThrArgAspArg325330335GlyLeuValTrpThrSerTrpAlaProGlnLeuArgIleLeuSerHis340345350GluSerValCysGlyPheLeuThrHisCysGlySerGlySerIleVal355360365GluGlyLeuMetPheGlyHisProLeuIleMetLeuProIlePheGly370375380AspGlnProLeuAsnAlaArgLeuLeuGluAspLysGlnValGlyIle385390395400GluIleProArgAsnGluGluAspGlyCysLeuThrLysGluSerVal405410415AlaArgSerLeuArgSerValValValGluLysGluGlyGluIleTyr420425430LysAlaAsnAlaArgGluLeuSerLysIleTyrAsnAspThrLysVal435440445GluLysGluTyrValSerGlnPheValAspTyrLeuGluLysAsnAla450455460ArgAlaValAlaIleAspHisGluSer465470<210>28<211>1422<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_1aCpO用于酿酒酵母<400>28atggctacatctgattctattgttgatgacaggaagcagttgcatgtggctactttccct60tggcttgctttcggtcatatactgccttacctacaactatcaaaactgatagctgaaaaa120ggacataaagtgtcattcctttcaacaactagaaacattcaaagattatcttcccacata180tcaccattgattaacgtcgttcaattgacacttccaagagtacaggaattaccagaagat240gctgaagctacaacagatgtgcatcctgaagatatcccttacttgaaaaaggcatccgat300ggattacagcctgaggtcactagattccttgagcaacacagtccagattggatcatatac360gactacactcactattggttgccttcaattgcagcatcactaggcatttctagggcacat420ttcagtgtaaccacaccttgggccattgcttacatgggtccatccgctgatgctatgatt480aacggcagtgatggtagaactaccgttgaagatttgacaaccccaccaaagtggtttcca540tttccaactaaagtctgttggagaaaacacgacttagcaagactggttccatacaaggca600ccaggaatctcagacggctatagaatgggtttagtccttaaagggtctgactgcctattg660tctaagtgttaccatgagtttgggacacaatggctaccacttttggaaacattacaccaa720gttcctgtcgtaccagttggtctattacctccagaaatccctggtgatgagaaggacgag780acttgggtttcaatcaaaaagtggttagacgggaagcaaaaaggctcagtggtatatgtg840gcactgggttccgaagttttagtatctcaaacagaagttgtggaacttgccttaggtttg900gaactatctggattgccatttgtctgggcctacagaaaaccaaaaggccctgcaaagtcc960gattcagttgaattgccagacggctttgtcgagagaactagagatagagggttggtatgg1020acttcatgggctccacaattgagaatcctgagtcacgaatctgtgtgcggtttcctaaca1080cattgtggttctggttctatagttgaaggactgatgtttggtcatccacttatcatgttg1140ccaatctttggtgaccagcctttgaatgcacgtctgttagaagataaacaagttggaatt1200gaaatcccacgtaatgaggaagatggatgtttaaccaaggagtctgtggccagatcatta1260cgttccgttgtcgttgaaaaggaaggcgaaatctacaaggccaatgcccgtgaactttca1320aagatctacaatgacacaaaagtagagaaggaatatgtttctcaatttgtagattaccta1380gagaaaaacgctagagccgtagctattgatcatgaatcctaa1422<210>29<211>1422<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT2_1aCpO用于解脂耶氏酵母<400>29atggccacctccgactccattgtcgacgaccgaaagcagctgcacgttgccaccttcccc60tggctcgcctttggccacattctgccctacctccagctctccaagctcattgctgagaag120ggccacaaggtttctttcctgtccaccacccgaaacatccagcgactctcctcccacatc180tctcctctcatcaacgttgtccagctcaccctcccccgagtccaggagctccccgaggat240gccgaggccaccactgatgtccaccccgaggacatcccctacctcaagaaggcctccgac300ggtctgcagcccgaggtcacccgattcctcgagcagcactctcccgactggatcatctac360gactacacccactactggctcccctccattgctgcttctctcggtatctctcgagcccac420ttctccgtcaccaccccctgggccattgcttacatgggcccctctgctgacgccatgatc480aacggttccgacggccgaaccaccgtcgaggatctcaccacccctcccaagtggttcccc540ttccccaccaaggtctgctggcgaaagcacgatctcgcccgactcgtcccctacaaggcc600cccggtatctccgacggttaccgaatgggtctggttctcaagggctccgactgtctgctc660tccaagtgctaccacgagtttggtacccagtggctccccctgctcgagactctgcaccag720gtccccgttgtccccgtcggtctgctccctcccgagatccccggtgacgagaaggacgag780acttgggtttccatcaagaagtggctcgacggcaagcagaagggctccgtcgtctacgtt840gctctcggctccgaggttcttgtctcccagactgaggtcgtcgagctcgccctcggtctg900gagctctccggtctgcccttcgtctgggcctaccgaaagcccaagggtcccgccaagtcc960gactccgtcgagctccccgacggtttcgtcgagcgaactcgagatcgaggtctggtctgg1020acctcttgggctccccagctccgaatcctctcccacgagtccgtctgcggtttcctgacc1080cactgtggttccggctccattgtcgagggcctcatgttcggccaccccctcatcatgctg1140cccatcttcggtgaccagcccctcaacgcccgactcctcgaggacaagcaggtcggtatc1200gagatcccccgaaacgaagaggacggctgcctcaccaaggagtctgttgcccgatctctg1260cgatctgttgttgtcgagaaagagggtgagatctacaaggccaacgcccgagagctctcc1320aagatctacaacgacaccaaggtcgagaaggagtacgtttcccagtttgtcgactacctc1380gagaagaacgcccgagctgtcgccattgaccacgagagttaa1422<210>30<211>600<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScEno2启动子<400>30gtgtcgacgctgcgggtatagaaagggttctttactctatagtacctcctcgctcagcat60ctgcttcttcccaaagatgaacgcggcgttatgtcactaacgacgtgcaccaacttgcgg120aaagtggaatcccgttccaaaactggcatccactaattgatacatctacacaccgcacgc180cttttttctgaagcccactttcgtggactttgccatatgcaaaattcatgaagtgtgata240ccaagtcagcatacacctcactagggtagtttctttggttgtattgatcatttggttcat300cgtggttcattaattttttttctccattgctttctggctttgatcttactatcatttgga360tttttgtcgaaggttgtagaattgtatgtgacaagtggcaccaagcatatataaaaaaaa420aaagcattatcttcctaccagagttgattgttaaaaacgtatttatagcaaacgcaattg480taattaattcttattttgtatcttttcttcccttgtctcaatcttttatttttattttat540ttttcttttcttagtttctttcataacaccaagcaactaatactataacatacaataata600<210>31<211>1056<212>DNA<213>酿酒酵母()<400>31atggcttctgaaaaggaaatcagaagagaacgtttcttgaatgttttcccaaaattggtt60gaagaattgaacgcttctctattagcttacggtatgccaaaggaagcttgtgactggtac120gctcactctttgaactacaacaccccaggtggtaagttgaacagaggtctatccgttgtt180gacacctacgccattttgtccaacaagaccgtcgaacaattaggtcaagaagaatacgaa240aaggttgccatcttaggttggtgtatcgaattgttgcaagcttacttcttggttgctgat300gacatgatggacaaatctatcaccagaagaggtcaaccatgttggtacaaggttccagaa360gtcggtgaaattgccatcaacgatgctttcatgttggaagctgccatctacaagttgttg420aagtctcacttcagaaacgaaaagtactacattgacatcactgaattattccacgaagtt480actttccaaaccgaattgggtcaattgatggacttgattaccgctccagaagataaggtc540gatttgtccaaattttccttgaagaaacactctttcattgtcactttcaagactgcttac600tactccttttacttgcctgttgctttggccatgtatgtcgctggtatcaccgatgaaaag660gacttgaagcaagctcgtgatgtcttgattccattaggtgaatacttccaaatccaagat720gactacttggactgtttcggtactccagaacaaatcggtaagattggtactgatatccaa780gacaacaagtgttcctgggttatcaacaaggctttggaattggcttctgctgaacaaaga840aagactttggacgaaaactacggtaagaaggactctgttgctgaagctaagtgtaagaag900atcttcaacgatttgaaaattgaacaattataccatgaatacgaagaatctattgccaag960gacttgaaagccaagatctctcaagtcgacgaatccagaggtttcaaggctgatgtcttg1020actgctttcttgaacaaggtctacaagagatcaaaa1056<210>32<211>301<212>DNA<213>人工序列()<220><223>Adh1终止子<400>32agcgaatttcttatgatttatgatttttattattaaataagttataaaaaaaataagtgt60atacaaattttaaagtgactcttaggttttaaaacgaaaattcttattcttgagtaactc120tttcctgtaggtcaggttgctttctcaggtatagcatgaggtcgctcttattgaccacac180ctctaccggcatgccgagcaaatgcctgcaaatcgctccccatttcacccaattgtagat240atgctaactccagcaatgagttgatgaatctcggtgtgtattttatgtcctcagaggaca300a301<210>33<211>600<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScFba1启动子<400>33ctacttggcttcacatacgttgcatacgtcgatatagataataatgataatgacagcagg60attatcgtaatacgtaatagttgaaaatctcaaaaatgtgtgggtcattacgtaaataat120gataggaatgggattcttctatttttcctttttccattctagcagccgtcgggaaaacgt180ggcatcctctctttcgggctcaattggagtcacgctgccgtgagcatcctctctttccat240atctaacaactgagcacgtaaccaatggaaaagcatgagcttagcgttgctccaaaaaag300tattggatggttaataccatttgtctgttctcttctgactttgactcctcaaaaaaaaaa360aatctacaatcaacagatcgcttcaattacgccctcacaaaaacttttttccttcttctt420cgcccacgttaaattttatccctcatgttgtctaacggatttctgcacttgatttattat480aaaaagacaaagacataatacttctctatcaatttcagttattgttcttccttgcgttat540tcttctgttcttctttttcttttgtcatatataaccataaccaagtaatacatattcaaa600<210>34<211>1575<212>DNA<213>酿酒酵母()<400>34atggaccaattggtcaagactgaagtcaccaagaaatctttcactgctccagtccaaaag60gcttccactccagttttgaccaacaagaccgtcatctccggttccaaggttaaatctttg120tcctctgctcaatcttcctcctctggtccatcttcttcttctgaagaagatgattccaga180gatatcgaatctttggacaagaaaatcagaccattggaagaattggaagctctattgtcc240tctggtaacactaagcaattaaagaacaaggaagttgctgctttggttatccacggtaaa300ttgccattgtacgctttggaaaagaaattaggtgacaccaccagagctgttgctgtcaga360agaaaggctttgtccattttggctgaagctccagtcttggcttccgacagattaccatac420aagaactacgactacgaccgtgtctttggtgcttgttgtgaaaatgtcattggttacatg480ccattaccagttggtgtcattggtccattggttatcgacggtacttcttaccacatccca540atggctaccactgaaggttgtttggttgcttctgccatgagaggttgtaaggccatcaac600gctggtggtggtgctaccaccgttttgactaaggatggtatgaccagaggtcctgttgtc660agattcccaactttgaagagatctggtgcttgtaagatctggttggattctgaagaaggt720caaaacgccatcaagaaggctttcaactccacttccagattcgctagattgcaacacatt780caaacttgtttagctggtgacttgttgttcatgagattcagaaccaccactggtgacgct840atgggtatgaacatgatctccaagggtgttgaatactctttgaagcaaatggttgaagaa900tacggttgggaagatatggaagttgtctctgtttctggtaactactgtaccgacaagaag960ccagctgccatcaactggatcgaaggtcgtggtaagtccgttgttgctgaagctaccatt1020ccaggtgacgttgtcagaaaggttttgaaatctgatgtttctgctttagtcgaattgaac1080attgccaagaacttggtcggttctgccatggctggttccgtcggtggtttcaacgctcat1140gccgctaacttggtcactgctgttttcttggctttaggtcaagatccagctcaaaatgtc1200gaatcctctaactgtatcactttgatgaaggaagttgacggtgatttgagaatttctgtt1260tccatgccatccattgaagtcggtactatcggtggtggtactgtcttggaaccacaaggt1320gccatgttggacttgttgggtgttcgtggtccacacgctaccgctccaggtactaacgcc1380agacaattggccagaattgttgcctgtgccgtcttggctggtgaattgtctctatgtgcc1440gctttggctgctggtcacttggttcaatctcacatgacccacaacagaaagcctgctgaa1500ccaaccaaaccaaacaacttggatgctactgacattaacagattaaaggacggttctgtc1560acctgtatcaagtct1575<210>35<211>301<212>DNA<213>人工序列()<220><223>Adh2终止子<400>35agcggatctcttatgtctttacgatttatagttttcattatcaagtatgcctatattagt60atatagcatctttagatgacagtgttcgaagtttcacgaataaaagataatattctactt120tttgctcccaccgcgtttgctagcacgagtgaacaccatccctcgcctgtgagttgtacc180cattcctctaaactgtagacatggtagcttcagcagtgttcgttatgtacggcatcctcc240aacaaacagtcggttatagtttgtcctgctcctctgaatcgtgtccctcgatatttctca300t301<210>36<211>600<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScTef1启动子<400>36ttggctgataatagcgtataaacaatgcatactttgtacgttcaaaatacaatgcagtag60atatatttatgcatattacatataatacatatcacataggaagcaacaggcgcgttggac120ttttaattttcgaggaccgcgaatccttacatcacacccaatcccccacaagtgatcccc180cacacaccatagcttcaaaatgtttctactccttttttactcttccagattttctcggac240tccgcgcatcgccgtaccacttcaaaacacccaagcacagcatactaaatttcccctctt300tcttcctctagggtgtcgttaattacccgtactaaaggtttggaaaagaaaaaagacacc360gcctcgtttctttttcttcgtcgaaaaaggcaataaaaatttttatcacgtttctttttc420ttgaaaatttttttttttgatttttttctctttcgatgacctcccattgatatttaagtt480aataaacggtcttcaatttctcaagtttcagtttcatttttcttgttctattacaacttt540ttttacttcttgctcattagaaagaaagcatagcaatctaatctaagttttaattacaaa600<210>37<211>1005<212>DNA<213>酿酒酵母()<400>37atggaagctaagattgacgaattgatcaacaacgaccctgtctggtcctctcaaaacgaa60tctttgatctccaagccatacaaccacatcttgttgaagccaggtaagaacttcagatta120aacttgattgttcaaatcaacagagttatgaacttgccaaaggaccaattggccattgtt180tcccaaattgtcgaattgttgcacaactcctctctattgatcgatgacattgaagataat240gctccattaagaagaggtcaaaccacttctcatttgattttcggtgtcccatccaccatc300aacactgctaactacatgtacttcagagccatgcaattggtttctcaattgaccaccaag360gaaccattataccacaacttgatcactatctttaacgaagaattgattaacttgcaccgt420ggtcaaggtttggacatctactggagagatttcttgccagaaattattccaactcaagaa480atgtacttgaacatggtcatgaacaagactggtggtttattcagattgactttacgtttg540atggaagctttgtctccatcttcccaccacggtcactctttggttccattcatcaatcta600ttaggtatcatctaccaaatcagagatgattacttgaacttgaaggacttccaaatgtcc660tctgaaaagggtttcgctgaagatatcactgaaggtaaattgtctttcccaattgtccac720gccttgaactttaccaagaccaagggtcaaactgaacaacacaacgaaattttgagaatc780ttattgttgagaacttctgacaaggacatcaagttgaaattgatccaaatcttggaattc840gataccaactctttggcttacaccaagaacttcatcaaccaattggttaacatgatcaag900aatgacaacgaaaacaaatacttgccagacttggcttcccactccgataccgctaccaac960ttgcacgacgaattgttgtacattattgaccatttgtctgagtta1005<210>38<211>301<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScGmp1终止子<400>38agtctgaagaatgaatgatttgatgatttctttttccctccatttttcttactgaatata60tcaatgatatagacttgtatagtttattatttcaaattaagtagctatatatagtcaaga120taacgtttgtttgacacgattacattattcgtcgacatcttttttcagcctgtcgtggta180gcaatttgaggagtattattaattgaataggttcattttgcgctcgcataaacagttttc240gtcagggacagtatgttggaatgagtggtaattaatggtgacatgacatgttatagcaat300a301<210>39<211>600<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScPgk1启动子<400>39gggccagaaaaaggaagtgtttccctccttcttgaattgatgttaccctcataaagcacg60tggcctcttatcgagaaagaaattaccgtcgctcgtgatttgtttgcaaaaagaacaaaa120ctgaaaaaacccagacacgctcgacttcctgtcttcctattgattgcagcttccaatttc180gtcacacaacaaggtcctagcgacggctcacaggttttgtaacaagcaatcgaaggttct240ggaatggcgggaaagggtttagtaccacatgctatgatgcccactgtgatctccagagca300aagttcgttcgatcgtactgttactctctctctttcaaacagaattgtccgaatcgtgtg360acaacaacagcctgttctcacacactcttttcttctaaccaagggggtggtttagtttag420tagaacctcgtgaaacttacatttacatatatataaacttgcataaattggtcaatgcaa480gaaatacatatttggtcttttctaattcgtagtttttcaagttcttagatgctttctttt540tctcttttttacagatcatcaaggaagtaattatctactttttacaacaaatataaaaca600<210>40<211>1001<212>DNA<213>人工序列()<220><223>Klprom12启动子<400>40cgtaaaaactaaaacgagcccccaccaaagaacaaaaaagaaggtgctgggcccccactt60tcttcccttgcacgtgataggaagatggctacagaaacaagaagatggaaatcgaaggaa120agagggagactggaagctgtaaaaactgaaatgaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaacaa180gaagctgaaaatggaagactgaaatttgaaaaatggtaaaaaaaaaaaagaaacacgaag240ctaaaaacctggattccattttgagaagaagcaagaaaggtaagtatggtaacgaccgta300caggcaagcgcgaaggcaaatggaaaagctggagtccggaagataatcatttcatcttct360tttgttagaacagaacagtggatgtccctcatctcggtaacgtattgtccatgccctaga420actctctgtccctaaaaagaggacaaaaacccaatggtttccccagcttccagtggagcc480accgatcccactggaaaccactggacaggaagagaaaatcacggacttcctctattgaag540gataattcaacactttcaccagatcccaaatgtcccgcccctattcccgtgttccatcac600gtaccataacttaccatttcatcacgttctctatggcacactggtactgcttcgactgct660ttgcttcatcttctctatgggccaatgagctaatgagcacaatgtgctgcgaaataaagg720gatatctaatttatattattacattataatatgtactagtgtggttattggtaattgtac780ttaattttgatatataaagggtggatctttttcattttgaatcagaattggaattgcaac840ttgtctcttgtcactattacttaatagtaattatatttcttattaaccttttttttaagt900caaaacaccaaggacaagaactactcttcaaaggtatttcaagttatcatacgtgtcaca960cacgcttcacagtttcaagtaaaaaaaaagaatattacaca1001<210>41<211>2229<212>DNA<213>甜叶菊()<400>41atgtgtaaagctgtttccaaggaatactctgacttgttgcaaaaggatgaagcctccttc60accaaatgggatgatgacaaagttaaggaccatttagacactaacaagaacttgtaccca120aacgatgaaatcaaggaattcgtcgaatctgtcaaagctatgttcggttccatgaatgat180ggtgaaatcaacgtttccgcttacgacaccgcttgggttgctttggttcaagacgttgat240ggttccggttctccacaattcccatcttctttggaatggattgccaacaaccaattgtct300gatggttcttggggtgaccatttgttattctctgctcacgacagaattattaacacttta360gcttgtgtcattgctttgacttcctggaatgtccatccatccaagtgtgaaaagggtttg420aacttcttgagagaaaacatctgtaagttggaagatgaaaatgctgaacacatgccaatt480ggtttcgaagttaccttcccatctttgattgatatcgccaagaagttgaacatcgaagtc540ccagaagacaccccagctttgaaggaaatctacgccagaagagatatcaagttgaccaaa600atcccaatggaagttttgcacaaggttccaaccaccttgttgcactctttggaaggtatg660ccagacttggaatgggaaaagttgttaaagttgcaatgtaaggacggttctttcttgttc720tctccatcttctaccgcctttgctttgatgcaaactaaggacgaaaagtgtctacaatac780ttaactaatatcgttaccaaattcaacggtggtgtcccaaacgtttaccctgttgacttg840tttgaacacatctgggttgttgacagattgcaacgtttgggtattgctcgttatttcaag900tctgaaatcaaggactgtgttgaatacatcaacaagtactggactaagaacggtatctgt960tgggctcgtaacacccacgttcaagatatcgacgacactgctatgggtttcagagtcttg1020agagctcatggttacgatgtcaccccagatgtcttcagacaattcgaaaaggatggtaag1080ttcgtttgttttgccggtcaatccactcaagccgtcactggtatgttcaacgtctacaga1140gcttctcaaatgttgttcccaggtgaaagaatcctagaagacgctaagaagttctcctac1200aactacttgaaagaaaagcaatctactaacgaattgttggacaaatggatcattgccaaa1260gacttaccaggtgaagtcggttacgctttggatattccatggtacgcttctctaccaaga1320ttagaaaccagatactacttggaacaatacggtggtgaagacgatgtctggatcggtaag1380accttgtacagaatgggttacgtttccaacaacacttacttggaaatggccaaattggac1440tacaacaactacgtcgccgtcttacaattggaatggtacaccattcaacaatggtacgtt1500gacattggtattgaaaagtttgaatccgacaacatcaagtccgtcttggtttcctactac1560ttggctgctgcttccatctttgaaccagaaagatccaaggaaagaattgcttgggctaag1620accaccatcttggttgacaagatcacttctattttcgactcttcccaatcttccaaggaa1680gatatcaccgctttcattgacaaattcagaaacaagtcttcttccaagaagcactccatt1740aacggtgaaccatggcacgaagttatggttgctttgaagaagactttgcacggttttgct1800ttggatgctttgatgactcactctcaagatattcaccctcaattacaccaagcttgggaa1860atgtggttaaccaagttgcaagatggtgtcgatgtcactgctgaattgatggttcaaatg1920atcaacatgactgccggtagatgggtttctaaggaattgttgactcaccctcaataccaa1980cgtttgtccaccgtcaccaactctgtctgtcacgacatcactaagttgcacaacttcaaa2040gaaaactccactactgtcgattctaaggttcaagaattggttcaattagttttctctgac2100accccagatgacttggaccaagacatgaagcaaactttcttgactgtcatgaagaccttc2160tactacaaggcttggtgtgacccaaacaccatcaacgaccatatttctaaggtcttcgaa2220attgttatc2229<210>42<211>2271<212>DNA<213>甜叶菊()<400>42atgacttctcacggtggtcaaaccaacccaaccaacttgattattgacaccaccaaggaa60agaatccaaaagcaattcaagaatgttgaaatctccgtttcctcctacgacactgcttgg120gttgccatggttccatctccaaactccccaaagtctccatgtttcccagaatgtttgaac180tggttaatcaacaaccaattgaacgatggttcctggggtttagtcaatcacacccacaac240cacaatcacccattgttgaaggactctctatcctccactttggcttgtatcgttgctttg300aagagatggaacgttggtgaagaccaaatcaacaagggtttgtcctttattgaatccaac360ttggcttctgctactgaaaagtcccaaccatctcctatcggttttgacatcattttccca420ggtttattggaatacgctaagaacttggacatcaacttattatctaagcaaaccgatttc480tccttgatgttgcacaagagagaattggaacaaaagagatgtcactccaacgaaatggac540ggttacttggcttacatttctgaaggtttgggtaacttgtacgactggaacatggtcaag600aaataccaaatgaagaacggttccgttttcaactctccatctgctaccgctgctgctttc660atcaaccatcaaaacccaggttgtttgaactacttgaactctttgttggacaaattcggt720aacgctgttccaactgtctacccacacgatttgtttatcagattatccatggttgacacc780attgaacgtttgggtatttctcatcacttcagagtcgaaatcaagaacgttttggatgaa840acttacagatgttgggttgaaagagatgaacaaatcttcatggatgtcgtcacttgtgcc900ttggccttcagattattgagaattaacggttacgaagtttctccagacccattggctgaa960atcactaacgaattggctttgaaggacgaatacgccgctttggaaacttaccatgcctct1020cacatcttataccaagaagacttgtcctctggtaagcaaatcttgaagtctgctgacttc1080ttgaaggaaattatctctactgattctaacagattgtccaagttgattcacaaggaagtt1140gaaaacgccttgaaattcccaatcaacactggtttggaaagaattaacaccagaagaaac1200atccaattatacaacgttgacaacactagaatcttgaagactacttatcactcttccaac1260atctccaacactgactacttgagattggctgtcgaagatttctacacctgtcaatctatt1320tacagagaagaattgaagggtttggaaagatgggttgtcgaaaacaaattggaccaattg1380aaatttgctagacaaaagaccgcctactgttacttctccgttgctgccactttgtcctct1440ccagaattatctgacgccagaatctcctgggctaagaatggtatcttgaccaccgttgtc1500gatgacttcttcgatattggtggtaccattgacgaattgaccaacttgattcaatgtgtt1560gaaaagtggaacgtcgatgtcgataaggactgttgttctgaacacgtcagaatcttattc1620ttggctttgaaagatgctatctgttggatcggtgacgaagctttcaaatggcaagctcgt1680gacgttacctctcacgtcatccaaacctggttggaattgatgaactctatgttgagagaa1740gccatctggacccgtgatgcttacgtcccaactttgaacgaatacatggaaaatgcttac1800gtttctttcgctttgggtccaattgtcaagcctgctatttacttcgttggtccaaagttg1860tccgaagaaattgttgaatcttctgaataccacaacttgttcaaattgatgtctactcaa1920ggtcgtttgttgaacgatatccactctttcaagcgtgaattcaaggaaggtaagttgaat1980gctgttgctttgcatttgtctaacggtgaatctggtaaggtcgaagaagaagttgtcgaa2040gaaatgatgatgatgatcaagaacaagagaaaggaattgatgaagttgatctttgaagaa2100aacggttctattgtcccaagagcttgtaaggatgctttctggaacatgtgtcacgtcttg2160aacttcttctacgctaacgatgacggtttcactggtaacaccatcttagacaccgtcaag2220gacatcatttacaacccattagtcttggttaacgaaaacgaagaacaaaga2271<210>43<211>301<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScTal1终止子<400>43aggaagtatctcggaaatattaatttaggccatgtccttatgcacgtttcttttgatact60tacgggtacatgtacacaagtatatctatatatataaattaatgaaaatcccctatttat120atatatgactttaacgagacagaacagttttttattttttatcctatttgatgaatgata180cagtttcttattcacgtgttatacccacaccaaatccaatagcaataccggccatcacaa240tcactgtttcggcagcccctaagatcagacaaaacatccggaaccaccttaaatcaacgt300c301<210>44<211>1575<212>DNA<213>藤仓赤霉菌()<400>44atgtccaagtctaactccatgaactccacttctcacgaaactttattccaacaattggtt60ttgggtttggacagaatgccattgatggatgtccactggttgatctacgttgctttcggt120gcttggttatgttcctacgtcattcacgttttgtcctcttcttctaccgtcaaggttcca180gttgtcggttacagatccgttttcgaaccaacctggttattgagattaagatttgtctgg240gaaggtggttccattattggtcaaggttacaacaaattcaaggactctatcttccaagtc300agaaagttgggtactgacattgttatcatcccaccaaactacatcgatgaagtcagaaag360ttgtcccaagacaagaccagatctgttgaaccattcatcaacgatttcgctggtcaatac420accagaggtatggtctttctacaatctgatttgcaaaaccgtgtcatccaacaaagattg480actccaaagttggtttctttgactaaggtcatgaaggaagaattggactacgctttgacc540aaggaaatgccagacatgaagaacgacgaatgggttgaagttgacatttcttccatcatg600gtcagattgatctccagaatctctgcccgtgttttcttgggtccagaacactgtcgtaac660caagaatggttgaccaccactgctgaatactctgaatctttattcatcactggtttcatc720ttgagagttgtcccacacatcttaagaccattcattgctccattgttgccttcttacaga780actttgttgagaaatgtctcttctggtagaagagttatcggtgatatcatcagatctcaa840caaggtgatggtaacgaagatatcttgtcctggatgagagatgctgctaccggtgaagaa900aagcaaattgacaacattgctcaaagaatgttgatcttgtctttggcttccattcacacc960accgccatgaccatgacccatgccatgtacgacttgtgtgcctgtccagaatacattgaa1020ccattacgtgacgaagtcaaatccgttgttggtgcttctggttgggacaagactgctttg1080aacagattccacaagttggactctttcttgaaggaatctcaaagattcaacccagttttc1140ttgttgactttcaacagaatctaccatcaatccatgactttgtccgatggtaccaacatt1200ccatctggtaccagaattgctgttccatctcacgctatgttgcaagattctgctcacgtt1260ccaggtccaactcctccaactgaatttgacggtttcagatactccaagatcagatctgac1320tctaactatgctcaaaagtacttgttctccatgaccgattcttccaacatggctttcggt1380tacggtaagtacgcttgtccaggtcgtttctacgcctccaacgaaatgaaattgactttg1440gccattttgttgttgcaatttgaattcaaattgccagatggtaagggtagaccaagaaac1500atcactatcgactctgacatgattccagacccaagagctagattatgtgtcagaaagaga1560tctctacgtgacgaa1575<210>45<211>301<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScTpi1终止子<400>45agattaatataattatataaaaatattatcttcttttctttatatctagtgttatgtaaa60ataaattgatgactacggaaagcttttttatattgtttctttttcattctgagccactta120aatttcgtgaatgttcttgtaagggacggtagatttacaagtgatacaacaaaaagcaag180gcgctttttctaataaaaagaagaaaagcatttaacaattgaacacctctatatcaacga240agaatattactttgtctctaaatccttgtaaaatgtgtacgatctctatatgggttactc300a301<210>46<211>403<212>DNA<213>人工序列()<220><223>Aglox_TEF1启动子<400>46taccgttcgtataatgtatgctatacgaagttatgtccccgccgggtcacccggccagcg60acatggaggcccagaataccctccttgacagtcttgacgtgcgcagctcaggggcatgat120gtgactgtcgcccgtacatttagcccatacatccccatgtataatcatttgcatccatac180attttgatggccgcacggcgcgaagcaaaaattacggctcctcgctgcagacctgcgagc240agggaaacgctcccctcacagacgcgttgaattgtccccacgccgcgcccctgtagagaa300atataaaaggttaggatttgccactgaggttcttctttcatatacttccttttaaaatct360tgctaggatacagttctcacatcacatccgaacataaacaaca403<210>47<211>810<212>DNA<213>人工序列()<220><223>KANMX<400>47atgggtaaggaaaagactcacgtttcgaggccgcgattaaattccaacatggatgctgat60ttatatgggtataaatgggctcgcgataatgtcgggcaatcaggtgcgacaatctatcga120ttgtatgggaagcccgatgcgccagagttgtttctgaaacatggcaaaggtagcgttgcc180aatgatgttacagatgagatggtcagactaaactggctgacggaatttatgcctcttccg240accatcaagcattttatccgtactcctgatgatgcatggttactcaccactgcgatcccc300ggcaaaacagcattccaggtattagaagaatatcctgattcaggtgaaaatattgttgat360gcgctggcagtgttcctgcgccggttgcattcgattcctgtttgtaattgtccttttaac420agcgatcgcgtatttcgtttggctcaggcgcaatcacgaatgaataacggtttggttgat480gcgagtgattttgatgacgagcgtaatggctggcctgttgaacaagtctggaaagaaatg540cataagcttttgccattctcaccggattcagtcgtcactcatggtgatttctcacttgat600aaccttatttttgacgaggggaaattaataggttgtattgatgttggacgagtcggaatc660gcagaccgataccaggatcttgccatcctatggaactgcctcggtgagttttctccttca720ttacagaaacggctttttcaaaaatatggtattgataatcctgatatgaataaattgcag780tttcatttgatgctcgatgagtttttctaa810<210>48<211>285<212>DNA<213>人工序列()<220><223>AgTef1_lox终止子<400>48atcagtactgacaataaaaagattcttgttttcaagaacttgtcatttgtatagtttttt60tatattgtagttgttctattttaatcaaatgttagcgtgatttatattttttttcgcctc120gacatcatctgcccagatgcgaagttaagtgcgcagaaagtaatatcatgcgtcaatcgt180atgtgaatgctggtcgctatactgctgtcgattcgatactaacgccgccatccagtgtcg240aaaacgagctcataacttcgtataatgtatgctatacgaacggta285<210>49<211>1575<212>DNA<213>拟南芥()<400>49atggaatctttagtcgttcacaccgtcaatgccatctggtgtattgtcattgttggtatt60ttctctgttggttaccacgtttacggtcgtgccgttgttgaacaatggagaatgagaaga120tctttgaaattgcaaggtgtcaagggtccaccaccatccattttcaacggtaatgtctct180gaaatgcaaagaatccaatctgaagctaagcactgttccggtgacaacatcatttctcac240gattactcctcctctttgttccctcactttgaccactggagaaagcaatacggtagaatc300tacacctactccactggtttgaaacaacatttgtacatcaaccatccagaaatggtcaag360gaattatctcaaaccaacactttgaacttaggtcgtatcactcacatcaccaagagattg420aacccaatcttaggtaacggtatcatcacttccaacggtccacactgggctcatcaaaga480agaattattgcttacgaattcacccacgacaaaatcaagggtatggtcggtttgatggtc540gaatctgccatgccaatgttgaacaaatgggaagaaatggttaagagaggtggtgaaatg600ggttgtgacatccgtgttgacgaagatttgaaggatgtttctgctgatgtcattgctaag660gcttgtttcggttcctctttctccaagggtaaggctatcttctccatgatcagagacttg720ttgactgccatcactaagagatctgttttgttcagattcaacggtttcaccgacatggtt780ttcggttccaagaagcatggtgatgtcgatatcgatgctttggaaatggaattggaatct840tctatctgggaaaccgttaaggaaagagaaattgaatgtaaggacactcacaagaaggat900ttgatgcaattaatcttggaaggtgccatgagatcttgtgacggtaacttgtgggacaag960tctgcttacagaagatttgttgtcgacaactgtaaatccatctactttgccggtcacgac1020tctactgctgtctccgtttcctggtgtttgatgttgctagctttgaacccatcctggcaa1080gtcaagatcagagatgaaatcttatcttcttgtaagaacggtattccagatgctgaatcc1140attccaaacttgaagaccgttaccatggtcattcaagaaactatgagattgtacccacca1200gctccaattgtcggtagagaagcttccaaggacatcagattaggtgacttggttgttcca1260aagggtgtttgtatctggactttgattccagctttgcaccgtgacccagaaatctggggt1320ccagatgctaacgacttcaagccagaaagattctctgaaggtatttccaaggcttgtaaa1380tacccacaatcttacatcccattcggtttgggtccaagaacctgtgtcggtaagaacttc1440ggtatgatggaagtcaaagttttggtttctttgattgtttccaagttctctttcaccttg1500tctccaacttaccaacactctccatctcacaagttgttggttgaacctcaacacggtgtt1560gtcattagagtcgtt1575<210>50<211>1000<212>DNA<213>人工序列()<220><223>Klprom6启动子<400>50caaagggggggcagggacagggatacgacaagggctggggaaaaaaaaaaagatagatac60gattggccgggtaagcctggggaaatgtagcaagtgcgggtaagttaaaaggtaaccacg120tgactccggaagagtcacgtggttacggacttttttctctagatctcagctttttatcgg180tcttaccctgccctcctgccccctgccccttccctttgccccaaaaagaaaggaaatctg240ttggatttcgctcaggccatccctttcgttaatatcggttatcgctttacacactgcaca300tccttctgtccaaaaggaatccagaagtttagcttttccttcctttcccacagacattag360cctaggccctctctcatcatttgcatgcctcagccaatgtaccaagaataacgcaacgag420gttgggaaattttaacccaacaatcgatgcagatgtgacaagagattagacacgttccag480ataccagattacacagcttgtgctagcagagtgacatatggtggtgttgtgtctcgttta540gtacctgtaatcgagagtgttcaaatcagtcgatttgaacacccttactgccactgaata600ttgattgaataccgtttattgaaggttttatgagtgatcttctttcggtccaggacaatt660tgttgagctttttctatgtagagttccgtcccttttttttttttttttgctttctcgcac720ttactagcactatttttttttcacacactaaaacactttattttaatctatatatatata780tatatatatatgtaggaatggaatcacagacatttgatactcatcctcatccttattaat840tcttgttttaatttgtttgacttagccaaaccaccaatctcaacccatcgtatttcaggt900attgtgtgtctagtgtgtctctggtatacggaaataagtgccagaagtaaggaagaaaca960aagaacaagtgtctgaatactactagcctctcttttcata1000<210>51<211>2133<212>DNA<213>拟南芥()<400>51atgtcctcttcttcttcttcttctacttccatgattgatttgatggctgccatcatcaag60ggtgaaccagtcattgtctctgacccagccaacgcttctgcttacgaatccgttgctgct120gaattgtcctccatgttgattgaaaacagacaattcgctatgattgtcactacttccatt180gctgtcttgattggttgtatcgtcatgttggtctggagaagatccggttccggtaactcc240aagagagttgaaccattgaagccattagtcatcaagccaagagaagaagaaattgatgac300ggtagaaagaaggtcaccatcttctttggtactcaaaccggtactgctgaaggttttgct360aaggctttgggtgaagaagccaaagctagatacgaaaagaccagattcaagatcgttgac420ttggacgactacgctgctgatgacgacgaatacgaagaaaagttgaagaaggaagatgtt480gccttcttcttcttggctacttacggtgatggtgaaccaactgacaatgctgccagattc540tacaaatggttcaccgaaggtaacgacagaggtgaatggttaaagaacttgaaatacggt600gttttcggtctaggtaacagacaatacgaacacttcaacaaggttgccaaggttgtcgat660gacatcttggttgaacaaggtgctcaaagattagtccaagtcggtttgggtgatgatgac720caatgtatcgaagatgacttcactgcttggagagaagctttgtggccagaattggacacc780atcttaagagaagaaggtgataccgctgttgccaccccatacactgctgctgttttggaa840tacagagtttctatccacgactctgaagatgccaagttcaacgacatcaacatggctaac900ggtaacggttacactgttttcgacgctcaacacccatacaaggccaatgttgctgtcaag960agagaattgcacactccagaatctgatcgttcttgtatccacttggaatttgacattgct1020ggttctggtttgacctacgaaaccggtgaccacgtcggtgtcttatgtgacaacttgtct1080gaaactgtcgatgaagctttgagattattggacatgtctccagacacttatttctccttg1140catgctgaaaaggaagatggtactccaatttcttcttccttgcctcctccattcccacca1200tgtaacttgagaaccgctttaaccagatacgcttgtttgctatcctctccaaagaagtcc1260gctttggttgctttggctgctcacgcttctgacccaactgaagctgaaagattgaaacat1320ttggcttccccagctggtaaggatgaatactccaaatgggttgttgaatctcaaagatct1380ttgttggaagtcatggctgaattcccatctgccaagccaccattgggtgttttcttcgcc1440ggtgttgctccaagattgcaaccaagattttactccatctcttcttctccaaagattgct1500gaaaccagaattcacgttacctgtgccttggtctacgaaaagatgccaaccggtagaatt1560cacaagggtgtttgttccacctggatgaagaacgctgttccatacgaaaagtctgaaaac1620tgttcttctgctccaatcttcgtccgtcaatccaacttcaagttgccatctgactccaag1680gtcccaatcatcatgatcggtccaggtactggtttagctccattcagaggtttcttgcaa1740gaaagattggccttagttgaatctggtgtcgaattgggtccttctgttttgttcttcggt1800tgtagaaaccgtcgtatggacttcatctacgaagaagaattgcaaagatttgtcgaatct1860ggtgctttggctgaattgtccgttgctttctctcgtgaaggtccaaccaaagaatacgtt1920caacacaagatgatggacaaagcctccgacatctggaacatgatctcccaaggtgcttac1980ttgtacgtttgtggtgatgctaaaggtatggccagagatgtccacagatctttacatacc2040attgcccaagaacaaggttccatggactccaccaaggctgaaggtttcgttaagaacttg2100caaacttctggtcgttacttgagagatgtttgg2133<210>52<211>301<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScPdc1终止子<400>52agcgatttaatctctaattattagttaaagttttataagcatttttatgtaacgaaaaat60aaattggttcatattattactgcactgtcacttaccatggaaagaccagacaagaagttg120ccgacagtctgttgaattggcctggttaggcttaagtctgggtccgcttctttacaaatt180tggagaatttctcttaaacgatatgtatattcttttcgttggaaaagatgtcttccaaaa240aaaaaaccgatgaattagtggaaccaaggaaaaaaaaagaggtatccttgattaaggaac300a301<210>53<211>1000<212>DNA<213>人工序列()<220><223>Klprom3启动子<400>53gagcctgtccaagcaaatgccttctcataaatggtgccaaagacccgcaagcccaaagca60attaccccccaaaaagaaatgatatagtgcaagatacgtatatgaccatgacttgactag120gtgaaacagtgcagaaacagccgcacaaaagcagccctaaccctcagagtcgattttact180ctttcaggtaataaagcctcgacatcaattttagacagaagccaggctggcctcgagatt240atagccataggcaagcaagaggagagaaggggaggccccccatggggggcctcccccccg300ctgtcaaggtttggcagaacctagcttcattaggccactagcccagcctaaaacgtcaac360gggcaggaggaacactcccacaagacggcgtagtattctcgattcataaccattttctca420atcgaattacacagaacacaccgtacaaacctctctatcataactacttaatagtcacac480acgtactcgtctaaatacacatcatcgtcctacaagttcatcaaagtgttggacagacaa540ctataccagcatggatctcttgtatcggttcttttctcccgctctctcgcaataacaatg600aacactgggtcaatcatagcctacacaggtgaacagagtagcgtttatacagggtttata660cggtgattcctacggcaaaaatttttcatttctaaaaaaaaaaagaaaaatttttctttc720caacgctagaaggaaaagaaaaatctaattaaattgatttggtgattttctgagagttcc780ctttttcatatatcgaattttgaatataaaaggagatcgaaaaaatttttctattcaatc840tgttttctggttttatttgatagtttttttgtgtattattattatggattagtactggtt900tatatgggtttttctgtataacttctttttattttagtttgtttaatcttattttgagtt960acattatagttccctaactgcaagagaagtaacattaaaa1000<210>54<211>1443<212>DNA<213>甜叶菊()<400>54atggacgctatggccaccactgaaaagaagcctcacgttatctttattccattcccagct60caatctcatatcaaggctatgttgaaattggctcaattattgcaccacaagggtttgcaa120atcacttttgtcaacaccgacttcattcacaaccaattcttggaatcttctggtcctcac180tgtttggacggtgctccaggtttcagattcgaaaccattccagatggtgtttcccactct240ccagaagcctccatcccaatcagagaatccttgttgagatctattgaaaccaacttcttg300gaccgtttcatcgatttggttaccaaattgccagacccaccaacctgtatcatttctgac360ggtttcttgtccgttttcaccatcgatgctgccaagaaattgggtattccagtcatgatg420tactggactttggctgcttgtggtttcatgggtttctaccatattcactctttgattgaa480aagggtttcgctccattaaaggatgcttcttacttgaccaacggttacttggacaccgtc540attgactgggttccaggtatggaaggtatcagattgaaagatttcccattggactggtct600actgacttgaatgacaaggtcttgatgttcactactgaagctccacaaagatctcataag660gtttctcaccacatcttccacactttcgatgaattagaaccatctatcatcaagactcta720tccttgagatacaaccatatctacaccattggtccattacaattgttgttggaccaaatc780ccagaagaaaagaagcaaaccggtatcacttctttgcacggttactctttagtcaaggaa840gaaccagaatgtttccaatggttacaatccaaggaaccaaactctgttgtctacgttaac900tttggttccaccactgttatgtccttggaagatatgactgaatttggttggggtttggct960aactctaaccactacttcttatggatcatcagatctaacttggtcattggtgaaaacgcc1020gttttgcctccagaattggaagaacacatcaagaagagaggtttcattgcttcctggtgt1080tctcaagaaaaggtcttgaagcacccatctgttggtggtttcttgacccactgtggttgg1140ggttccaccattgaatccctatctgctggtgttccaatgatctgttggccatactcctgg1200gaccaattgactaactgtcgttacatctgtaaggaatgggaagttggtttggaaatgggt1260actaaggtcaagagagatgaagtcaagagattagtccaagaattgatgggtgaaggtggt1320cacaagatgagaaacaaagccaaggactggaaggaaaaggccagaattgctattgctcca1380aacggttcttcctccttgaacatcgataaaatggttaaggaaatcactgtcttggctcga1440aac1443<210>55<211>301<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScTDH1终止子<400>55aataaagcaatcttgatgaggataatgatttttttttgaatatacataaatactaccgtt60tttctgctagattttgtgaagacgtaaataagtacatattactttttaagccaagacaag120attaagcattaactttacccttttctcttctaagtttcaatactagttatcactgtttaa180aagttatggcgagaacgtcggcggttaaaatatattaccctgaacgtggtgaattgaagt240tctaggatggtttaaagatttttcctttttgggaaataagtaaacaatatattgctgcct300t301<210>56<211>1000<212>DNA<213>人工序列()<220><223>Klprom2启动子<400>56gagcctgtccaagcaaatgccttctcataaatggtgccaaagacccgcaagcccaaagca60attaccccccaaaaagaaatgatatagtgcaagatacgtatatgaccatgacttgactag120gtgaaacagtgcagaaacagccgcacaaaagcagccctaaccctcagagtcgattttact180ctttcaggtaataaagcctcgacatcaattttagacagaagccaggctggcctcgagatt240atagccataggcaagcaagaggagagaaggggaggccccccatggggggcctcccccccg300ctgtcaaggtttggcagaacctagcttcattaggccactagcccagcctaaaacgtcaac360gggcaggaggaacactcccacaagacggcgtagtattctcgattcataaccattttctca420atcgaattacacagaacacaccgtacaaacctctctatcataactacttaatagtcacac480acgtactcgtctaaatacacatcatcgtcctacaagttcatcaaagtgttggacagacaa540ctataccagcatggatctcttgtatcggttcttttctcccgctctctcgcaataacaatg600aacactgggtcaatcatagcctacacaggtgaacagagtagcgtttatacagggtttata660cggtgattcctacggcaaaaatttttcatttctaaaaaaaaaaagaaaaatttttctttc720caacgctagaaggaaaagaaaaatctaattaaattgatttggtgattttctgagagttcc780ctttttcatatatcgaattttgaatataaaaggagatcgaaaaaatttttctattcaatc840tgttttctggttttatttgatagtttttttgtgtattattattatggattagtactggtt900tatatgggtttttctgtataacttctttttattttagtttgtttaatcttattttgagtt960acattatagttccctaactgcaagagaagtaacattaaaa1000<210>57<211>1380<212>DNA<213>甜叶菊()<400>57atggctgaacaacaaaagatcaagaaatctccacacgtcttgttgattccattcccattg60caaggtcacatcaacccattcatccaattcggtaagagattgatttccaagggtgtcaag120accactttagtcaccactattcacactttaaactccactttaaaccactctaacactact180accacctctattgaaatccaagccatttctgacggttgtgacgaaggtggtttcatgtct240gctggtgaatcttacttggaaactttcaagcaagtcggttccaagtctttggctgatttg300atcaagaaattgcaatccgaaggtactaccatcgatgctatcatctacgactccatgact360gaatgggttttggatgttgccattgaatttggtattgacggtggttctttcttcacccaa420gcctgtgttgttaactctttgtactaccacgtccacaagggtttgatctctctaccatta480ggtgaaaccgtttccgtcccaggtttcccagtcttgcaaagatgggaaactccattgatc540ttacaaaaccatgaacaaatccaatctccatggtcccaaatgttgtttggtcaattcgct600aacattgaccaagctagatgggttttcaccaactctttctacaagttggaagaagaagtc660attgaatggaccagaaagatctggaacttgaaggttatcggtccaactctaccatccatg720tacttggacaagagattggatgacgacaaggacaacggtttcaacttgtacaaggctaac780catcacgaatgtatgaactggttggatgacaagccaaaggaatctgttgtttacgttgct840ttcggttctttggtcaagcatggtccagaacaagttgaagaaatcaccagagctttgatt900gactccgatgttaacttcttatgggttatcaagcacaaggaagaaggtaaattgccagaa960aacttgtctgaagttatcaagaccggtaagggtttgattgttgcttggtgtaagcaattg1020gatgttttggctcacgaatccgtcggttgtttcgtcactcactgtggtttcaactctact1080ttggaagctatctccttgggtgttccagttgttgccatgcctcaattctctgaccaaacc1140accaacgccaaattgttggatgaaatcttgggtgtcggtgtccgtgtcaaggctgatgaa1200aacggtattgttagaagaggtaacttagcttcctgtatcaagatgatcatggaagaagaa1260cgtggtgtcattatcagaaagaatgctgtcaaatggaaggacttggctaaggttgctgtc1320cacgaaggtggttcctctgacaatgacattgttgaatttgtctctgaattgatcaaagcg1380<210>58<211>1374<212>DNA<213>甜叶菊()<400>58atggaaaacaagactgaaaccactgttagaagaagaagaagaatcatcttattcccagtt60ccattccaaggtcacattaacccaatcttgcaattggctaacgtcttatactccaagggt120ttctccatcaccatcttccacaccaacttcaacaaacctaaaacttccaactacccacac180ttcaccttcagatttatcttggacaacgacccacaagatgaaagaatttctaacttgcca240acccatggtccattggccggtatgagaattccaatcatcaacgaacacggtgctgacgaa300ttgagaagagaattggaattgttgatgttggcttctgaagaagatgaagaagtctcttgt360ttgatcactgatgctttatggtactttgctcaatctgttgctgactctttgaacttgaga420agattagtcttgatgacctcttctttgttcaacttccacgctcacgtttctctaccacaa480tttgatgaattgggttacttggacccagatgacaagaccagattggaagaacaagcctcc540ggtttcccaatgttgaaggtcaaggatatcaagtctgcctactccaactggcaaatcttg600aaggaaattttgggtaagatgatcaagcaaaccaaggcttcttctggtgtcatctggaac660tccttcaaggaattggaagaatctgaattggaaaccgtcatcagagaaattccagctcca720tctttcttgattccattaccaaagcatttgactgcttcctcctcttctctattggaccac780gacagaactgttttccaatggttggaccaacaaccaccatcttccgtcttatacgtttcc840tttggttccacttctgaagttgacgaaaaggacttcttggaaattgctcgtggtttggtt900gactccaagcaatctttcttatgggttgtcagaccaggtttcgtcaagggttccacctgg960gttgaacctttgccagacggtttcttgggtgaaagaggtagaattgtcaaatgggttcca1020caacaagaagttttggctcacggtgccattggtgctttctggactcactctggttggaac1080tctactttggaatccgtttgtgaaggtgttccaatgattttctctgacttcggtttggac1140caaccattgaatgctcgttacatgtccgatgttttgaaggttggtgtctacttggaaaac1200ggttgggaacgtggtgaaattgctaacgccatcagaagagtcatggtcgatgaagaaggt1260gaatacatcagacaaaatgctcgtgtcttgaaacaaaaggctgatgtttctttgatgaag1320ggtggttcttcttacgaatctttggaatctttggtttcctacatctccagtctc1374<210>59<211>602<212>DNA<213>人工序列()<220><223>ScEno1终止子<400>59aagcttttgattaagccttctagtccaaaaaacacgtttttttgtcatttatttcatttt60cttagaatagtttagtttattcattttatagtcacgaatgttttatgattctatataggg120ttgcaaacaagcatttttcattttatgttaaaacaatttcaggtttaccttttattctgc180ttgtggtgacgcgtgtatccgcccgctcttttggtcacccatgtatttaattgcataaat240aattcttaaaagtggagctagtctatttctatttacatacctctcatttctcatttcctc300caagcttttgattaagccttctagtccaaaaaacacgtttttttgtcatttatttcattt360tcttagaatagtttagtttattcattttatagtcacgaatgttttatgattctatatagg420gttgcaaacaagcatttttcattttatgttaaaacaatttcaggtttaccttttattctg480cttgtggtgacgcgtgtatccgcccgctcttttggtcacccatgtatttaattgcataaa540taattcttaaaagtggagctagtctatttctatttacatacctctcatttctcatttcct600cc602<210>60<211>600<212>DNA<213>酿酒酵母()<400>60ccgcggaaccgccagatattcattacttgacgcaaaagcgtttgaaataatgacgaaaaa60gaaggaagaaaaaaaaagaaaaataccgcttctaggcgggttatctactgatccgagctt120ccactaggatagcacccaaacacctgcatatttggacgacctttacttacaccaccaaaa180accactttcgcctctcccgcccctgataacgtccactaattgagcgattacctgagcggt240cctcttttgtttgcagcatgagacttgcatactgcaaatcgtaagtagcaacgtgtcaag300gtcaaaactgtatggaaaccttgtcacctcacttaattctagctagcctaccctgcaagt360caagaggtgtccgtgattcctagccacctcaaggtatgcctctccccggaaactgtggcc420ttttctggcacacatgatctccacgatttcaacatataaatagcttttgataatggcaat480attaatcaaatttattttacttctttcttgtaacatctctcttgtaatcccttattcctt540ctagctatttttcataaaaaaccaagcaactgcttatcaacacacaaacactaaatcaaa600<210>61<211>301<212>DNA<213>乳酸克鲁维酵母()<400>61aattactcttttaagttaacgaacgcttttgatgagactaacgatatttcaagtgattcc60attttttacttctaagtttttatcacctttatcttaaccattctatgccagtctttgctt120tatggactttgattcaaattatgaagggaagtttttacgccaaataaaaactactacaac180aaattattaaaaaaaatgacgaataatatgaagtgtctaacgactgccaaaattattcat240tccttttttatacacataaccatttcacttcatttactggtttgagtggtttattacgtc300g301<210>62<211>803<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>62taccaaccacagattacgacccattcgcagtcacagttcactagggtttgggttgcatcc60gttgagagtggtttgtttttaaccttctccatgtgctcactcaggttttgggttcagatc120aaatcaaggcgtgaaccactgtttgaggacaaatgtgacacaaccaaccagtgtcagggg180caagtccgtgacaaaggggaagatacaatgcaattactgacagttacggactgcctcgat240gccctaaccttgccccaaaataagacaactgtcctcgtttaagcgcaaccctattcagcg300tcacgtcataatagcgtttggatagcactagtctatgaggagcgttttatgttgcggtga360gggcgattggtgctcatatgggttcaattgaggtggtggaacgagcttagtcttcaattg420aggtgcgagcgacacaattgggtgtcacgtggcctaattgacctcggatcgtggagtccc480cagttatacagcaaccacgaggtgcatgagtaggagacgtcaccagacaatagggttttt540ttggactggagagggtagggcaaaagcgctcaacgggctgtttggggagctatgggggag600gaattggcgatatttgtgaggttgacggctccgatttgcgtgttttgtcgcttctgcatc660tccccatacccatatcttccctccccacctctttccacgataattttacggatcagcaat720aaggttccttctcctagtttccacgtccatatatatctatgctgcgtcgtccttttcgtg780acatcaccaaaacacatacaaaa803<210>63<211>995<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>63ctgtacctgctgtggaccacgcacggcggaacgtaccgtacaaatattttcttgctcaca60tgactctctctcggccgcgcacgccggtggcaaattgctcttgcattggctctgtctcta120gacgtccaaaccgtccaaagtggcagggtgacgtgatgcgacgcacgaaggagatggccc180ggtggcgaggaaccggacacggcgagccggcgggaaaaaaggcggaaaacgaaaagcgaa240gggcacaatctgacggtgcggctgccaccaacccaaggaggctattttgggtcgctttcc300atttcacattcgccctcaatggccactttgcggtggtgaacatggtttctgaaacaaccc360cccagaattagagtatattgatgtgtttaagattgggttgctatttggccattgtggggg420agggtagcgacgtggaggacattccagggcgaattgagcctagaaagtggtaccattcca480accgtctcagtcgtccgaattgatcgctataactatcacctctctcacatgtctacttcc540ccaaccaacatccccaacctcccccacactaaagttcacgccaataatgtaggcactctt600tctgggtgtgggacagcagagcaatacggaggggagattacacaacgagccacaattggg660gagatggtagccatctcactcgacccgtcgacttttggcaacgctcaattacccaccaaa720tttgggctggagttgaggggaccgtgttccagcgctgtaggaccagcaacacacacggta780tcaacagcaaccaacgcccccgctaatgcacccagtactgcgcaggtgtgggccaggtgc840gttccagatgcgagttggcgaaccctaagccgacagtgtactttttgggacgggcagtag900caatcgtgggcggagaccccggtgtatataaaggggtggagaggacggattattagcacc960aacacacacacttatactacatgctagccacaaaa995<210>64<211>1004<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>64gtcagaaggggcagctctaaacgaagaactgcggtcaggtgacacaactttttccatctc60agggtgtgtcgcgtgtgcttcatccaaactttagttggggttcgggttcgcgcgagatga120tcacgtgccctgatttggtgtcgtcccccgtcgcgctgcgcacgtgatttatttatttcc180ggtggctgctgtctacgcggggccttctctgcccttctgtttcaaccttcgggcggttct240cgtaaccagcagtagcaatccatttcgaaactcaaagagctaaaaacgttaaacctcagc300agtcgctcgacgaatgggctgcggttgggaagcccacgaggcctatagccagagcctcga360gttgacaggagcccagacgccttttccaacggcaacttttatataaaatggcaatgtatt420catgcaattgcggccgtgtcaggttggagacactggaccacactctccattgcttcctga480ggagatggatcattgctagtgcatctacgcgcagcaatcccgcaagctcgacaaccgtag540atgggctttggtgggccaatcaattacgcaacccgcacgttaaattgtatgaggaaggaa600ggccacggtacaaagtgggtggtcttcacccagtggttgttggtggcgtcatgcagacca660tgcattggggatagcacagggttggggtgtcttgtggactcaatgggtgaaaggagatgg720aaaagggcggtgaaaagtggtagaatcgaaatccctgacgtcaatttataaagtaaaatg780cgtttctgccattttgctcccctccttctttcgcaatcgcctccccaaaagttgtcgtgg840cagtacacatgcttgcatacaatgaagctaatccggcttgctcagtagttgctatatcca900ggcatggtgtgaaacccctcaaagtatatataggagcggtgagccccagtctggggtctt960ttctctccatctcaaaactactttctcacatgctagccacaaaa1004<210>65<211>1422<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>65atttcttgtgtgtgcggcaaacgtagcaattgcaactgcataaacgatgattgtaaaagt60atcacactttgctcagacaggttagattcacctggtacgagggcagtgtcttaaaggttc120catctacctcggcccttgtttcttgaagagtggtcaatatgtgttttatacagctgaaat180ttcccctgtatgttgagatcgtgtatattggtcataatctgggctctttagtcgatccca240gttttctcgggcaagtttttttctccacaaagtaccgctggaaaactctatgtgacttgt300tgacagattacttgggttatctgcgggatatgtcttggataggcaaccgggcatatatca360ccgggcggactgttggttctgtacgtacatacagcactttgagctcatgtctcacacgca420accatggtgcgtggaggctttggcatcctttctacttgtagtggctatagtacttgcagt480ccaagcaaacatgagtatgtgcttgtatgtactgaaacccgtctacggtaatattttaga540gtgtggaactatgggatgagtgctcattcgatactatgttgtcacccgatttgccgtttg600cgaggtaagacacattcggtggttcaggcggctacttgtatgtagcatccacgttcatgt660tttgtggatcagattaatggtatggatatgcacggggcgtttccccggtaacgtgtaggc720agtccagtgcaacccagacagctgagctctctatagccgtgcgtgtgcggtcatatcacg780ctacacttagctacagaataaagctcggtagcgccaacagcgttgacaaatagctcaagg840gcgtggagcacagggtttaggaggttttaatgggcgagaaggcgcgtagatgtagtcttc900ctcggtcccatcggtaatcacgtgtgtgccgatttgcaagacgaaaagccacgagaataa960accgggagaggggatggaagtccccgaacagcaaccagcccttgccctcgtggacataac1020ctttcacttgccagaactctaagcgtcaccacggtatacaagcgcacgtagaagattgtg1080gaagtcgtgttggagactgttgatttgggcggtggaggggggtatttgagagcaagtttg1140agatttgtgccattgagggggaggttattgtggccatgcagtcggatttgccgtcacggg1200accgcaacatgcttttcattgcagtccttcaactatccatctcacctcccccaatggctt1260ttaactttcgaatgacgaaagcacccccctttgtacagatgactatttgggaccaatcca1320atagcgcaattgggtttgcatcatgtataaaaggagcaatcccccactagttataaagtc1380acaagtatctcagtatacccgtctaaccacacatttatcacc1422<210>66<211>865<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>66atgctcacttttgttgtcctgatgatctcccgttatttcgccgctcctctggaaaccatc60cgcccgcaaatcccctctgcccatcttgacaatgcacaatgcatcattctcagcctgcat120gaatgcgaaagatggcaatattggtggaggaggcgacggcggtaaacaatggagatagag180accacaaaagagacctggagacccaaaatggactcacgacaactcccccactcccccact240ccccatctccccctgggcatcagttgcccatcggtatctcaactgtcgcactagttagcg300caaccatcacatactttagacgccaaacaatgggacaactcatcgcgccgaactatgggc360agattttaactcgcacaacattaccccaactctaaaaggtaacctcgaccggaaaacggg420aagacaggatcagcaaccgtgatcgacagaatcttcagggcactacagttgatagacata480ggttatgttggtaggtctagacgggcctcggggaattgaccccaccagttgcaagtcacg540tgcccctgatacagctagtttagcacatctgcccactacgtctggacgcaccatggtggt600gccagtcgcgtgaactcaaacacccactagcctcgggaaggattcagttaaatccgcacc660ttatttccaacacaaagaagcggttggcggacaaagaacatgtcctttctggggcactgt720acattccaggactctgttcaaggtcaaatatacaaaacacagatagagaaacatagacag780ctgcggccttataaatacctgggcgcacttctctctttttccctcctcatcacacattcg840ttcaccactaagtcactcgttcaaa865<210>67<211>880<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>67aaacaaaagagctgaaatcatatccttcagtagtagtatagtcctgttatcacagcatca60attacccccgtccaagtaagttgattgggatttttgtttacagatacagtaatatacttg120actatttctttacaggtgactcagaaagtgcatgttggaaatgagccacagaccaagaca180agatatgacaaaattgcactattcgatgcagaattcgacggtgtttccattggtgttatg240acattcatctgcattcatacaaaaaagtcttggtagtggtacttttgcgttattacctcc300gatatctacgcaccccccaacccccctgctacagtaaagagtgtgagtctactgtacatg360cttactaaaccacctactgtacagcgaaacccctcagcaaaatcacacaatcagctcatt420acaacacacccaatgacctcaccacaaattctatacgccttttgacgccattattacagt480agcttgcaacgccgttgtcttaggttccatttttagtgctctattacctcacttaacccg540tataggcagatcaggccatggcactaagtgtagagctagaggttgatatcgccacgagtg600ctccatcagggctagggtggggttagaaatacagtccgtgcgcactcaaaaggcgtccgg660gttagggcatccgataatatcgcctggactcggcgccatattctcgacttctgggcgcgt720tgtattcatctcctccgcttcccaacacttccacccgtttctccatcccaaccaatagaa780tagggtaaccttattcgggacactttcgtcatacatagtcagatatacaagcaatgtcac840tctccttcgtactcgtacatacaacacaactacattcaaa880<210>68<211>1000<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>68caattcatgtatcgtgtcaattcatgtatcgtgtcaattcatgtatcgtgtcaatactta60tatctcaagtggttgcatcgcaaacagccatcgcatactccactctactctcactgagtt120cactcttacccggctccaccttctagaagccaccaccgatccaccgacgatgatcagtcc180accacttgctctgaatgtgcgttggagctgcaccatgattgatgacgtcaccgccattca240gatagggcaaaagacgagcgccaatcgcaacaatgggcgagtgtcgacgactcccccgct300ctctgcggtttcagcgactccaaccgtcgccaaaagaccgtcattttcgtctaaagcgca360gcccagcccatctcttctaaaagattccagaaagatagggttcaccaactacgcaccaat420atgtacagtatcgtagctactccggcttggctgatctgagagatagagatggctccgaaa480cgcggaaaacggcggggtcggaccgatcacgtgacacgtactcatccgtcgcgccccgag540cgccatttcaacaccaaatactcccggtcacgtgccaccccgcccgctctacccacgaga600tgtttctacactatacactgccacgccgtcatacctgcagctaggttaacattcgattaa660ttagtggagtcaccagtgtacaggactatggcggaaaccgggttacacaaaccggcccgg720aatagcagcattataccgctggacgagatcaccgtcaataaattgcgtcgttactcggga780caaccattgctcctccggctacacctgctcaaaggacttgttccacactcttccccagct840ctcccacgcaaacaaagagagcaaccttaagtggacagctcatgagcactcccctcgttt900gctgcccacgctcgattatataaagaccagcggatccccttctatttggacttgcatcaa960ccaaccacaacccacaccaagcacacaaagcacaagaaca1000<210>69<211>127<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>69aattaacagatagtttgccggtgataattctcttaacctcccacactcctttgacataac60gatttatgtaacgaaactgaaatttgaccagatattgttgtaaatagaaaatctggcttg120taggtgg127<210>70<211>200<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>70gttttttgatcaatgatccaatggctttcacatacccccccacgcctataattaaaacac60agagaaatataatctaacttaataaatattacggagaatctttcgagtgttcagcagaaa120tatagccattgtaacaaaagccggctatcgaccgctttatcgaagaatatttcccgcccc180ccagtggccaaacgatatcg200<210>71<211>200<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>71ctatccgaagatcaagagcgaagcaagttgtaagtccaggacatgtttcccgcccacgcg60agtgatttataacacctctcttttttgacacccgctcgccttgaaattcatgtcacataa120attatagtcaacgacgtttgaataacttgtcttgtagttcgatgatgatcatatgattac180attaatagtaattactgtat200<210>72<211>200<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>72acttcgagctaatccagtagcttacgttacccaggggcaggtcaactggctagccacgag60tctgtcccaggtcgcaatttagtgtaataaacaatatatatattgagtctaaagggaatt120gtagctattgtgattgtgtgattttcgtcttgctggttcttattgtgtcccattcgtttc180atcctgatgaggacccctgg200<210>73<211>200<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>73gctatttacagcatgtgtaatgaggaatataacgttgattgaattgtttgtgaaaaatgt60agaaaatttcagtgaagttgtgttttctatatagtaagcacttttggtacaagtatctgc120acatccctgcatgttacaagcctgatcatgcagggcaatattctgactataaatatacct180cgatattttagcaagctata200<210>74<211>300<212>DNA<213>解脂耶氏酵母()<400>74atgtggtgattgctgttgtgcaagcctttgctcgttttctgctgtatgtaatttaaagaa60cgattgtatgaatcgaagtcaaggtgagtgtagtttgagaagtgtaaccccagtgtcata120gctgtgtactccattcattgaagggtgtagtcgtgttttattgcatgagcgcctattact180cgtataagtaactgttttgtaacacttcatgaacggagatggtatgaacagaagtaataa240tatcctggaagtcagctgtgcccagaggtgtgtgtgggtgtggcatactttgggacaaca300<210>75<211>1503<212>DNA<213>人工序列()<220><223>tHMGCpO用于解脂耶氏酵母<400>75atgacccagtctgtgaaggtggttgagaagcacgttcctatcgtcattgagaagcccagc60gagaaggaggaggacacctcttctgaagactccattgagctgactgtcggaaagcagccc120aagcccgtgaccgagacccgttctctggacgacttggaggctatcatgaaggcaggtaag180accaagctcctggaggaccacgaggttgtcaagctctctctcgaaggcaagctccctttg240tatgctcttgagaagcagcttggtgacaacacccgagctgttggcatccgacgatctatc300atctcccagcagtctaataccaagactcttgagacctcaaagctcccttacctgcactac360gactacgaccgtgtttttggagcctgttgcgagaacgttattggttacatgcctctcccc420gttggtgttgctggccccatgaacattgatggcaagaactaccacattcctatggccacc480actgagggttgtcttgttgcctcaaccatgcgaggttgcaaggccatcaacgccggtggc540ggtgttaccactgtgcttactcaggacggtatgacacgaggtccttgtgtttccttcccc600tctctcaagcgggctggagccgctaagatctggcttgattccgaggagggtctcaagtcc660atgcgaaaggccttcaactccacctctcgatttgctcgtctccagtctcttcactctacc720cttgctggtaacctgctgtttattcgattccgaaccaccactggtgatgccatgggcatg780aacatgatctccaagggcgtcgaacactctctggccgtcatggtcaaggagtacggcttc840cctgatatggacattgtgtctgtctcgggtaactactgcactgacaagaagcccgcagcg900atcaactggatcgaaggccgaggcaagagtgttgttgccgaagccaccatccctgctcac960attgtcaagtctgttctcaaaagtgaggttgacgctcttgttgagctcaacatcagcaag1020aatctgatcggtagtgccatggctggctctgtgggaggtttcaatgcacacgccgcaaac1080ctggtgaccgccatctaccttgccactggccaggatcctgctcagaatgtcgagtcttcc1140aactgcatcacgctgatgagcaacgtcgacggtaacctgctcatctccgtttccatgcct1200tctatcgaggtcggtaccattggtggaggtactattttggagccccagggtgctatgctg1260gagatgcttggcgtgcgaggtcctcacatcgagacccccggtgccaacgcccaacagctt1320gctcgcatcattgcttctggagttcttgcagcggagctttcgctgtgttctgctcttgct1380gccggccatcttgtgcaaagtcatatgacccacaaccgttcccaggctcctactccggcc1440aagcagtctcaggccgatctgcagcgtctccaaaacggttcgaatatctgcattcggtca1500tag1503<210>76<211>984<212>DNA<213>人工序列()<220><223>GGSCpO用于解脂耶氏酵母<400>76atggattataacagcgcggatttcaaggagatctggggcaaggccgccgacaccgcgctg60ctgggaccgtacaactacctcgccaacaaccggggccacaacatcagagaacacttgatc120gcagcgttcggagcggttatcaaggtggacaagagcgatctcgaaaccatttcgcacatc180accaagattttgcataactcgtcgctgcttgttgatgacgtggaagacaactcgatgctc240cgacgaggcctgccggcagcccattgtctgtttggagtcccccaaaccatcaactccgcc300aactacatgtactttgtggctctgcaggaggtgctcaagctcaagtcttatgatgccgtc360tccattttcaccgaggaaatgatcaacttgcatagaggtcagggtatggatctctactgg420agagaaacactcacttgcccctcggaagacgagtatctggagatggtggtgcacaagacc480ggaggactgtttcggctggctctgagacttatgctgtcggtggcatcgaaacaggaggac540catgaaaagatcaactttgatctcacacaccttaccgacacactgggagtcatttaccag600attctggatgattacctcaacctgcagtccacggaattgaccgagaacaagggattctgc660gaagatatcagcgaaggaaagttttcgtttccgctgattcacagcatccggaccaacccg720gataaccacgagattctcaacattctcaaacagcgaacaagcgacgcttcactcaaaaag780tacgccgtggactacatgagaacagaaaccaagagtttcgactactgcctcaagagaatc840caggccatgtcactcaaggcaagttcgtacattgatgatctcgcagcagccggccacgat900gtctccaagttgcgagccattttgcattattttgtgtccacctctgactgtgaggagaga960aagtactttgaggatgcgcagtga984<210>77<211>1446<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT1CpO用于解脂耶氏酵母<400>77atggacgccatggccaccaccgagaagaagccccacgtcatcttcatccccttccccgcc60cagtcccacatcaaggccatgctcaagctcgcccagctcctccaccacaagggcctccag120atcacctttgtcaacaccgacttcatccacaaccagttcctcgagtcctccggcccccac180tgtctggacggtgctcccggtttccgatttgagactatccccgatggtgtctcccactcc240cccgaggcctccatccccatccgagagtctctgctccgatccattgagactaacttcctc300gaccgattcattgatctcgtcaccaagctccccgatcctcccacctgtatcatctccgac360ggtttcctgtccgttttcaccattgatgctgccaagaagctcggtatccccgtcatgatg420tactggactctggctgcctgtggtttcatgggtttctaccacatccactctctgatcgag480aagggctttgctcctctcaaggacgcctcctacctcaccaacggttacctcgacaccgtc540attgactgggtccccggtatggagggtatccgactcaaggacttccccctcgactggtcc600accgacctcaacgacaaggttctcatgttcaccaccgaggctccccagcgatcccacaag660gtttcccaccacatcttccacaccttcgacgagctcgagccctccatcatcaagactctg720tctctgcgatacaaccacatctacaccattggccccctccagctcctcctcgaccagatc780cccgaggagaagaagcagaccggtatcacctctctgcacggctactctctcgtcaaggaa840gagcccgagtgcttccagtggctccagtccaaggagcccaactccgttgtctacgtcaac900tttggctccaccaccgtcatgtctctcgaggacatgaccgagtttggctggggtctggcc960aactccaaccactacttcctgtggatcatccgatccaacctcgtcattggcgagaacgcc1020gttctgcctcccgagctcgaggagcacatcaagaagcgaggcttcattgcctcttggtgc1080tcccaggagaaggttctcaagcacccctccgtcggtggtttcctgacccactgcggctgg1140ggctccaccattgagtctctgtccgctggtgtccccatgatctgctggccctactcctgg1200gaccagctcaccaactgccgatacatctgcaaggagtgggaggttggtctggagatgggt1260accaaggtcaagcgagatgaggtcaagcgactcgtccaggagctcatgggcgagggtggt1320cacaagatgcgaaacaaggccaaggactggaaggagaaggcccgaattgccattgccccc1380aacggctcttcttctctcaacattgacaagatggtcaaggagatcactgttctcgctcga1440aactaa1446<210>78<211>1383<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT3CpO用于解脂耶氏酵母<400>78atggccgagcagcagaagatcaagaagtctccccacgttctgctcatccccttccctctg60cagggccacatcaaccccttcatccagttcggcaagcgactcatctccaagggtgtcaag120accactctggtcaccaccatccacaccctcaactccactctcaaccactccaacaccacc180accacctccatcgagatccaggccatctccgacggctgtgacgagggtggtttcatgtct240gctggtgagtcttacctcgagactttcaagcaggtcggttccaagtctctggctgacctc300atcaagaagctccagtccgagggtaccaccattgacgccatcatctacgactccatgacc360gagtgggttctcgatgtcgccatcgagtttggtattgacggtggctccttcttcacccag420gcctgtgtcgtcaactctctctactaccacgtccacaagggtctgatctctctgcccctc480ggcgagactgtctccgtccccggtttccccgttctgcagcgatgggagactcctctcatt540ctccagaaccacgagcagatccagtccccctggtcccagatgctcttcggccagttcgcc600aacattgaccaggcccgatgggttttcaccaactccttctacaagctcgaggaagaggtc660attgagtggacccgaaagatctggaacctcaaggtcattggccccaccctcccctccatg720tacctcgacaagcgactcgatgacgacaaggacaacggtttcaacctctacaaggccaac780caccacgagtgcatgaactggctcgacgacaagcccaaggagtccgttgtctacgttgcc840tttggctctctggtcaagcacggccccgagcaggttgaggagatcacccgagctctgatt900gactccgatgtcaacttcctgtgggtcatcaagcacaaggaagagggtaagctccccgag960aacctgtccgaggtcatcaagaccggcaagggcctcattgttgcctggtgcaagcagctc1020gacgttctcgcccacgagtccgtcggctgctttgtcacccactgcggtttcaactccacc1080ctcgaggctatctctctcggtgtccccgttgttgccatgccccagttctccgaccagacc1140accaacgccaagctcctcgatgagattctcggtgtcggtgtccgagtcaaggctgacgag1200aacggtattgtccgacgaggtaacctggcttcttgtatcaagatgatcatggaggaagag1260cgaggtgtcatcatccgaaagaacgccgtcaagtggaaggatctggccaaggttgctgtc1320cacgagggtggctcttccgacaacgacattgtcgagtttgtctccgagctcatcaaggcc1380taa1383<210>79<211>1377<212>DNA<213>人工序列()<220><223>UGT4CpO用于解脂耶氏酵母<400>79atggagaacaagaccgagactaccgtccgacgacgacgacgaatcattctcttccccgtc60cccttccagggccacatcaaccccattctgcagctcgccaacgttctgtactccaagggc120ttctccatcaccatcttccacaccaacttcaacaagcccaagacctccaactacccccac180ttcactttccgattcatcctcgacaacgacccccaggacgagcgaatctccaacctgccc240acccacggtcctctggctggtatgcgaatccccatcatcaacgagcacggtgctgacgag300ctccgacgagagctcgagctgctcatgctcgcctccgaagaggacgaggaagtctcctgt360ctgatcaccgatgctctgtggtactttgcccagtccgtcgccgactctctcaacctgcga420cgactcgttctcatgacctcctctctgttcaacttccacgcccacgtttctctgccccag480tttgacgagctcggttacctcgaccccgatgacaagacccgactcgaggagcaggcttcc540ggtttccccatgctcaaggtcaaggacatcaagtccgcctactccaactggcagattctc600aaggagattctcggcaagatgatcaagcagaccaaggcctcctccggtgtcatctggaac660tccttcaaggagctcgaggagtccgagctcgagactgtcatccgagagatccccgctccc720tctttcctcatccccctgcccaagcacctcaccgcttcctcctcttctctgctcgaccac780gaccgaaccgtctttcagtggctcgaccagcagcccccttcctccgtcctctacgtttcc840ttcggctccacctccgaggtcgacgagaaggacttcctcgagattgctcgaggcctcgtt900gactccaagcagtccttcctgtgggttgtccgacccggctttgtcaagggctccacctgg960gttgagcccctgcccgatggtttcctcggtgagcgaggccgaattgtcaagtgggtcccc1020cagcaggaagttctggcccacggtgccattggtgccttctggacccactccggctggaac1080tccactctcgagtccgtctgcgagggtgtccccatgatcttctccgactttggcctcgac1140cagcccctcaacgcccgatacatgtccgatgttctcaaggtcggtgtctacctcgagaac1200ggctgggagcgaggtgagattgccaacgccatccgacgagtcatggtcgacgaggaaggt1260gagtacatccgacagaacgcccgagtcctcaagcagaaggccgatgtctctctcatgaag1320ggtggttcttcttacgagtctctcgagtctctcgtttcctacatctcttctttgtaa1377<210>80<211>2232<212>DNA<213>人工序列()<220><223>tCPS_SRCpO用于解脂耶氏酵母<400>80atgtgcaaggctgtttccaaggagtactccgatctgctccagaaggacgaggcctctttc60accaagtgggacgacgacaaggtcaaggaccacctcgacaccaacaagaacctctacccc120aacgacgagatcaaggagtttgtcgagtccgtcaaggccatgttcggctccatgaacgac180ggcgagattaatgtctctgcttacgacaccgcctgggttgctctggtccaggatgtcgac240ggttccggctctcctcagttcccttcctctctcgagtggatcgccaacaaccagctgtcc300gacggttcttggggtgaccacctgctcttctctgctcacgaccgaatcatcaacaccctg360gcctgtgtcattgctctgacctcttggaacgtccacccctccaagtgcgagaagggtctg420aacttcctccgagagaacatctgcaagctcgaggacgagaacgccgagcacatgcccatt480ggcttcgaggtcaccttcccctctctgattgacattgccaagaagctcaacattgaggtc540cccgaggacacccccgctctcaaggagatctacgctcgacgagacatcaagctcaccaag600atccccatggaggttctccacaaggtccccaccactctcctccactctctcgagggtatg660cccgatctcgagtgggagaagctgctcaagctgcagtgcaaggacggctctttcctcttc720tccccctcttccactgccttcgccctcatgcagaccaaggacgagaagtgtctccagtac780ctcaccaacattgtcaccaagttcaacggtggtgtccccaacgtctaccccgttgacctc840tttgagcacatctgggttgttgaccgactccagcgactcggtatcgcccgatacttcaag900tccgagatcaaggactgtgtcgagtacatcaacaagtactggaccaagaacggtatctgc960tgggcccgaaacacccacgtccaggacattgacgacaccgccatgggcttccgagttctg1020cgagcccacggctacgatgtcacccccgatgtctttcgacagtttgagaaggacggcaag1080tttgtctgtttcgccggtcagtccacccaggccgtcaccggtatgttcaacgtctaccga1140gcttctcagatgctcttccccggtgagcgaatcctcgaggacgccaagaagttctcctac1200aactacctcaaggagaagcagtccaccaacgagctgctcgacaagtggatcattgccaag1260gatctgcccggtgaggttggctacgccctcgacatcccctggtacgcctctctgccccga1320ctggagactcgatactacctcgagcagtacggtggtgaggacgatgtctggatcggtaag1380accctgtaccgaatgggctacgtttccaacaacacctacctcgagatggccaagctcgac1440tacaacaactacgttgccgtcctccagctcgagtggtacaccatccagcagtggtacgtc1500gacattggtatcgagaagttcgagtccgacaacatcaagtccgtccttgtctcctactac1560ctcgctgctgcctccatcttcgagcccgagcgatccaaggagcgaattgcctgggccaag1620accaccatcctcgtcgacaagatcacctccatcttcgactcctcccagtcctccaaggaa1680gatatcaccgccttcattgacaagttccgaaacaagtcctcctccaagaagcactccatc1740aacggcgagccctggcacgaggtcatggttgctctcaagaaaactctccacggctttgcc1800ctcgacgctctgatgacccactctcaggacatccacccccagctccaccaggcctgggag1860atgtggctcaccaagctccaggacggtgttgatgtcactgctgagctcatggtccagatg1920atcaacatgaccgccggccgatgggtttccaaggagctcctcacccacccccagtaccag1980cgactctccactgtcaccaactctgtctgccacgacatcaccaagctccacaacttcaag2040gagaactccaccaccgtcgactccaaggtccaggagctggtccagctcgttttctccgac2100acccccgatgatctcgaccaggacatgaagcagaccttcctgactgtcatgaaaactttc2160tactacaaggcctggtgcgaccccaacaccatcaacgaccacatctccaaggtctttgag2220attgtgatttaa2232<210>81<211>2274<212>DNA<213>人工序列()<220><223>tKS-SRCpO用于解脂耶氏酵母<400>81atgacctcccacggcggccagaccaaccccaccaacctcatcattgacaccaccaaggag60cgaatccagaagcagttcaagaacgtcgagatctccgtttcctcctacgacaccgcctgg120gtcgccatggtcccctctcccaactcccccaagtctccctgcttccccgagtgtctcaac180tggctcatcaacaaccagctcaacgacggctcttggggtctggtcaaccacacccacaac240cacaaccaccccctcctcaaggactctctctcttccactctcgcctgcattgttgctctc300aagcgatggaacgttggcgaggaccagatcaacaagggtctgtctttcattgagtccaac360ctcgcctccgccaccgagaagtcccagccctcccccattggctttgatatcatcttcccc420ggtctgctcgagtacgccaagaacctcgatatcaacctgctctccaagcagaccgacttc480tctctcatgctgcacaagcgagagctcgagcagaagcgatgccactccaacgagatggac540ggctacctggcctacatttccgagggtctgggtaacctctacgactggaacatggtcaag600aagtaccagatgaagaacggttccgttttcaactccccctctgccaccgctgctgccttc660atcaaccaccagaaccccggctgtctcaactacctcaactctctgctcgacaagtttggt720aacgccgtccccactgtctacccccacgatctcttcatccgactctccatggtcgacacc780attgagcgactcggtatttcccaccacttccgagtcgagatcaagaacgttctcgatgag840acttaccgatgctgggttgagcgagatgagcagatcttcatggacgttgtcacctgtgct900ctggccttccgactcctccgaatcaacggttacgaggtttcccccgaccccctcgccgag960atcaccaacgagctggctctcaaggacgagtacgccgccctcgagacttaccacgcttct1020cacattctgtaccaagaggatctgtcctccggcaagcagattctcaagtccgccgacttc1080ctcaaggagatcatctccactgactccaaccgactctccaagctcatccacaaggaagtc1140gagaacgctctcaagttccccatcaacaccggtctggagcgaatcaacacccgacgaaac1200atccagctctacaacgtcgacaacacccgaattctcaagaccacctaccactcttccaac1260atctccaacaccgactacctgcgactcgccgtcgaggacttctacacctgccagtccatc1320taccgagaggagctcaagggtctggagcgatgggttgtcgagaacaagctcgaccagctc1380aagtttgcccgacaaaagactgcctactgctacttctccgttgctgccaccctctcttct1440cccgagctctccgacgcccgaatctcttgggccaagaacggtatcctgaccactgttgtc1500gacgacttctttgacattggtggcaccattgacgagctgaccaacctcatccagtgcgtc1560gagaagtggaacgtcgacgttgacaaggactgttgttccgagcacgtccgaatcctcttc1620ctggctctcaaggacgccatctgctggatcggtgacgaggccttcaagtggcaggctcga1680gatgtcacttcccacgtcatccagacctggctcgagctcatgaactccatgctgcgagag1740gccatctggacccgagatgcctacgtccccaccctcaacgagtacatggagaacgcctac1800gtcagctttgctctcggtcccattgtcaagcccgccatctactttgtcggtcccaagctg1860tccgaggagattgtcgagtcctccgagtaccacaacctcttcaagctcatgtccacccag1920ggccgactcctcaacgatatccactccttcaagcgagagttcaaggaaggtaagctcaac1980gccgttgctctgcacctgtccaacggtgagtccggcaaggtcgaggaagaggtcgtcgag2040gagatgatgatgatgatcaagaacaagcgaaaggagctcatgaagctcatcttcgaggag2100aacggctccattgtcccccgagcctgcaaggacgccttctggaacatgtgccacgtcctc2160aacttcttctacgccaacgacgacggtttcaccggcaacaccattctcgacaccgtcaag2220gacatcatctacaaccctctggttctggtcaacgagaacgaggagcagaggtaa2274<210>82<211>1578<212>DNA<213>人工序列()<220><223>KAH_4CpO用于解脂耶氏酵母<400>82atggagtctctggttgtccacaccgtcaacgccatctggtgcattgtcattgtcggtatc60ttctccgtcggctaccacgtctacggccgagctgttgtcgagcagtggcgaatgcgacga120tctctcaagctccagggtgtcaagggtcctcctccctccatcttcaacggtaacgtttcc180gagatgcagcgaatccagtccgaggccaagcactgctccggtgacaacatcatctcccac240gactactcttcttctctgttcccccactttgaccactggcgaaagcagtacggccgaatc300tacacctactccactggcctcaagcagcacctctacatcaaccaccccgagatggtcaag360gagctctcccagaccaacaccctcaacctcggccgaatcacccacatcaccaagcgactc420aaccccattctcggtaacggtatcatcacctccaacggcccccactgggcccaccagcga480cgaatcattgcctacgagttcacccacgacaagatcaagggtatggtcggtctgatggtc540gagtccgccatgcccatgctcaacaagtgggaggagatggtcaagcgaggtggtgagatg600ggctgtgacatccgagtcgacgaggacctcaaggatgtctccgctgacgtcattgccaag660gcctgtttcggctcttccttctccaagggcaaggccatcttctccatgatccgagatctg720ctcaccgccatcaccaagcgatccgtcctcttccgattcaacggtttcaccgacatggtt780ttcggctccaagaagcacggtgacgttgacattgacgctctcgagatggagctcgagtcc840tccatctgggagactgtcaaggagcgagagattgagtgcaaggacacccacaagaaggac900ctcatgcagctcattctcgagggtgccatgcgatcttgtgacggtaacctgtgggacaag960tctgcttaccgacgattcgttgtcgacaactgcaagtccatctactttgccggccacgac1020tccaccgccgtttccgtttcttggtgcctcatgctgctcgctctcaacccctcttggcag1080gtcaagatccgagatgagattctgtcctcctgcaagaacggtatccccgacgccgagtcc1140atccccaacctcaagaccgtcaccatggtcatccaggagactatgcgactctaccctccc1200gctcccattgtcggccgagaggcctccaaggacattcgactcggtgatctggttgtcccc1260aagggtgtctgtatctggaccctcatccccgctctgcaccgagatcccgagatctggggt1320cccgacgccaacgacttcaagcccgagcgattctccgagggtatctccaaggcctgcaag1380tacccccagtcctacatcccctttggcctcggcccccgaacctgtgtcggcaagaacttt1440ggtatgatggaggtcaaggtcctcgtttctctgattgtctccaagttctccttcactctg1500tctcccacctaccagcactctccctcccacaagctgctcgtcgagccccagcacggtgtt1560gtcatccgagttgtataa1578<210>83<211>1578<212>DNA<213>人工序列()<220><223>KO_GibCpO用于解脂耶氏酵母<400>83atgtccaagtccaactccatgaactccacctcccacgagactctcttccagcagctcgtt60ctcggcctcgaccgaatgcccctcatggacgtccactggctcatctacgttgcctttggt120gcctggctctgctcctacgtcatccacgttctgtcctcttcctccactgtcaaggtcccc180gtcgtcggttaccgatccgttttcgagcccacctggctcctccgactgcgattcgtctgg240gagggtggttccatcattggccagggctacaacaagttcaaggactccatcttccaggtc300cgaaagctcggtaccgacattgtcatcatccctcccaactacattgacgaggtccgaaag360ctctcccaggacaagacccgatccgtcgagcccttcatcaacgactttgccggccagtac420acccgaggtatggtctttctgcagtccgatctccagaaccgagtcatccagcagcgactc480acccccaagcttgtctctctcaccaaggtcatgaaggaagagctcgactacgctctgacc540aaggagatgcccgacatgaagaacgacgagtgggttgaggtcgacatctcttccatcatg600gtccgactcatctctcgaatctccgcccgagttttcctcggccccgagcactgccgaaac660caggagtggctcaccaccaccgccgagtactccgagtctctcttcatcaccggcttcatc720ctccgagttgtcccccacattctccgacccttcattgctcctctgctgccctcttaccga780accctgctgcgaaacgtttcttccggccgacgagtcattggtgatatcatccgatcccag840cagggtgacggtaacgaggacatcctctcttggatgcgagatgctgccactggtgaggag900aagcagatcgacaacattgcccagcgaatgctcattctgtctctcgcctccatccacacc960accgccatgaccatgacccacgccatgtacgatctgtgtgcctgccccgagtacattgag1020cccctccgagatgaggtcaagtccgtcgttggtgcttctggctgggacaagaccgctctc1080aaccgattccacaagctcgactctttcctcaaggagtcccagcgattcaaccccgttttc1140ctgctcaccttcaaccgaatctaccaccagtccatgaccctctccgatggtaccaacatc1200ccctccggtacccgaattgctgtcccctctcacgccatgctccaggactccgcccacgtc1260cccggtcccactcctcccactgagttcgacggtttccgatactccaagatccgatccgac1320tccaactacgcccagaagtacctcttctccatgaccgactcttccaacatggcctttggc1380tacggtaagtacgcctgccccggccgattctacgcctccaacgagatgaagctgactctg1440gccattctgctcctccagtttgagttcaagctccccgacggtaagggccgaccccgaaac1500atcaccatcgactccgacatgatccccgacccccgagctcgactctgtgtccgaaagcga1560tctctgcgtgacgagtaa1578<210>84<211>2133<212>DNA<213>人工序列()<220><223>CPR_3CpO用于解脂耶氏酵母<400>84atgtcctcctcttcttcttcttccacctccatgattgatctcatggctgccatcatcaag60ggtgagcccgtcattgtctccgaccccgccaacgcctccgcctacgagtccgttgctgcc120gagctgtcctccatgctcatcgagaaccgacagtttgccatgatcgtcaccacctccatt180gctgttctcattggctgcattgtcatgctcgtctggcgacgatctggctccggtaactcc240aagcgagtcgagcccctcaagcccctggtcatcaagccccgagaagaggagatcgacgac300ggccgaaagaaggtcaccatcttctttggcacccagaccggtactgctgagggcttcgcc360aaggctctcggtgaggaagccaaggctcgatacgaaaagacccgattcaagattgtcgac420ctcgatgattacgctgccgatgacgacgagtacgaggagaagctcaagaaagaggacgtt480gccttcttcttcctcgccacctacggtgacggtgagcccaccgacaacgctgcccgattc540tacaagtggttcaccgagggtaacgaccgaggcgagtggctcaagaacctcaagtacggt600gttttcggtctgggcaaccgacagtacgagcacttcaacaaggttgccaaggttgtcgac660gacatcctcgtcgagcagggtgcccagcgactcgtccaggtcggcctcggtgatgatgac720cagtgcatcgaggacgacttcactgcctggcgagaggctctgtggcccgagctcgacacc780attctgcgagaggaaggtgacaccgccgttgccaccccctacaccgccgccgtcctcgag840taccgagtctccatccacgactccgaggatgccaagttcaacgacatcaacatggccaac900ggtaacggctacaccgtctttgacgcccagcacccctacaaggccaacgtcgccgtcaag960cgagagctccacacccccgagtccgaccgatcttgtatccacctcgagtttgacattgct1020ggttccggtctgacctacgagactggtgaccacgttggtgtcctctgtgacaacctgtcc1080gagactgtcgacgaggctctgcgactcctcgacatgtcccccgacacttacttctctctg1140cacgccgagaaagaggacggtactcccatctcttcttctctgccccctcccttccctccc1200tgcaacctgcgaaccgctctgacccgatacgcctgcctcctctcttctcccaagaagtct1260gctctcgttgctctggccgcccacgcctccgaccccaccgaggctgagcgactcaagcac1320ctcgcctctcccgctggcaaggacgagtactccaagtgggttgtcgagtcccagcgatct1380ctgctcgaggtcatggccgagttcccctccgccaagccccctctcggtgttttcttcgcc1440ggtgttgctccccgactccagccccgattctactccatctcctcttcccccaagatcgcc1500gagactcgaatccacgttacctgtgctctggtctacgagaagatgcccaccggccgaatc1560cacaagggtgtctgctccacctggatgaagaacgccgttccctacgagaagtccgagaac1620tgttcctctgctcccatctttgtccgacagtccaacttcaagctcccctccgactccaag1680gtccccatcatcatgattggccccggtaccggcctcgcccccttccgaggcttcctgcag1740gagcgactcgccctcgtcgagtccggtgtcgagctcggcccctccgtcctcttctttggc1800tgccgaaaccgacgaatggacttcatctacgaagaggagctccagcgattcgtcgagtcc1860ggtgctctcgccgagctctccgttgccttctcccgagagggtcccaccaaggagtacgtc1920cagcacaagatgatggacaaggcctccgacatctggaacatgatctcccagggcgcctac1980ctctacgtctgcggtgacgccaagggtatggcccgagatgtccaccgatctctgcacacc2040attgcccaggagcagggctccatggactccaccaaggccgagggtttcgtcaagaacctc2100cagacctccggccgatacctccgagatgtctgg2133...
当前第1页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1