泛素特异性蛋白酶7的选择性和可逆性抑制剂的制作方法
【专利摘要】本发明涉及式(I’)的喹唑啉-4-酮化合物，其制备过程和其用途。此类化合物作为泛素特异性蛋白酶，特别是USP7的选择性和可逆性抑制剂是有效的而用于治疗如癌症、神经退行性疾病、炎性病症和病毒感染。
【专利说明】泛素特异性蛋白酶7的选择性和可逆性抑制剂
[0001]本发明涉及泛素特异性蛋白酶的新的选择性和可逆的抑制剂的发现，其制备过程和其治疗用途。
[0002]泛素特异性蛋白酶(USP)是属于去泛素化酶(DUB)家族的半胱氨酸蛋白酶。
[0003]泛素-蛋白酶体系统的失调已经牵涉于多种人类疾病的发病机理，包括癌症(Hoeller 等人 Nat Rev Cancer2006, 6 (10), 776-788),神经退行性疾病(Rubinsztein,Nature2006,443 (7113) ,780-786)和病毒感染(Gao&Luo Can J Physiol Pharmaco12006,
84(1),5-14).在多发性骨髓瘤和套细胞淋巴瘤的治疗上蛋白酶体抑制剂Veleadee
(硼替佐米)的市场成功，已经建立起该系统作为癌症治疗的有效靶标(Adams，Nat RevCancer2004，4(5)，349-360)。有前途的替代物靶向蛋白酶体本身将会干扰上游泛素共轭/去共轭机制，以产生更特异性的，低毒性抗癌剂。
[0004]单和多泛素化可以通过特异性切割泛素的羧基端的异肽键的去泛素化酶被逆转。泛素特异性蛋白酶和泛素羧基端水解酶(UCH)酶是DUB家族的最佳表征成员(Komander 等人 Nat.Rev.Mol.Cell Biol.2009，10(8)，550-63 ;Nijman 等人 Cell2005,123 (5)，773-786)。UCH被认为是优先切割小蛋白质底物及主要是参与泛素的加工和回收利用，但其具体功能仍然知之甚少。USP构成DUB的最大亚家族，有超过60个成员。其从特定的蛋白质底物中去除泛素， 因此防止了其靶向蛋白酶体或调节其亚细胞定位和激活(Daviet&Colland, Biochimie2008,90 (2), 270-83)。基于其蛋白酶活性及参与多种人类疾病，USP正在成为泛素调节机制的药理干预的潜在祀标(Colland, BiochemSoc Trans2010,38，137-43)。
[0005]USP7 (泛素特异性蛋白酶7) /HAUSP (疱疹相关泛素特异性蛋白酶)是USP家族的135kDa蛋白。USP7已被证明与病毒蛋白质相互作用，所述病毒蛋白质如ICPO (VMWllO)、刺激病毒裂解周期的起始的单纯疱疹病毒立即早期基因(Everett等人，J Virol73，1999，417-426)、和 EBNAl (EB 核抗原-1, Epstein-Barr Nuclear Antigen-1) (Ho1waty 等人，J Biol Chem2003，278，29987-29994 和 47753-47761)。人类蛋白质，如 p53 和 p53 的主要E3连接酶，MDM2，也被鉴定为USP7的伴侣和底物(Cummins等人Nature2004，486，Cummins&Vogelstein, Cell Cycle，2004，3，689-692 ;Li 等人 Mol Cell2004，13，879-886 ;Li等人Nature2002，416，648-653)。更广泛地，USP7可以使不同的靶标去泛素化，所述靶标包括Mdm2和p53,且此类后期祀标的网络去泛素化(net deubiquitination)最终决定了功能性P53的水平。与最近的报道一致的是USP7沉默也已显示出通过促进Mdm2降解以增加稳态p53的水平。最近显示出TSPYL5调节USP7和p53的结合，所述TSPYL5是通过与p53竞争结合至USP7上的相同区域而潜在参与乳腺癌形成的蛋白质(Epping等人，Nat CellBiol.2011,13(1):102-8) ο最近，通过产生组成性的高p53水平，USP7的上调和下调均被证明抑制体外结肠癌细胞的增殖和体内肿瘤的生长(Becker等人Cell Cycle2008, 7 (9)，1205-13)。
[0006]USP7还通过Bmi 1/Mel 18的稳定以改变pl6INK4a肿瘤抑制因子的水平(Maertens等人，Embo J.201029，2553-2565)。USP7还稳定其它参与基因组完整性/调节的蛋白质，如DNMT1DNA 甲基化酶和 Claspin 衔接子(Du 等人,Science Signaling2010, 3 (146):ra80 ；Faustrup 等人，J.Cell Biol.2009, 184(1):13-9) ? 重要地是，USP7 和 DNMTl 的丰度在人结肠癌中相互关联，所述DNMTl为参与维持涉及发育和癌症的基因沉默所需的表观基因甲基化的蛋白质(Du等人,Science Signaling, 2010, 3 (146):ra80)。USP7还被证明在人细胞中使著名的肿瘤抑制因子基因PTEN去泛素化，从而引起PTEN的核输出及其之后的失活(Song等人，Nature2008，455 (7214)，813-7)。更重要的是，已首次报道了在前列腺癌中的USP7的过表达，且该过表达与肿瘤的侵袭性直接相关(Song等人，Nature2008，455 (7214)，813-7)。
[0007]USP7还被证明在人细胞中使F0X04去泛素化，从而引起F0X04的核输出及其之后的失活；因此激活了致癌的PI3K/PKB信号转导通路(vander Horst等人，NatCellBiol.2006，8，1064-1073)。最后，USP7在p53介导的细胞应答中对多种类型的应激，如DNA损伤和氧化应激，起到重要作用(Marchenko等人，Embo J.200726，923-934，Meulmeester 等人 MolCell2005,18, 565-576.，van der Horst 等人,Nat CellBiol.2006,8，1064-1073)。
[0008]已报道了包含多肽部分P1-Gly-P3-Ser的USP7蛋白质结合的合成抑制剂，其中P1是谷氨酸残基或带有非极性侧链的氨基酸，且P3是甘氨酸残基或带有非极性侧链的氨基酸(W02006072048)。
[0009]与USP7沉默相关的表型以及USP7和必须病毒蛋白质和致癌通路(诸如p53/Mdm2和PI3K/PKB通路)之间的已知关系强烈暗示了以小分子抑制剂靶向USP7可能有助于癌症和病毒性疾病的治疗(Sippl等人，Future 0ncology2011，7，619-32)。针对USP7的抑制剂最近被报道(Colland等人Molecular Cancer Therapeutics2009，8，2286-95和EP1749822和 PCT/EP2011/050523.2)。
[0010]然而，迄今，似乎还未有特异性和可逆性的USP7小分子抑制剂的报道。
[0011]根据第一个目的，本发明涉及一种式(I)化合物:
[0012]
【权利要求】
1.一种
2.根据权利要求1所述的化合物，其中A是C= O。
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R7是OR、OR9、NRR’或SR。
4.根据权利要求1至2所述的化合物，其中R7是OH或OR9。
5.根据权利要求1至2所述的化合物，其中R7是0H。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中每一个R1是相同的或不同的，R1选自由直链或支链(C1-C6)烷基、卤素、01?、殿1?’、0队0&、(:(0)1?、(:(0)(?、(:(0)殿1?’ 或 NHC (O)R组成的组。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中每一个R1是相同的或不同的，R1选自由直链或支链C1-C6 (烷基)、卤素、OH或直链或支链-O- (C1-C6)烷基组成的组。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，其中R3、R4、R8、R8’各自是相同的或不同的，R3、R4、R8、R8’各自选自由K-(C1-C6)烷基、OH组成的组。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中L2是直链或支链C1-C6(亚烷基)或直链或支链-[C1-C6 (亚烷基)]-O-。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中R6选自由芳基、杂芳基、环烷基或H组成的组，其中所述芳基、杂芳基或环烷基任选地被卤素、直链或支链O- (C1-C6)烷基取代。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物，其中p+n= 4。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中P是2且η是2。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中L1是CH2。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的化合物，选自由下列组成的组: 3-({4_羟基-1-[3-(2-甲氧基苯基)丙酰基]哌啶-4-基}甲基)-3，4_ 二氢喹唑啉-4-酮 7-氯-3- {[1- (2-乙基丁酰基)-4-羟基哌啶-4-基]甲基} -3，4- 二氢喹唑啉-4-酮 3-({1-[2-(3-氟苯氧基)乙酰基]-4-羟基哌啶-4-基}甲基)-3，4-二氢喹唑啉-4-酮 3-{[4-羟基-1-(2-甲基丙酰基)哌啶-4-基]甲基}-6，7-二甲氧基-3，4-二氢喹唑啉-4-酮 3-{[4-羟基-1-(2-甲基丙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3，4-二氢喹唑啉-4-酮 4-羟基-1-[2-甲基-3-(噻吩-2-基)丙酰基]哌啶_4-基}甲基)-3，4-二氢喹唑啉-4-酮 7-氯-3-{[1-(3-环戊基丙酰基)-4-羟基哌啶-4-基]甲基}-3，4-二氢喹唑啉-4-酮3-{[1-(3-环戊基丙酰基)-4-羟基哌啶-4-基]甲基}-3，4_ 二氢喹唑啉-4-酮 7-氯-3-{[4-羟基-1-(3-苯基丙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3，4-二氢喹唑啉-4-酮 3-{[4-羟基-1-(3-苯基丙酰基)哌啶-4-基]甲基}-3，4-二氢喹唑啉-4-酮 7-氯-3-({4-羟基-1-[2-甲基-3-(噻吩-2-基)丙酰基]哌啶_4-基}甲基)_3，4-二氧喧唑琳-4-丽 3-({4-羟基-1-[3-(噻吩-2-基)丙酰基]哌啶_4-基}甲基)-3，4-二氢喹唑啉-4-酮3- {[1- (2-苄基丙酰基)-4-羟基哌啶-4-基]甲基} -3，4- 二氢喹唑啉-4-酮3- {[1- (2-苄基丙酰基)-4-羟基哌啶-4-基]甲基} -7-氯-3，4- 二氢喹唑啉-4-酮或它们的药学上可接受的盐或它们的光学异构体、外消旋体、非对映异构体、对映异构体或互变异构体。
15.-—种用于制备根据权利要求1至14的化合物的方法，包括式(II)化合物与式(III)化合物反应
16.-—种用于制备根据权利要求1至14的化合物的方法，包括式(IV)化合物与式(V)化合物反应
17.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至14的式(I)化合物与药学上可接受的赋形剂。
18.如权利要求1至14中任一项所定义的式(I)化合物用于抑制去泛素化酶的用途。
19.根据权利要求18的使用的用途，所述用途为抑制USP7(泛素特异性蛋白酶7)/HAUSP (疱疹相关泛素特异性蛋白酶)。
20.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物，用于治疗和/或预防癌症及转移、神经退行性疾病、如阿尔茨海默氏病和帕金森氏病、免疫疾病、糖尿病、骨和关节疾病、骨质疏松症、关节炎的炎性病症、心血管疾病、病毒感染和疾病、和/或病毒传染和/或潜伏、细菌感染和疾病。
21.根据权利要求20所述的化合物的用途，其中所述病毒感染和疾病选自单纯疱疹-1或-2病毒感染、甲型肝炎、丙型肝炎、SARS冠状病毒感染和疾病、EB病毒、鼻病毒感染和疾病、腺病毒感染和疾病、脊髓灰质炎。
22.—种组合，其包含如权利要求1至14中任一项所定义的式(I)化合物和一种或多种活性剂，所述一种或多种活性剂选自抗癌剂、神经学剂、血栓溶解剂、抗氧化剂、抗糖尿病剂、抗感染剂、抗 高血压剂、利尿剂、血栓溶解剂、免疫抑制剂、心血管剂、免疫调节剂、抗炎剂、抗病毒剂、抗菌剂。
【文档编号】A61P31/00GK103930415SQ201280054148
【公开日】2014年7月16日 申请日期:2012年8月29日 优先权日:2011年9月2日
【发明者】弗雷德里克·科兰德, 玛丽－伊迪丝·古德尔 申请人:海布里詹尼克斯股份公司