粥样硬化。 这些脂肪沉积会导致两种类型的梗阻。脑血栓症是指血栓（血块）在血管阻塞部分的形 成。"脑栓塞"通常是指在循环系统另一个位置形成的血凝块，通常是心脏、上胸部大动脉和 颈部。一部分血凝块随后脱落，进入血液中，穿过大脑的血管，直到到达太小而无法让其过 的血管。栓塞的第二个重要原因是心律不齐，被称为房颤。房颤创造了条件，凝块可以在心 脏形成，排出，移动到脑部。缺血性中风的其他潜在原因是脑出血、血栓形成、动脉或静脉解 剖、心脏骤停、任何原因（包括脑出血）的休克以及医源性原因，例如，脑部血管或流向脑部 的血管的直接手术损伤或心脏手术）。缺血性中风约占所有中风病例的83%。
[0082] 短暂性缺血发作（TIAs)是较轻微或警示性中风。在TIA中，存在指示缺血性中风 的情况，并出现典型的中风警示信号。然而，梗死（血块）短时间存在，并趋于通过正常机 制而自身溶解。经历心脏手术的患者尤其具有短暂性脑缺血发作的风险。
[0083]出血性中风占约17%的中风病例。其由破裂并导致血液流进周围脑部的脆弱血管 引起。血液积累并压迫周围的脑组织。两类典型的出血性中风为脑内出血和蛛网膜下腔出 血。出血性中风由脆弱血管的破裂引起。导致脆弱血管破裂的潜在原因包括高血压性出血， 其中高的血压导致血管破裂；或其他导致脆弱血管的原因，例如破裂的脑血管的畸形，包括 脑动脉瘤、动静脉畸形（AVM)或海绵状血管畸形。出血性中风也可以由缺血性中风的出血 性转化而引起，所述缺血性中风弱化了梗死中的血管；或由包含异常弱的血管的CNS中的 原发性或转移性肿瘤的出血引起。出血性中风也可以由医源性原因引起，例如对脑部血管 的直接手术损伤。动脉瘤是弱化的血管区域的膨胀。如果不进行治疗，动脉瘤将继续弱化 直至其破裂并流血入脑部。动静脉畸形（AVM)是一串异常形成的血管。海绵状血管畸形是 静脉畸形，能够导致从弱化的静脉结构的出血。这些血管的任何一个都可能破裂，也导致血 液流进脑部。出血性中风也可以由物理创伤引起。在脑的一个部分中的出血性中风可以通 过血液的缺乏（在出血性中风中流失）而引起另一个部位的缺血性中风。
[0084]一类适合接受治疗的患者为经历手术的患者，所述手术涉及或可能涉及供应脑 部、或位于脑部或CNS中的血管。一些例子为经历心肺转流术、颈动脉支架置入术、脑部或 主动脉弓冠状动脉的诊断性血管造影术、血管手术或神经手术的患者。这样的患者的更 多例子已在以上第IV部分讨论过。特别适合的是患有脑动脉瘤的患者。可以通过多种 手术对这样的患者进行治疗，所述手术包括剪掉动脉瘤以阻断血液，或进行血管内手术以 小线圈来封闭动脉瘤、或向出现动脉瘤的血管中植入支架、或置入微导管。血管内手术比 剪掉动脉瘤具有较小的侵入性，与较好的患者结果相关，但该结果仍然包括高发生率的小 梗死。可以用PSD95与NMDAR2B相互作用的抑制剂、特别是以上所描述的化学剂，包括肽 YGRKKRRQRRRKLSSIESDV(SEQ ID N0:6,也被称为Tat-NR2B9c)，对这样的患者进行治疗。相 对于实施手术的用药时间可以按以上在临床试验中所描述的进行。
[0085]另一类适合接受治疗的患者是患有带有动脉瘤或不带有动脉瘤的蛛网膜下腔出 血的患者（参见US61/570264)。
[0086] IV?有效的用药方案
[0087]复原后，施用冻干制剂，从而使得所述活性试剂（例如，NR2B9c)以能够使正在接 受治疗的患病患者的至少一种病兆或病症被有效地治疗、降低或抑制进一步恶化的剂量、 频率和用药途径被施用。
[0088] 有效治疗的剂量是指，相对于未使用本发明药剂进行治疗的对照患病患者（动物 模型）群体的损伤，所述活性试剂的剂量足以使患有疾病并以本发明化学剂治疗的患者 (或动物模型）群体的至少一种病兆或病症被有效地治疗、降低或抑制进一步恶化。相较于 未使用本发明所述方法进行治疗的对比患者的对照群体中的平均结果，如果接受治疗的患 者个体达到的效果更好，那么所述剂量也被认为是治疗有效的。治疗有效的方案（regime) 包括按达到预期目的所需要的用药频率和途径来施用治疗有效的剂量。
[0089]对于患有中风或其它缺血症状的患者，所述活性试剂的施用方案包括对降低中风 或其它缺血性病症的损伤效应有效的施用量、频率和途径。当需治疗的疾病是中风时，可以 通过梗死的体积或残障指数，对结果进行确定，如果治疗的患者个体的残障在Rankin量表 上表现为2或以下以及在Barthel量表上表现为75或以上，或如果治疗患者群体比相当的 未经治疗的群体在残障量表上显示出显著改善的分值分布（即，较少的残障），则剂量被视 为治疗上有效的，参见Lees et at L, N Engl J Med 2006;354:588-600。单剂量的药剂通 常足以治疗中风。
[0090] 本发明也提供用于在具有失调危险的受试者中预防该失调的方法和组合物。通 常，与对照群体相比较，这样的受试者出现失调（例如，病态、不适、失调或疾病）的可能性 增加。对照群体例如可以包括随机选自一般群体（例如，按年龄、性别、人种和/或种族进 行匹配）、没有被诊断的或具有该失调的家族史的一个或多个个体。如果发现受试者和失调 相关"危险因素"间具有联系，则受试者可以被认为具有失调的危险。危险因素可以包括， 例如通过对受试者群体进行统计学或流行病学研究而得到的、与给定的失调相关的任何活 动、性状、事件或特性。即使鉴别潜在危险因素的研究没有特别地包括该受试者，受试者也 可以因此被分类为具有失调风险。例如，经历心脏手术的受试者具有短暂性脑缺血发作的 风险，因为与没有经历心脏手术的受试者群体相比较，经历了心脏手术的受试者群体中短 暂性脑缺血发作的频率增加。
[0091] 其它常见的中风危险因素包括年龄，家族史，性别，先前发生过中风，短暂性缺血 发作或心脏病发作，高血压，吸烟，糖尿病，颈动脉或其它动脉疾病，心房颤动，其它心脏疾 病（例如心脏病、心力衰竭、扩张型心肌病、心脏瓣膜疾病和/或先天性心脏病），高血胆固 醇，以及高饱和脂肪、反式脂肪或胆固醇的饮食。
[0092] 在预防过程中，将复原后的冻干制剂以足以阻止、延迟或抑制所述疾病的至少一 种病兆或病症的发展的剂量、频率和途径给药给具有患病风险但尚未患病的患者。有效预 防的剂量是指，相较于具有患病风险但未使用本发明的嵌合剂进行治疗的对照患者（或动 物模型）群体，足以有效地预防、抑制或延迟具有患病的风险且使用所述试剂进行治疗的 患者（或动物模型）群体的至少一种病兆或病症的试剂量。相较于未使用本发明所述方 法进行治疗的可比患者的对照群体中的平均结果，如果接受治疗的个体患者达到的效果更 好，那么所述剂量也被认为预防有效的。预防有效的方案包括在达到预期目的所需要的频 率和用药途径下以预防活性剂量给药。对于处在紧迫的中风风险（比如，正在接受心脏手 术的患者）中的患者的中风预防，单剂量药剂通常是足够的。
[0093]根据所述试剂而定，给药（方式）可以是肠胃外的、静脉内的、经鼻的、口服的、皮 下的、动脉内的、颅内的、鞘内的、腹膜内的、局部的、鼻内的或肌内的。对于肽试剂，优选为 静脉给药。
[0094] 对于给人类用药，优选的活性试剂（例如，TAT-NR2B9C)剂量为2-3mg/kg，更优选 为2. 6mg/kg。。所示剂量应被理解为包括在典型的医院条件下可测定的剂量在精度上所固 有的误差幅度。这样的量为用于单剂施用，即，每疾病发作期一剂。
[0095] 活性试剂，例如TAT-NR2B9C，优选为通过输注进入血管进行输送，更优选为通过静 脉输注输送。输液的时间可以影响副作用（例如由于肥大细胞脱粒和组胺的释放）和功 效。通常，对于给定的剂量水平，较短的输液时间更有可能会导致组胺的释放。然而，较短 的输液时间也可能导致改良的功效。尽管本发明的实施不依赖于对机制的理解，但后一种 结果可以解释为：相对于患者病状的发展，延迟将是显著的，以及相对于嵌合剂的血浆半衰 期，延迟将是显著的，由此嵌合剂达不到最佳的治疗水平。对于嵌合剂Tat-NR2B9c，在这些 因素之间提供平衡的优选输液时间为5-15分钟，更优选为10分钟。所示时间应被理解为 包括+/-10%的误差。输液时间不包括任何用于洗脱输注（洗脱已经完成的最初输液的任 何残留液滴）的额外时间。用于Tat-NR2B9c的输液时间也可以充当其它药剂的指导。
[0096] 尽管为了便于清楚理解，本发明已被详细描述，某些修改仍可在所附权利要求的 范围内实施。出于所有目的，本申请中引用的所有发表刊物、序列号和专利文献的全部内 容均以引用的方式并入本申请中，如同其单独被引用的程度。某种程度上，在不同时间段， 某个序列号不止与一条序列相关联，与序列号相关联的序列是指本申请有效递交日时的序 列。有效申请日是公开争议序列号的最早优先权申请的日期。除非上下文中另有明确说明， 否则本发明的任何要素、具体实施例、步骤、特征或形式可以任意组合实施。
[0097] 具体实施例
[0098] 实施例1:验证标准缓冲液和赋形剂不会干扰NA-I在体内的效力
[0099] 制备5种NA-I浓度均为20mg/mL的液体毒理制剂。表1包括赋形剂组分、编号以 及制备时的效力、纯度和pH。将大约5mL每种制剂装入小瓶用以测试。-20°C冷冻小瓶，以 模拟运输或液体储存条件。
[0100] 表1: NA-1制剂组合物在体内的效力试验
[0101]
[0102]1效力和纯度采用TFA方法通过RP-HPLC分析进行评估。
[0103]2制剂#2的纯度明显低于其它制剂。
[0104]3磷酸盐缓冲的制剂的pH明显偏离其初始缓冲液的pH(7. 0)。
[0105] 需要注意的是，磷酸盐缓冲的制剂不能像组氨酸缓冲液一样维持制剂和试验之间 的pH，这表明组氨酸可能是更佳的制剂缓冲液。
[0106] 制剂1-5在大鼠3-软脑膜血管阻塞（3PV0)中风模型中进行试验。患有中风的大 鼠通过静脉给药被施用所述制剂中的一种，所述制剂进入股静脉，然后，所述动物在中风24 小时后被处死。收集大脑，固定，并使用氯化三苯基四氮唑（TTC)进行染色，以显现出大脑 的缺血部分。相对于仅仅注射生理盐水的对照样品，所有的试验制剂都可以为动物提供显 著的神经保护作用（图1)。
[0107] 方法
[0108] 缺血性3-软脑膜血管闭塞模型
[0109] 试验在大鼠身上进行。如前所述实施永久性的3-软脑膜血管闭塞（3PV0) (Angiogenic protection from focal ischemia with angiotensin II type I receptor blockade in the rat. Forder et al. , Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2005 Apr ； 288(4):H1989-96)。简而言之，以0.5ml/kg肌内注射氯胺酮（100mg/kg)、乙酰丙嗪（2mg/ kg)和甲苯噻嗪（5mg/kg)，对250g至350g的大鼠进行麻醉，需要时，辅以初始剂量的三分 之一。插入肛门温度探针，并且将动物置于温度保持在约37°C的加热垫上。颅骨经正中切口 被暴露出来，并被刮擦去掉组织。使用解剖显微镜和气动牙钻，通过穿过颅骨钻一个矩形， 保持硬脑膜完整的同时剥离颅骨块，从而在右侧体感皮质区上产生6-8mm的颅骨窗口（尾 侦Ij 2mm和外侧至前囟5mm)。围绕选定的桶状皮层，烧灼3-软脑膜小动脉大脑中动脉分支 (3pial arteriolar middle cerebral