m，lH)，7.20(m，lH)，4.41(m，lH)，3.37(m，2H)，2.90(m，2H)，2.25(m，4H).
[0356] 实施例3:3-(l-(2,6-二氯-3-氟苯基）环丙基)-5-(l-(哌啶-4-基)-lH-吡唑-4-基)- 1H-吡唑并[3,4-b]吡啶的合成
[0358]步骤1:2，6_二氯-3-氟-苯乙醇的合成
[0359] 将2,4-二氯氟苯（165.0g, 1000 .Ommol)加入500mL无水四氢咲喃中，然后降温至-78°C，滴加正丁基锂(42. OmL，2.5M，1050.0 mmol)，-78°C下搅拌反应1小时，然后加入环氧乙 烷(44.0g，1000.0 mmol )，-78°C下再搅拌反应2小时。反应结束后，用饱和氯化铵溶液淬灭， 乙酸乙酯（3X200mL)萃取，有机相依次用水(2X100mL)和饱和食盐水(2X100mL)洗涤，无 水硫酸钠干燥，浓缩即得无色液体（156.7g，75.0 % )。1H NMR(400MHz，CDC13) 57.25 (m，1H)， 7?03(m，1H)，3?89(m，2H)，3?29(m，2H)?
[0360] 步骤2:2，6_二氯-3-氟-苯乙酸的合成
[0361]将2，6-二氯-3-氟-苯乙醇（156? 7g，750? Ommol)加入500mL(pH 6? 5)磷酸盐缓冲液 中，然后加入TEMPO氧化剂（129. Og，825. Ommol)，室温搅拌下交替滴加亚氯酸钠和次氯酸钠 溶液。40°C下搅拌反应3小时。反应结束后，反应液用稀盐酸调节pH至2-3,乙酸乙酯（3 X 200mL)萃取，有机相依次用水(2X100mL)和饱和食盐水(2X100mL)洗涤，无水硫酸钠干燥， 浓缩即得白色固体（150.5g ,90.0%)。1H 匪R(400MHz，CDC13)S7.35(111，1H)，7.12(111，1H)， 4.10(s,2H).
[0362]步骤3:2，6-二氯-3-氟-苯乙酰胺的合成
[0363] 将2，6-二氯-3-氟-苯乙酸（150 ? 5g，674 ? 9mmol)加入 100mL 二氯亚砜中，85 °C 回流 搅拌反应1小时，然后减压蒸除二氯亚砜，残留物用二氯甲烷溶解，滴加至〇°C下冷却的氨水 (300mL)中，搅拌反应3h。反应结束后，反应液用二氯甲烷(3 X 200mL)萃取，有机相依次用水 (2 X lOOmL)和饱和食盐水(2 X lOOmL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩即得白色固体（142.3g， 95.0%)。111 NMR(400MHz，CDC13)S7.35(m，lH)，7.12(m，lH)，4.10(s，2H).
[0364] 步骤4:2，6_二氯_3_氣-苯乙臆的合成
[0365] 将2，6-二氯-3-氟-苯乙酰胺（142.3g，641. Ommol)溶于吡啶（1000mL)中，冰浴下滴 加二氯亚砜(mL)，然后冰浴下搅拌反应2小时，反应结束后，反应液加入冰水中淬灭，石油醚 萃取(3 X 200mL)萃取，合并有机相，然后依次用饱和硫酸铜（2 X 1 OOmL)和饱和食盐水(2 X 10〇1^)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，即得类白色固体(85.98,65.7%)。111匪1?(40(^他， CDC13)S7.39(m，lH)，7.19(m，lH)，4.04(s，2H).
[0366]步骤5:1-(2,6_二氯-3-氟-苯基)环丙腈的合成
[0367] 将2,6_二氯-3-氟-苯乙腈(85.9g，421.1mmol)溶于DMF(500mL)中，冰浴下降温，然 后加入NaH(42 . lg，含量60%，1052.7mmol)，室温下搅拌反应lh后，再加入1，2-二溴乙烷 (95.0g，505.3mmol)，室温下搅拌反应3h，反应结束后，反应液用饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯 (2 X200mL)萃取，合并有机相，然后依次用水(2 X lOOmL)和饱和食盐水(2 X lOOmL)洗涤，有 机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析纯化（石油醚：乙酸乙酯= 50:1)，即得类白色固体 (83.18,85.8%)。111 NMR(400MHz，CDC13)S7.36(m，lH)，7.17(m，lH)，1.98(m，2H)，1.50(m， 2H).
[0368] 步骤6:1-(2,6_二氯-3-氟-苯基)环丙甲酰胺的合成
[0369] 将1-(2,6_二氯-3-氟-苯基)环丙腈(83.18,361.1臟 〇1)溶于乙醇（10〇1^)中，加入 40 %的氢氧化钠水溶液(400mL)，回流下搅拌反应10小时。反应结束后，反应液冷却至室温， 加水稀释，析出大量固体，过滤，滤饼用水洗涤至中性，干燥，即得类白色固体（85.5g， 95.4%)〇lH NMR(400MHz,DMS0-d6)87.50(m,lH),7.41(m,lH),6.98(s,lH),6.67(s,lH), 1.65(m,2H),1.08(m,2H).
[0370] 步骤7: l-(2,6_二氯-3-氟-苯基)环丙甲酸的合成
[0371] 将1- (2，6-二氯-3-氟-苯基)环丙甲酰胺(85.5g，344.6mmo 1)溶于醋酸(200mL)中， 加入浓硫酸(50mL)和亚硝酸钠(2.4g，34.5mmol)水溶液(20mL)，回流下搅拌反应20小时。反 应结束后，反应液冷却至室温，加水稀释，析出大量固体，过滤，滤饼用水洗涤至中性，干燥， 即得类白色固体（73.3 8,85.4%)。111匪1?(40冊1^，0150-(16)512.6(8，111)，7.51(111，111)， 7.42(m,lH),1.75(m,2H),1.29(m,2H).
[0372] 步骤8:N_甲基-N-甲氧基-1_(2,6-二氯-3-氟-苯基)环丙甲酰胺的合成
[0373]将 1-(2，6-二氯-3-氟-苯基）环丙甲酸（73 ? 3g，294 ? 4mmol)溶于二氯亚砜（100mL) 中，回流下搅拌反应1小时，减压蒸除过量的二氯亚砜，残留物用二氯甲烷稀释，滴加至N-甲 基-N-甲氧基胺盐酸盐(34.4g. 353.3mmo 1)和三乙胺（153mL，1060mmo 1)的冷二氯甲烷溶液 (500mL)中，室温下搅拌反应3小时。反应结束后，反应液依次用水(2 X 200)和饱和食盐水(2 X200)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯= 20:1)，即得 无色油状液体(69.58,80.8%)。111匪1?(4001抱，0)(：13)7.29(111，11〇,7.04(111，11〇,3.13(8， 3H)，3?00(s，3H)，1?98(m，2H)，1?28(m，2H)?
[0374] 步骤9: (5-溴-2-氟吡啶-3-基）（1-(2，6-二氯-3-氟-苯基)环丙基）甲酮的合成
[0375] 将〇^(56.81^，说，56.8_〇1)加至无水四氢呋喃（20011^)中，降温至-78°(：，然后滴 加5-溴-2-氟-吡啶（10.0g，56.8mmol)，维持-78°C搅拌反应2小时，然后滴加N-甲基-N-甲氧 基-1-( 2，6-二氯-3-氟-苯基)环丙甲酰胺（18 ? 2g，62 ? 5mmol)的四氢呋喃（100mL)溶液，滴加 完毕再在_78°C搅拌反应2小时。反应结束后，反应液冷却至室温，加饱和氯化铵淬灭，乙酸 乙酯（2X100mL)萃取，合并有机相，然后依次用水(2X100mL)和饱和食盐水(2X100mL)洗 涤，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯= 50:1)，即得类白色固 体（10.68,45.8%)。111匪1?(4001泡，〇0(：13)58.60(111，11〇,8.12(111，111)，7.41(111，11〇,7.16 (m,lH),1.95(m,2H),1.30(m,2H).
[0376] 步骤10:5-溴-3-(l_(2,6-二氯-3-氟苯基)环丙基)-lH_吡唑并[3,4-b]吡啶的合 成
[0377] 将（5-溴-2-氟吡啶-3-基）（1-( 2,6-二氯-3-氟-苯基）环丙基）甲酮（10.6g， 26.0mmol)溶于乙醇（100mL)中，加入水合肼（10mL)，回流下搅拌反应10小时。反应结束后， 减压蒸除乙醇，加水稀释，析出大量固体，过滤，滤饼用水洗涤，干燥，柱层析纯化(石油醚： 乙酸乙酯= 10:1)，即得类白色固体(5.88,55.3%)。111-匪1?(4001抱，0)(：13)514.28(8，11〇， 8.36(m,lH),8.22(m,lH),7.33(m,lH),7.12(m,lH),2.03(m,2H),1.34(m,2H).
[0378] 步骤11:5_溴二氯-3-氟苯基)环丙基卜卜^-甲氧基苄基)-lH-吡唑 并[3,4-b]吡啶的合成
[0379] 将5-溴二氯-3-氟苯基）环丙基）-lH_吡唑并[3,4_b]吡啶（5.8g， 14 ? 5mmol)溶于DMF(50mL)中，加入碳酸钾（6 ? 0g ,43 ? 5mmol)和对甲氧基苄基氯（2 ? 5g, 16 . Ommol)，室温下搅拌反应5小时。反应结束后，反应液加水稀释，乙酸乙酯（2 X 50mL)萃 取，合并有机相，然后依次用水(2 X 50mL)和饱和食盐水(2 X 50mL)洗涤，有机相用无水硫酸 钠干燥，浓缩，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯= 20:1)，即得类白色固体(6.9g，90.8%)。111 NMR(400MHz，CDC13)S8.40(m，lH)，8.21(m，lH)，7.41(m，lH)，7.26(m，2H)，7.16(m，lH)，6.97 (m,2H),5.38(s,2H),3.81(s,3H),1.98(m,2H),1.29(m,2H).
[0380] 步骤 12:5-( (N-叔丁氧羰基-哌啶-4-基)-lH-吡唑-4-基)-3-(l-(2，6-二氯-3-氟 苯基)环丙基)-1-(4_甲氧基苄基)-lH-吡唑并[3,4-b]吡啶的合成
[0381] 将5-溴二氯-3-氟苯基)环丙基卜卜^-甲氧基苄基)-lH-吡唑并[3， 4_b]B比啶(6.9g, 13.2mmol)溶于二氧六环/水（100mL，4:1)中，加入1-(1_叔丁氧羰基哌啶-4-基)吡挫-4-硼酸频那醇酯(7.5g，19.8mmol)，然后氮气保护下加入四三苯基膦钯(462mg， 0.4mmo 1)，碳酸铯（12.9g，39.6mmo 1)，80 °C搅拌反应过夜。反应结束后，反应液加水稀释，乙 酸乙酯（3 X 50mL)萃取，合并有机相，然后用饱和食盐水(2 X 50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥， 浓缩，柱层析纯化（石油醚：乙酸乙酯=5 :1)，即得淡黄色胶状物（3.3g，35.7 % )。1H匪R (400MHz，CDC13)S8.67(m，lH)，7.85(m，lH)，7.76(s，lH)，7.63(s，lH)，7.39(m，lH)，7.31(m， 2H)，7.15(m，lH)，6.82(m，2H)，5.63(s，2H)，4.33(m，3H)，3.78(s，3H)，2.94(m，2H)，2.18(m, 2H),2.00(m,2H),1.95(m,2H),1.50(s,9H),1.31(m,2H).
[0382] 步骤 13:3-(l-(2,6-二氯-3-氟苯基）环丙基）-5-(l-(哌啶-4-基）-lH-吡唑-4-基)- 1H-吡唑并[3,4-b]吡啶的合成
[0383] 将5-((N-叔丁氧羰基-哌啶-4-基)-1H-吡唑- 4-基二氯-3-氟苯基） 环丙基)-1-(4_甲氧基苄基)-lH-吡唑并[3,4-b]吡啶(3.3g，4.8mmol)溶于二氯甲烷(20mL) 中，然后滴加三氟乙酸（5mL)和浓硫酸（2mL)，室温下搅拌反应2h。反应结束后，反应体系用 氨水中和至偏碱性，二氯甲烧(2 X 20mL)萃取，然后依次用饱和碳酸氢钠溶液(2 X 30mL)和 饱和食盐水(2X30mL)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇 =10:1)，即得类白色固体（1.3 8,57.5%)。111匪1?(40010^，0)(：13)514.30(8，11〇,8.87(111， lH)，8.22(m，lH)，8.02(s，lH)，7.75(s，lH)，7.39(m，lH)，7.15(m，lH)，4.40(m，lH)，3.38(m, 2H),2.89(m,2H),2.26(m,4H),1.98(m,2H),1.35(m,2H).
[0384] 活性测试部分：
[0385] 人胃癌细胞MKN45的活性测试实验步骤：
[0386] 1.铺板。将处于对数生长期的细胞用消化液消化，新鲜培养基终止，对细胞进行计 数，用新鲜培养基将细胞浓度调整到2*105个/ml，每孔加200此，设调零孔（只加培养基）3 个，其他边缘用无菌PBS填充。
[0387] 2.培养。于37 °C下在5 % C02中孵育48小时，让细胞铺满孔底60 %左右。
[0388] 3.给药。设调零孔，对照组，实验组。每个剂量设3个复孔。将药物用DMS0溶解，配成 10mmol/L母液，再用DMS0将其进行稀释，制成lmmol/L、lOOumol/L、lOymol/L、lmol/L、 0. 1m〇l/L溶液，给药时，取上述浓度溶液lyL用培养基稀释成lmL，即给药浓度为10wnol/L、l ymol/L、100nmol/L、10nmol/L、lnmol/L、0? lnmol/L、0nmol/L(对照组，加lyL DMS0用培养基 稀释成lml)。给药时，将原有孔内液体吸尽，加入含不同浓度药物的新鲜培养基，每孔200y 1。 每天给药，连续三天。
[0389] ?调零孔，只加培养基；
[0390] ?对照组，含与实验组相同体积的溶剂，用完全培养基稀释。每孔200iil;
[0391] ?实验组，将已溶解的药物用培养基稀释成0.1、1、10、100、1000、10000nM浓度，每 孔200yl。
[0392] 4?于 37°C 下在 5%C02 中孵育 72h。
[0393] 5117终止。7211后，每孔加入20此1〇'1'溶液（511^/1111)，继续培养411。
[0394] 6.终止培养，小心吸尽孔内的培养液。
[0395] 7.每孔加入150yl二甲基亚砜(DMS0)，低速震荡10min，待结晶物充分溶解后，在酶 标仪，490nm波长处测其吸光值。
[0396] 按下表2所示对本发明化合物编号。全部化合物1-4的IC50值都小于1000nM。
[0397] 测试化合物按下表1进行编号，所得结果如下表1所示。
[0398] 表1.测试化合物
[0399]
[0400] 测试化合物对人胃癌细胞MKN45的抑制率活性测试，所得结果如附件的图1所示。
【主权项】
1.式(I)的化合物，及其药学上可接受的盐、前药和溶剂化物，其中 X1、X2、X3、X4各自独立地选自N、NH、C、CH或CH 2; W选自 C3-C10 环烷基、C(C1-C10 烷基）2、羰基、-C(0)NH-、-S(0)m-; 1^，1?1|3，1?1。，1?1(1和1^各自独立地选自氢、卤素、-^(：1-(：10烷基、-〇卩 3、-(^^3、-0(：册2、-0C0-10 烷基、-S(0)mC0-10 烷基、-s〇2n(co-io 烷基）（co-io 烷基）、-n(co-io 烷基）（co-io 烷 基）、-N(C0-10烷基)C( =0) (C0-10烷基）、-N(C0-10烷基)C( =0)0(C0-10烷基）、-N(C0-C10 烷基）C( =0)N(C0-C10烷基）、-c( =o)co-cio烷基、-c( =o)oco-cio烷基、-c( =0)N(C0-10 烷基）、-o杂环烷基、-N(C0-10烷基）杂环烷基、-N(C0-10烷基）杂环芳香基、杂环烷基、杂环 芳香基、-S杂环芳香基或-〇杂环芳香基，其中杂环烷基可被一个或多个以下基团任意取代： 氧、C1-10 烷基、c(=o)oco-io 烷基、C(=0)N(C0-10 烷基）（co-io 烷基）、-S02N(C0-10 烷基） (C0-10烷基）或S02C1-10烷基，其中所述烷基部分可被一个或多个以下基团任意取代:羟 基、-0C1-10烷基、-N(C0-10烷基）（C0-10烷基）、-c( =0)N(C0-10烷基）（C0-10烷基）、C( =0) oco-io烷基、c(=o)co-io烷基、杂环烷基或杂环芳香基； R2选自氢、卤素、氰基、-CF3、硝基、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C10环烷基 C0-C10烷基、三元至十元杂环烷基C0-C10烷基、芳香基C0-C10烷基、芳香基C1-C10环烷基、 芳香基三元至十元杂环烷基、杂环芳香基、杂环芳香基C1-C10烷基、杂