吡咯并三嗪激酶抑制剂的制备方法

专利名称：吡咯并三嗪激酶抑制剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及具有激酶抑制剂活性的吡咯并三嗪药物化合物的制备方法，尤其涉及用于治疗激酶相关疾病的含吡咯并三嗪化合物的制备方法。具体地说，本发明涉及使用新的吡咯并三嗪环形成步骤制备化合物的吡咯并三嗪母核的方法。
背景技术：
本发明总的来讲涉及用作激酶抑制剂或者用作激酶抑制剂合成中的组分或前体的化合物的制备方法。
用作激酶抑制剂的吡咯并三嗪化合物公开于同时待审的2000年5月18日申请的美国专利申请第09/573,829号，该申请与本申请共同转让。用作激酶抑制剂的吡咯并三嗪化合物也公开于转让给受让人的美国专利6,670,357，以下每个同时待审的专利申请也与本申请共同转让2002年11月6日申请的美国专利申请第10/289,010号(美国公布号20030186982A1)、2003年3月22日申请的10/420,399(WO03/090912)、2003年4月22日申请的10/420,445(美国公布号20030232831A1)、2003年8月4日申请的10/633,997、2003年7月18日申请的10/623,171和2003年10月3日申请的10/678,388。
据报道有sPLA2-抑制活性的被酸性基团取代的吡咯并三嗪化合物，公开于盐野义制药株式会社2001年3月1日以日文公开的WO01/14378A1。本文引用的每个专利申请、专利和出版物的全部内容都通过引用结合到本文中。
最好，这类化合物的有效制备方法会利用市售原料以使成本最小化，也要在保持可接受的产物收率的同时减少对更高毒性反应剂的依赖。本文描述并要求保护这类方法。
式I的吡咯并三嗪 及其药物可接受的盐、溶剂合物和/或前药为有效的激酶抑制剂，其中R1和R2独立选自氢和烷基；R3连接在苯环上任何可利用的碳原子上，并且每次出现时独立选自氢、烷基、取代烷基、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷氧基和取代烷氧基；R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；R5为氢、烷基、芳基或杂芳基；R6为氢、烷基、芳基或杂芳基；R7和R8(i)独立选自氢、烷基或取代烷基、烯基或取代烯基、环烷基或取代环烷基、芳基或取代芳基、杂芳基或取代杂芳基以及杂环基或取代杂环基；或(ii)R7和R8可以与连接它们的氮原子结合在一起形成杂环基或取代杂环基或者杂芳基或取代杂芳基；所形成的所述基团任选含有额外的1个或2个杂原子；且
n为0、1或2。
它们具有通过抑制p38α和/或β酶和抑制TNF-α来治疗炎性疾病的用途。
WO 00/71129描述了1，4-二氢-5-烷基-4-氧代-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酸酯(合成式I吡咯并三嗪甲酰胺和苯甲酰胺化合物的关键中间体)的制备方法，即通过使迈克尔受体例如巴豆酸甲酯与甲苯磺酰甲基胩(TosMIC)的阴离子反应，得到4-甲基吡咯-3-甲酸甲酯。所得的4-甲基吡咯-3-甲酸甲酯用三氯乙酰氯在氯化铝存在下酰化，得到2-三氯乙酰基-3-甲基吡咯-4-甲酸甲酯。用甲醇钠处理2-三氯乙酰基-3-甲基吡咯-4-甲酸甲酯，产生3-甲基吡咯-2，4-二甲酸甲酯。用胺化剂如二苯基磷酰基羟胺N-氨基化3-甲基吡咯-2，4-二甲酸甲酯，得到1-氨基-3-甲基吡咯-2，4-二甲酸甲酯。最终，使1-氨基-3-甲基吡咯-2，4-二甲酸甲酯与甲酰胺在高温下反应，得到1，4-二氢-5-甲基-4-氧代-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酸甲酯(Hunt，J.T.；Bhide，R.S.；Borzilleri，R.M.；Qian L.WO00/71129，2000年11月30日)。尽管一些1，4-二氢-5-取代-4-氧代-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酸酯可由此方法制备，但是此方法由于其漫长的化学转化、危险胺化剂的使用和产物的昂贵色谱分离而受到限制。WO02/40486描述了改进的3-甲基吡咯-2，4-二甲酸酯的合成，该合成使乙醛与乙酸异氰基酯在DBU存在下缩合。该反应简短，然而，产生的副产物氰化物有安全方面的问题。已经报道了由阮内镍介导对6-乙基-1，2，4-三嗪-5-酮-3-硫酮脱硫制备6-乙基-1，2，4-三嗪-5-酮(Taft，W.E.；Shepherd，R.G.J.Med.Chem.(1967)，10，第883页)。
发明概述目前要求保护的发明涉及1，4-二氢-4-氧代-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酸酯的制备方法。该方法包括形成双环杂环体系的新方法。除非另有说明，所有的取代基如上所定义。
本发明第一方面包括下述步骤使下式的化合物II 其中R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；且R5为氢、烷基、芳基或杂芳基；与下式的化合物III反应 其中X为离去基团；R6为氢、烷基、芳基或杂芳基；得到下式的化合物IV 其中R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；R5为氢、烷基、芳基或杂芳基；且R6为氢、烷基、芳基或杂芳基。
在一个实施方案中，本发明第一方面的方法包括下述步骤
使下式的化合物II 其中R4为氢；R5为甲基；与下式的化合物III反应 其中R6为氢；且X为离去基团；得到下式的化合物IV 其中R4为氢；R5为甲基；且R6为氢。
在本发明的另一方面，公开了一种或多种药物活性式I化合物及其药物可接受的盐、溶剂合物和/或前药的制备方法
其中R1和R2独立选自氢和烷基；R3连接在苯环上任何可利用的碳原子上，并且每次出现时独立选自氢、烷基、取代烷基、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷氧基和取代烷氧基；R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；R5为氢、烷基、芳基或杂芳基；R6为氢、烷基、芳基或杂芳基；R7和R8(i)独立选自氢、烷基或取代烷基、烯基或取代烯基、环烷基或取代环烷基、芳基或取代芳基、杂芳基或取代杂芳基以及杂环基或取代杂环基；或(ii)R7和R8可以与连接它们的氮原子结合在一起形成杂环基或取代杂环基或者杂芳基或取代杂芳基；所形成的所述基团任选含有额外的1个或2个杂原子；且n为0、1或2，所述方法包括下述步骤(a)使下式的化合物II
其中R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；且R5为氢、烷基、芳基或杂芳基，与下式的化合物III反应 其中X为离去基团，R6为氢、烷基、芳基或杂芳基，得到下式的化合物IV 其中R4、R5和R6如上所定义，(b)使化合物IV与醇在偶联剂存在下进一步反应，生成下式的酯V 其中R为烷基、芳基或杂芳基，R4、R5和R6如上所定义；(c)使酯V与氯化剂在碱存在下反应，得到下式的化合物VI
其中R、R4、R5和R6如上所定义，(d)使化合物VI与下式的化合物VII反应 其中R1、R2和R3如上所定义，得到下式的化合物VIII 其中所有取代基如上所定义；和(e)使化合物VIII与胺NHR7R8在合适的溶剂或溶剂混合物中反应，得到式I的吡咯并三嗪甲酰胺和苯甲酰胺化合物。
通过本发明方法制备的化合物VIII的优选化合物如下所示
通过本发明方法制备的化合物I的优选化合物如下所示 发明详述除非另有说明，术语“烷基”是指具有1-12个碳原子、优选具有1-8个碳原子的直链或直链烃基。最优选低级烷基，即1-4个碳原子的烷基。当烷基或其它基团中使用下标时，下标是指基团可含有的碳原子数。例如，术语“C0-4烷基”包括化学键和1-4个碳原子的烷基。
术语“取代烷基”是指被1-4个选自以下的基团取代的如上定义的烷基卤素、三氟甲基、卤代烷氧基、酮基(＝O)、硝基、氰基、SRa、ORa、NRaRb、NRaSO2、NRaSO2Rb、SO2Ra、SO2NRaRb、CO2Ra、C(＝O)Ra、C(＝O)NRaRb、OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRb、NRaC(＝O)Rb、NRaCO2Rb、＝N-OH、＝N-O-烷基、取代或未取代芳基、取代或未取代环烷基、取代或未取代杂芳基(包括吲哚基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡啶基和嘧啶基等)以及取代或未取代杂环基(包括四氢呋喃基、吡咯烷基、吗啉基、哌啶基、哌嗪基和二氮杂基等)，其中Ra和Rb各自独立选自氢、烷基、烯基、芳基、芳烷基、C3-7环烷基、杂环基和杂芳基，或者可以结合在一起形成杂芳基或杂环。当所述烷基被取代芳基、杂芳基、杂环基和/或环烷基取代时，那些环基的其它取代基如以下那些基团的定义所述。所述烷基的取代基，包括基团Ra和Rb，可以被至多两个其它取代基进一步取代，在该情况下，所述其它取代基选自烷基、烯基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、氨基、羟基、烷氧基、烷硫基、苯基、苄基、苯氧基和苄氧基。
术语“烯基”是指具有2-12个碳原子和至少一个双键的直链或支链烃基。最优选2-6个碳原子并具有一个双键的烯基。
当提到取代烯基时，这些基团被1-4个如上定义的烷基取代基取代。
术语“卤素”或“卤代”是指氟、氯、溴和碘。
术语“氨基”是指NH2基团。“氨基烷基”是指-NRcRd，其中基团Rc和Rd的每一个为如上定义的取代氨基甲酰基，条件再次为Rc和Rd不同时氢。
术语“烷氧基”是指基团O(烷基)和O(烯基)，术语“取代烷氧基”是指ORe，其中Re为如上定义的取代烷基或取代烯基。
术语“芳基”是指环部分中具有6-12个碳原子的单环或双环芳族环烃基，如苯基、萘基、联苯基和二苯基。
术语“取代芳基”是指如上定义的具有1-3个取代基的芳基，所述取代基为依次结合到1-3个“J”基团上的，或被1-3个“J”基团取代的“C0-4烷基”。“J”基团选自卤素、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基、酮基(＝O)、硝基、氰基、SRa、ORa、NRaRb、NRaSO2、NRaSO2Rb、SO2Ra、SO2NRaRb、CO2Ra、C(＝O)Ra、C(＝O)NRaRb、OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRb、NRaC(＝O)Rb、NRaCO2Rb、苯基、苄基、杂芳基、杂环基或环烷基，其中Ra和Rb为如上定义的取代烷基。所述芳基的取代基可依次被1-2个以下的取代基进一步取代烷基、烯基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、氨基、羟基、烷氧基、烷硫基、苯基、苄基、苯氧基和苄氧基。
术语“环烷基”是指完全饱和的和部分不饱和的3-9个碳原子、优选3-7元碳原子的烃环。
术语“取代环烷基”包括这类具有1-3个取代基(优选1-2个取代基)的环基，所述取代基为依次结合到1-3个“L”基团上的或被1-3个“L”基团取代的“C0-4烷基”。“L”基团选自卤素、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基、酮基(＝O)、硝基、氰基、SRa、ORa、NRaRb、NRaSO2、NRaSO2Rb、SO2Ra、SO2NRaRb、CO2Ra、C(＝O)Ra、C(＝O)NRaRb、OC(＝O)Ra、-OC(＝O)NRaRb、NRaC(＝O)Rb、NRaCO2Rb、＝N-OH、＝N-O-烷基、4-7元碳环、5元或6元缩酮如1，3-二氧戊环或1，3-二氧六环、苯基、苄基、杂芳基和/或杂环基，其中Ra和Rb为如上定义的取代烷基。所述环烷基的取代基可依次被1-2个以下的取代基进一步取代烷基、烯基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、苯基、苄基、氨基、羟基、烷氧基、烷硫基、苯氧基和苄氧基。术语“取代环烷基”也包括这类具有与其稠合的苯环的环或具有3-4个碳原子的碳-碳桥的环。
术语“杂环基”是指非芳族3-7元单环基、7-11元双环基和10-15元三环基，其中至少有一个环具有至少一个杂原子(O、S或N)。含有杂原子的杂环基的每个环可含有一个或两个氧原子或硫原子和/或1-4个氮原子，条件是每个环中杂原子的总数为4或更少，且进一步的条件是该环含有至少一个碳原子。完成双环基和三环基的稠环可仅含有碳原子，并可为饱和的、部分饱和的或不饱和的。氮原子和硫原子可任选被氧化，且氮原子可任选被季铵化。所述杂环基可连接在任何可利用的氮原子或碳原子上。
术语“取代杂环基”是指具有1-4个取代基(优选1-2个取代基)的杂环基，所述取代基为依次结合到1-3个“L”基团上的或被1-3个“L”基团取代的“C0-4烷基”。L为如上定义的环烷基。术语“取代杂环基”也包括这类具有与其稠合的苯环的环或具有3-4个碳原子的碳-碳桥的环。所述杂环基的取代基可依次被1-2个以下的取代基进一步取代烷基、烯基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、苯基、苄基、氨基、羟基、烷氧基、烷硫基、苯氧基和苄氧基。
示例性的单环基包括氮杂环丁烷基、吡咯烷基、氧杂环丁烷基、咪唑啉基、噁唑烷基、异噁唑啉基、噻唑烷基、异噻唑烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂基、氮杂基、4-哌啶酮基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、硫代吗啉基亚砜、硫代吗啉基砜、1，3-二氧戊环和四氢-1，1-二氧噻吩基等。示例性的双环杂环基包括奎宁环基。
术语“杂芳基”是指在至少一个环上具有至少一个杂原子(O、S或N)的芳族5-7元单环基、9元或10元双环基和11-14元三环基。每个含有杂原子的杂芳基的环可含有一个或两个氧原子或硫原子和/或1-4个氮原子，条件是每个环中杂原子的总数为4或更少，且每个环具有至少一个碳原子。完成双环基和三环基的稠环可仅含有碳原子，并可为饱和的、部分饱和的或不饱和的。氮原子和硫原子可任选被氧化，且氮原子可任选被季铵化。二环或三环杂芳基必须包括至少一个完全芳族环，但其它稠合的一个或多个环可为芳族或非芳族的。所述杂芳基可连接在任何环的任何可利用的氮原子或碳原子上。
术语“取代杂芳基”是指这类含有1-4个取代基(优选1-2个取代基)的杂芳环系，所述取代基为依次结合到1-3个“J”基团上的或被1-3个“J”基团取代的“C0-4烷基”。J为如上定义的芳基。所述杂芳基的取代基可依次被1-2个以下的取代基进一步取代烷基、烯基、卤素、卤代烷基、卤代烷氧基、氰基、硝基、苯基、苄基、氨基、羟基、烷氧基、烷硫基、苯氧基和苄氧基。
示例性的单环杂芳基包括吡咯基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基(即 噻二唑基、异噻唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基等。
示例性的双环杂芳基包括吲哚基、苯并噻唑基、苯并间二氧杂环戊烯基(benzodioxolyl)、benzoxaxolyl、苯并噻吩基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、吲嗪基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、苯并吡喃基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基、二氢异吲哚基、四氢喹啉基等。
示例性的三环杂芳基包括咔唑基、benzidolyl、菲咯啉基(phenanthrollinyl)、吖啶基、菲啶基、呫吨基等。
整个说明书和权利要求书中，本领域技术人员可选择它们的基团和取代基以提供稳定的部分和化合物。
除非另有说明，当提到具体名称的杂环基或杂芳基时，所提到的基团包括具有最大非累积(non-cumulative)双键数的体系或小于该最大双键数的体系。因此，例如，术语“异喹啉”是指异喹啉或四氢异喹啉。术语“二氮杂”是指具有至少一个在7元环中带有2个氮原子的7元杂环，包括完全饱和的二氮杂。
术语“杂原子”应包括氧、硫和氮。
式(I)化合物可形成也包括在本发明范围内的盐。优选药物可接受的(即无毒、生理可接受的)盐，尽管其它盐也适用于如分离或纯化本发明化合物。
式(I)化合物可与碱金属例如钠、钾和锂形成盐，与碱土金属如钙和镁形成盐，与有机碱如二环己胺、三丁胺、吡啶、氨基酸如精氨酸、赖氨酸等形成盐。这类盐可根据本领域技术人员已知的方法形成。
式(I)化合物可与各种有机酸和无机酸形成盐。这类盐包括与以下酸形成的盐氯化氢、溴化氢、甲磺酸、硫酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、马来酸、苯磺酸、甲苯磺酸；和各种其它盐(如硝酸盐、磷酸盐、硼酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、丁二酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、水杨酸盐等)。这类盐可根据本领域技术人员已知的方法形成。
此外，可形成两性离子(“内盐”)。
考虑了所有本发明化合物的立体异构体，包括混合物或纯的或基本纯的形式。根据本发明方法制备的化合物的定义包括所有可能的立体异构体及其混合物。它包括外消旋形式和分离的具有旋光活性的旋光异构体。外消旋形式可由物理方法拆分，例如分部结晶、分离或结晶非对映体衍生物或手性柱色谱分离。单个旋光异构体可由外消旋体用常规方法获得，例如与旋光活性酸成盐然后结晶获得。
本文也考虑了本发明化合物的前药和溶剂合物。本文所用的术语“前药”表示给予受治疗者后，经历由代谢或化学过程引起的化学转化得到式I化合物或其盐和/或溶剂合物的化合物。式I化合物的溶剂合物包括如水合物。
反应可在合适的有机溶剂、水或其混合物中进行。有机溶剂可选自如质子惰性极性溶剂如二甲基甲酰胺、DMA、二甲亚砜、二甲基亚丙基脲、N-甲基吡咯烷酮和六甲基亚磷酰三胺；醚溶剂例如乙醚、四氢呋喃、1，4-二氧六环、甲基叔丁基醚、二甲氧基甲烷和乙二醇二甲醚；醇溶剂例如甲醇、乙醇和异丙醇；以及含卤素溶剂如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷和1，2-二氯乙烷。这些溶剂可各自单独使用，或者两种或更多种溶剂可以合适的组合使用。
本发明方法在方案1中详细叙述，并且包括下述步骤步骤(a)包括使6-烷基-1，2，4-三嗪-5-酮(II)与3-取代的丙酮酸(III)例如3-卤代丙酮酸反应，得到1，4-二氢-4-氧代-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酸(IV)。丙酮酸的3-取代为离去基团，该基团使3-取代的丙酮酸与6-烷基-1，2，4-三嗪-5-酮反应，生成化合物IV。合适的离去基团的实例包括卤素如氯、溴和碘，以及磺酸酯基(RSO2O-)，其中R可为烷基、取代烷基、芳基或杂芳基，优选其中R选自甲基、三氟甲基和甲苯基。6-烷基-1，2，4-三嗪-5-酮包括3-取代的1，2，4-三嗪-5-酮和3-未取代的1，2，4-三嗪-5-酮(R4为H)。优选的6-烷基-1，2，4-三嗪-5-酮为3-未取代的1，2，4-三嗪-5-酮，最优选为6-乙基-1，2，4-三嗪-5-酮。3-卤代丙酮酸包括3-取代和3-未取代，优选3-未取代。最优选的3-卤代丙酮酸为3-溴丙酮酸。典型地，步骤(a)的反应在合适的溶剂或溶剂混合物中进行。合适的溶剂包括烃、醚、酰胺、酮、醇和水等溶剂，最优选水。
在步骤(b)中，使步骤(a)中获得的1，4-二氢-4-氧代-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-6-甲酸(IV)与醇在偶联剂存在下反应，得到酯V。本文所用的术语“偶联剂”是指用于使羧酸与醇偶合形成酯键的试剂。反应(b)中的偶联剂包括氯化氢、硫酸等，最优选HCl。反应(b)中的醇包括烷基醇如甲醇和乙醇，优选后者。反应(b)中合适的溶剂包括烃、醚和醇等溶剂，优选醇如乙醇。步骤(b)的反应典型地在合适的溶剂或溶剂混合物中进行。步骤(b)中任选的溶剂或溶剂混合物可与步骤(a)中任选的溶剂或溶剂混合物相同或不同。
步骤(c)包括使步骤(b)中获得的酯V与氯化剂在碱存在下反应，得到化合物VI。本文所用的术语“氯化剂”是指用于置换三嗪环上酮部分的氧的试剂。合适的氯化剂包括亚硫酰氯、POCl3等。优选POCl3。步骤(c)中合适的溶剂包括质子惰性溶剂如烃、卤代烃、醚或氯化剂本身，优选POCl3。步骤(c)的反应典型地在合适的溶剂或溶剂混合物中进行，所述溶剂或溶剂混合物可与此方法的其它步骤中所用的任何溶剂或溶剂混合物相同或不同。
在步骤(d)中，使步骤(c)中获得的化合物VI与苯胺VII反应，得到化合物VIII。所述苯胺包括N-烷氧基-3-氨基苯甲酰胺，优选N-甲氧基-3-氨基-4-甲基苯甲酰胺。步骤(d)中合适的溶剂包括烃、卤代烃、醚和酰胺等溶剂，优选酰胺如DMF。步骤(b)的反应典型地在合适的溶剂或溶剂混合物中进行，所述溶剂或溶剂混合物可与此方法的其它步骤中所用的任何溶剂或溶剂混合物相同或不同。
在步骤(e)中，使步骤(d)中获得的化合物VIII与胺反应，得到式I的吡咯并三嗪甲酰胺和苯甲酰胺化合物。反应(e)中的胺包括一级胺和二级胺，优选后者。步骤(e)的反应典型地在合适的溶剂或溶剂混合物中进行，所述溶剂或溶剂混合物可与此方法的其它步骤中所用的任何溶剂或溶剂混合物相同或不同。
方案1 在化合物I、II、III、IV、V、VI、VII和VIII中，取代基具有以下含义，并且每次出现时独立选择R为烷基、芳基和杂芳基；R1和R2独立选自氢和烷基；
R3连接在苯环上任何可利用的碳原子上，并且每次出现时独立选自氢、烷基、取代烷基、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷氧基和取代烷氧基；R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；R5为氢、烷基、芳基或杂芳基；R6为氢、烷基、芳基或杂芳基；R7和R8(i)独立选自氢、烷基、取代烷基、烯基、取代烯基、环烷基或取代环烷基、芳基或取代芳基、杂芳基或取代杂芳基以及杂环基或取代杂环基；或(ii)R7和R8可以与连接它们的氮原子结合在一起形成杂环基或取代杂环基或者杂芳基或取代杂芳基；所形成的所述基团任选含有额外的1个或2个杂原子；且n为0、1或2，可进行反应后处理，该后处理可包括本领域已知的收尾步骤，以便从反应混合物中回收反应产物。典型的步骤可包括用有机溶剂(如乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醚、甲苯等，或两种或更多种这些有机溶剂的混合物)稀释反应混合物，然后用水和/或无机盐水溶液(如10％氯化锂)洗涤有机层一次或多次。有机层可经脱水剂如无水硫酸镁或硫酸钠干燥，然后减压浓缩。这样得到的产物可用本领域技术人员已知的技术如结晶、柱色谱和/或类似技术纯化，进一步提高其纯度。
实用性根据本文的创造性方法制备的式(I)化合物，用作p38激酶抑制剂，尤其是同工型p38α和p38β的抑制剂。因此，式(I)化合物在治疗p38激酶活性相关疾病中有实用性。这类疾病包括细胞因子水平经p38细胞内信号转导而被调节的疾病或障碍，尤其是伴有细胞因子IL-1、IL-4、IL-8和TNF-α过量产生的疾病。本文所用的术语“治疗”或“疗法”包括针对所述疾病和/或其症状的反应性和/或预防性措施，例如设计来抑制或延迟疾病或障碍发作的措施、达到完全或部分减轻症状或疾病病情的措施，和/或缓解、减轻或治愈所述疾病或其症状的措施。当本文提到“p38α/β激酶”的抑制时，这是指p38α和p38β两激酶之一或全部被抑制。
鉴于它们作为p-38α/β激酶抑制剂的活性，式(I)化合物适用于治疗炎性疾病、自身免疫病、破骨性疾病、增殖性疾病、血管生成性疾病、感染性疾病、神经变性性疾病、病毒性疾病和局部缺血再灌注疾病。
更具体地说，式(I)化合物可用于治疗炎性疾病，包括但不限于关节炎(如类风湿性关节炎、莱姆病性关节炎、骨关节炎、外伤性关节炎、风疹性关节炎、牛皮癣性关节炎、痛风性关节炎和其它关节炎疾病)；肾小球性肾炎、胰腺炎(急性或慢性)、糖尿病、糖尿病性视网膜病、黄斑变性、结膜炎、再生障碍性贫血、血小板减少症、胃炎、慢性甲状腺炎、慢性活动性肝炎、多发性硬化、炎性肠病、溃疡性结肠炎、节段性回肠炎(Crohn′s disease)、恶病质(包括感染、癌或心脏病继发的恶病质)、牙周病、阿尔茨海默病(Alzheimer′sdisease)、帕金森病(Parkinson′s disease)、瘢痕疙瘩形成、肺肉芽肿、重症肌无力、内毒素诱发的炎症反应、赖特综合征(Reiter′s syndrome)、痛风、急性滑膜炎、大量嗜中性白细胞浸润为特征的疾病、关节强硬性脊椎炎、流行性感冒、脑型疟、矽肺、骨重吸收疾病、发热、感染引起的肌痛、骨质疏松症、多发性骨髓瘤相关骨病、由外伤性损害和外伤性脑损害引起的神经变性性疾病。
所述化合物也可用于治疗急性或慢性移植物抗宿主反应(如胰岛同种移植)、急性或慢性移植排斥(如肾、肝、心、肺、胰腺、骨髓、角膜、小肠、皮肤同种异体移植物(skin allografts)、皮肤同种同体移植物(skin homografts)、异种移植物和/或来源于这类器官的细胞)、以及皮肤病，包括但不限于疤痕组织形成、湿疹、特应性皮炎、接触性皮炎、荨麻疹、硬皮病(schleroderma)、scleraclerma和牛皮癣。式(I)化合物也可用于治疗变态反应和呼吸疾病，包括哮喘、急性呼吸窘迫综合征、枯草热、过敏性鼻炎和任何慢性肺部炎性疾病例如慢性阻塞性肺病。所述化合物还可用于治疗哮喘和变态反应中的类固醇抗性，和其它疾病。
式(I)化合物也可用于治疗血管生成性疾病包括实体瘤、眼新血管形成和婴儿血管瘤。
当术语“p38相关病症”或“p38相关疾病或紊乱”在本文使用时，各自包括所有以上鉴定的疾病，如同详细重复一遍一样，以及其它由p38激酶活性调节的疾病，例如2003年12月30日授予专利权的美国专利6,670,357B2中所列举的疾病等，该专利通过引用结合到本文中。
本发明也提供能够治疗p38激酶相关疾病(包括TNF-α、IL-1和/或IL-8介导的疾病)的药物组合物的制备方法，其中所述方法包括根据本文创造性方法制备式(I)化合物，并进一步由该化合物与例如一种或多种给药用稀释剂或溶媒一起制备药物组合物。所述组合物可含有其它上述治疗剂。药物组合物可通过使用常规固体或液体溶媒或稀释剂，以及适合于所需给药模式的药物添加剂(例如赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、矫味剂等)，按照例如药物制剂领域众所周知的技术配制。
所述药物组合物可用任何适合于所治疗疾病的方法给药，该方法可取决于位点特异性治疗或给药量的需要。虽然考虑了其它给药模式，但是局部给药通常优选用于皮肤相关疾病，系统性给药通常优选用于癌或癌前疾病。例如，式(I)化合物可以例如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂或液体制剂(包括糖浆剂)口服给予；例如以溶液剂、混悬剂、凝胶剂或软膏剂局部给予；舌下给予；颊内给予；例如通过皮下、静脉内、肌内或胸骨内注射或输液技术(例如作为无菌注射用水或非水溶液或混悬液)胃肠外给予；例如通过吸入喷雾剂经鼻给予；例如以乳膏或软膏形式局部给予；例如以栓剂形式直肠给予；或以脂质体形式给予。可给予含有无毒、药物可接受的溶媒或稀释剂的剂量单位制剂。根据本发明方法制备的式(I)化合物，可以适合速释或缓释的形式给予。速释或缓释可用合适的药物组合物获取或，尤其就缓释而言用皮下植入物或渗透泵获取。
示例性的局部给药组合物包括局部载体例如PLASTIBASE(用聚乙烯凝胶化的矿物油)。
示例性的口服给药组合物包括混悬液和速释片，该混悬液可包含例如微晶纤维素(以增大体积)，海藻酸或藻酸钠(作为悬浮剂)，甲基纤维素(作为增粘剂)，和甜味剂或矫味剂，例如本领域已知的物质；该速释片可包含例如微晶纤维素、磷酸氢二钙、淀粉、硬脂酸镁和/或乳糖和/或其它赋形剂、粘合剂、补充剂、崩解剂、稀释剂和润滑剂，例如本领域已知的物质。式(I)化合物也可通过舌下和/或颊内给予例如模制片、压制片或冻干片而口腔给药。示例性的组合物可包括速溶稀释剂例如甘露醇、乳糖、蔗糖和/或环糊精。这类制剂中也可包括高分子量赋形剂例如纤维素(AVICEL)或聚乙二醇(PEG)；帮助粘膜粘着的赋形剂例如羟丙基纤维素(HPC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羧甲基纤维素钠(SCMC)和/或马来酸酐共聚物(例如GANTREZ)，控释剂例如聚丙烯酸共聚物(例如CARBOPOL 934)。也可添加润滑剂、助流剂、矫味剂、着色剂和稳定剂以便于制备和使用。
示例性鼻气雾剂或吸入给药组合物包括溶液剂，该溶液剂可含有例如苯甲醇或其它合适的防腐剂、增强吸收和/或生物利用度的吸收促进剂和/或其它增溶剂或分散剂，例如本领域已知的物质。
示例性的胃肠外给药组合物包括注射用溶液剂或混悬剂，其可包含例如合适的无毒的、胃肠外可接受的稀释剂或溶剂例如甘露醇、1，3-丁二醇、水、林格氏溶液、等渗氯化钠溶液或其它合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂(包括合成的甘油单酯或甘油二酯)和脂肪酸(包括油酸)。
示例性的直肠给药用组合物包括栓剂，该栓剂可包含例如合适的无刺激性赋形剂例如可可脂、合成的甘油酯或聚乙二醇，上述物质在常温下为固体，但在直肠腔液化和/或溶解以释放出药物。
式(I)化合物的有效量可由本领域普通技术人员确定，并且包括示例性哺乳动物剂量，该剂量为每天约0.05-100mg/kg体重的活性化合物，可以单剂量或独立分剂量形式给予，例如每天1-4次。人们知道，具体剂量水平和给药频率对任何具体受治疗者而言，可以是变化的并将取决于各种因素，包括所用的具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和该化合物的起效时间、物种、受治疗者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食、给药模式和次数、排泄率、药物组合和具体疾病的严重性。治疗的优选受治疗者包括动物，最优选为哺乳动物物种例如人和驯养动物例如狗、猫、马等。因此，当本文使用术语“患者”时，该术语包括所有受治疗者，最优选受p38酶水平介导影响的哺乳动物受治疗者。
采用本领域已知的和/或本领域普通技术人员水平内的试验，可以测试式(I)范围内的化合物的p38α/β酶和TNF-α抑制剂的活性。
以下实施例举例说明了本发明的实施方案，但并不是对权利要求范围的限制。在某些实施例中，制备了一种式I化合物并随后用于进一步制备一种或多种另外的式I化合物或其盐。适当时可使用制备本文所述一种式I化合物或其盐的方法，制备本发明的其它化合物。
本文使用下述缩写，包括制备方法和以下实施例DIPEA 二异丙基乙胺DMF 二甲基甲酰胺EDCI 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EtOAc 乙酸乙酯EtOH 乙醇
Et2O乙醚h小时HOBt 1-羟基苯并三唑水合物MeOH 甲醇THF 四氢呋喃中间体的制备化合物II 将12ml EtOH加入到甲脒盐酸盐(1.6g)中，将混合物搅拌并冷却至-10℃。缓慢加入一水合肼，于-10℃搅拌浆状混合物10分钟。加入2-氧-丁酸(1.52g)的EtOH(4ml)溶液，然后加入乙酸(850μl)。将混合物加热至回流达3.5h。过滤除去固体，滤液真空浓缩至干，得到油状固体(74AP)。粗产物经色谱纯化(2∶1 EtOAc/MeOH)，得到1.1g化合物II，其中R4为氢，R5为甲基(收率～60％，98AP，固体)。
化合物IV 6-乙基-1，2，4-三嗪-5-酮(1.25g，10mmol，1当量)在20ml水中与3-溴丙酮酸(2.5g，15mmol，1.5当量)混合。将反应混合物加热到90℃并搅拌1.5h。将所得的浆状物冷却、过滤、用冷水洗涤并干燥，得到0.87g(45％)化合物IV。
化合物V 将化合物IV(100mg)加入到10ml乙醇和1ml 4N HCl的二氧六环溶液中。将反应混合物加热至回流并搅拌2h。除去溶剂，得到110mg(96％)化合物V。
化合物VI 向化合物V(10g，45.2mmol)的甲苯溶液(150ml)中加入DIPEA(6.31ml，36.2mmol，0.8当量)和POCl3(5.05ml，54.2mmol，1.2当量)，将反应混合物在120-125℃(油浴温度)加热20h。将反应混合物冷却并倒在冰冷的饱和NaHCO3-水-甲苯(450ml-450ml-150ml)上，并快速搅拌以保证猝灭过量POCl3。分离各层(如果为悬浮形式则经硅藻土过滤)，再次用饱和NaHCO3洗涤有机层。有机层经硫酸钠干燥、过滤并真空浓缩，得到化合物VI(9.9g，95％，棕黄色固体)。
化合物VIII 向N-甲氧基-3-氨基-4-甲基苯甲酰胺(41.2g，190mmol)的DMF(230ml)溶液中加入DIPEA(33.1ml，180.7mmol，0.95当量)，将反应容器加热到55℃(油浴温度)。将固体化合物VI(45.6g，190mmol)历时10分钟分几部分加入，用DMF(150ml)冲洗瓶并加入到反应物中。将反应物于55℃加热10h，冷却至室温。然后将混合物倒入1.5L水中，并用冰历时10分钟缓慢稀释至2.2L。调节pH至6，并搅拌固体1h。将固体过滤、用水洗涤(2×200ml)并在滤器中干燥，得到71.9g酯化合物粗品。然后将该固体悬浮于乙腈(450ml)中，并于50℃加热搅拌1h。混合物冷却并过滤，得到64.2g产物(纯度＞99％)。将这些固体随后溶于热乙醇(2.8L)中，加入脱色碳(6.4g)，然后加热回流15分钟。然后混合物经硅藻土垫过滤，反应瓶用热乙醇(1L)冲洗。然后将热滤液蒸馏浓缩至～1L乙醇，经蒸馏该产物开始从2.5L溶液中结晶出来。将溶液冷却并置于冷室中，搅拌40h。过滤固体，用1/1EtOH/Et2O(500ml)冲洗，得到58.5g化合物VIII(80％，白色固体)。
实施例1 向化合物VIII(22.5g，58.7mmol)的THF(205ml)溶液中加入1NNaOH(205ml)，将反应混合物加热至50℃，持续16h。真空除去THF，混合物用1N HCl水溶液酸化至pH 4-5，以沉淀产物。将多相混合物搅拌1h，过滤并用水(150ml)和乙醚(150ml)洗涤。所收集的固体在滤器上部分干燥，得到酸中间体粗品的潮湿白色固体，该产物无需进一步纯化就可直接使用。
向潮湿的酸化合物的DMF溶液(300ml)中加入HOBt(11.9g，88.0mmol)、EDCI(16.9g，88.0mmol)和作为游离碱或盐酸盐的1.3当量(117mmol)环丙基-胺。搅拌混合物30分钟以溶解置于冰水浴中的该固体，用注射器缓慢加入DIPEA(20.4ml，117mmol)。将混合物在室温下搅拌1h，然后倒入快速搅拌的冰水(1.2L)中，以沉淀产物。搅拌3h后，抽滤收集固体，用水(150ml)和乙醚(2×100ml)洗涤，抽滤风干，得到实施例1的白色固体(92-98％)。
实施例2-59 具有式(Ib)的化合物，其中R7和R8的基团见表1(独立选择或与连接它们的氮原子结合在一起)，按照上述方案I和实施例1给出的方法的相同方法制备，只是在最后一步使用不同的胺(NHR7R8)。此外，每种化合物可用7∶1 ETOH/水混合物重结晶，得到分析纯产物，呈白色结晶固体。
表1






权利要求
1.一种制备吡咯并三嗪羧酸的方法，所述方法包括下述步骤使下式的化合物II 其中R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；且R5为氢、烷基、芳基或杂芳基；与下式的化合物III反应 其中X为离去基团；R6为氢、烷基、芳基或杂芳基；得到下式的化合物IV 其中R4、R5和R6如上所定义。
2.权利要求1的方法，其中R4为氢；且R5为甲基。
3.权利要求1的方法，其中化合物III为3-卤代丙酮酸。
4.权利要求3的方法，其中X选自Cl、Br和R9SO2O-，其中R9选自烷基、取代烷基、芳基和杂芳基。
5.权利要求1的方法，所述方法还包括下述步骤(a)使化合物IV与醇在偶联剂存在下反应，生成下式的酯V 其中R为烷基、芳基或杂芳基；R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；R5为氢、烷基、芳基或杂芳基；且R6为氢、烷基、芳基或杂芳基；(b)使所述酯V与氯化剂在碱存在下反应，得到下式的化合物VI 其中R、R4-R6如步骤(a)中所定义，(c)使化合物VI与下式的苯胺化合物VII反应 其中R1和R2独立选自氢和烷基；且R3连接在苯环上任何可利用的碳原子上，并且每次出现时独立选自氢、烷基、取代烷基、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷氧基和取代烷氧基；得到下式的化合物VIII 其中R为烷基、芳基或杂芳基；R1和R2独立选自氢和烷基；R3连接在苯环上任何可利用的碳原子上，并且每次出现时独立选自氢、烷基、取代烷基、卤素、氰基、硝基、氨基、羟基、烷氧基和取代烷氧基；R4为氢、烷基、芳基或杂芳基；R5为氢、烷基、芳基或杂芳基；R6为氢、烷基、芳基或杂芳基；且n为0、1、2或3；(d)使化合物VIII与胺NHR7R8反应，得到下式的吡咯并三嗪甲酰胺和苯甲酰胺化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、R6和n如上所定义，且R7和R8(i)独立选自氢、烷基或取代烷基、烯基或取代烯基、环烷基或取代环烷基、芳基或取代芳基、杂芳基或取代杂芳基以及杂环基或取代杂环基；或(ii)R7和R8可以与连接它们的氮原子结合在一起形成杂环基或取代杂环基或者杂芳基或取代杂芳基；所形成的所述基团任选含有额外的1个或2个杂原子。
6.权利要求5的方法，其中步骤(a)中的偶联剂为氯化氢或硫酸。
7.权利要求6的方法，其中所述偶联剂为氯化氢。
8.权利要求6的方法，其中步骤(a)中的醇为C1-C6链烷醇。
9.权利要求8的方法，其中所述醇为乙醇或甲醇。
10.权利要求6的方法，其中步骤(a)在溶剂中进行，其中所述溶剂为烃、醚或醇。
11.权利要求10的方法，其中所述溶剂为醇。
12.权利要求11的方法，其中所述醇为乙醇。
13.权利要求6的方法，其中步骤(b)中的氯化剂为亚硫酰氯、POCl3或PCl5。
14.权利要求13的方法，其中所述氯化剂为POCl3。
15.权利要求6的方法，其中在步骤(c)中，苯胺化合物VII为N-烷氧基-3-氨基-烷基苯甲酰胺。
16.权利要求6的方法，其中在步骤(c)中，苯胺化合物VII为N-甲氧基-3-氨基-4-甲基苯甲酰胺。
17.权利要求6的方法，其中步骤(d)在溶剂或溶剂混合物中进行，其中所述溶剂为烃、卤代烃、醚、酰胺或其混合物。
18.下式化合物或其药物可接受的盐、溶剂合物或前药 其由权利要求5中定义的方法制备。
19.权利要求18的化合物，其中所述化合物具有下式
20.权利要求19的化合物，其中所述药物可接受的盐为甲磺酸盐。
全文摘要
公开了某些吡咯并三嗪化合物的改进的制备方法。该化合物具有作为激酶抑制剂的用途。
文档编号A61K31/53GK1771234SQ200480009367
公开日2006年5月10日 申请日期2004年2月5日 优先权日2003年2月5日
发明者陈邦池, 赵儒林, J·E·孙迪恩, K·莱夫特里斯, J·海恩斯, S·T·弗鲁布莱斯基 申请人:布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司