专利名称：：N-喹啉酰胺类衍生物及其制法与用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及喹啉酰胺类衍生物及其制备方法与用途。
背景技术：
：近十年，由于发现了血管生成因子对血管生成的作用，以及血管生成对肿瘤生长和侵入转移、特别对肿瘤早期发生的重要影响，血管生成成为近年来肿瘤研究的热点之一，为肿瘤治疗开辟了一个新的思路。肿瘤细胞或其宿主间质的免疫细胞，如巨噬细胞和成纤维细胞能产生多种肿瘤血管生成因子(v咖orangiogenesisfactor,TAF)，其中血管内皮生长因子(VEGF)的作用最为重要。VEGF是已知最强烈的直接激活血管生成蛋白质，是可溶性血管内皮细胞促有丝分裂素和血管形成因子，并能增加血管通透性。它与内壁细胞上的酪氨酸激酶受体Fit和KDR结合起作用。肿瘤源性VEGF在血管生成的旁分泌剌激中起重要作用，也对肿瘤源性VEGF在血管生成的旁分泌剌激中起重要作用。也对肿瘤细胞的自分泌剌激起作用，尤其是对缺氧发生反应。缺氧通过上调VEGF的内皮细受体KDR而剌激血管生成。VEGF的表达受ras基因和p53基因调节，ras基因上调VEGF的表达，而野生型p53基因则减少VEGF的表达。过量的VEGF表达使血管生成急剧增加，导致肿瘤扩展，其具有重要的肿瘤生物学意义。喹啉酰胺类衍生物是一类用途广泛的化合物，它以喹啉胺为母体，与取代的水杨酸和烟酸衍生物通过酰胺键结合。以喹啉为母体的衍生物具有多种生物活性，包括抗疟疾病、抗糖尿病以及抗HIV等作用。不仅如此，这类化合物在抗癌药物研究中表现出巨大的潜力。主要作为受体酪氨酸激酶抑制剂发挥作用，包括转化生长因子受体(TGFR)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)、血管内皮生长因子(VEGFR)。喹啉胺衍生物由于结构中含有不同取代的酰胺键，且非对称单元是许多酶抑制剂和生物模拟肽的常见结构特征，故多数具有生物活性。因此，喹啉酰胺类化合物具有广泛的应用前景。本专利研究发现，喹啉酰胺类衍生物可以竞争性地与VEGFR的ATP结合位点结合，从而抑制癌症细胞中血管生长因子与其受体的结合，达到抑制癌症细胞生长和扩散的目的。
发明内容本发明的目的在于提供一类新型喹啉酰胺类衍生物以及它们的制备方法与用途。本发明的技术方案如下—类喹啉酰胺类衍生物，其特征是它有如下通式R5式中:当X=C，R丄=OH时，尺2=CH3、Cl、Br、F或I，R3=R4=R5=H;或者R3=Br、F或I，R2=R4=R5=H;或者R4=Br、F或I，R2=R3=R5=H;或者R5=Cl、Br、F或1，则尺2=R3=R4=H;当x=N时，R4=CH3，R丄=Cl、Br、F或I，R2=R3=H，无Rs;或者R丄=Cl、Br、F或I，R4=OH或H，R3=H，无Rs。—种制备上述的N-喹啉酰胺类衍生物的方法，它由下列步骤组成步骤l.将8-氨基喹啉与等物质的量的相应的取代苯甲酸或烟酸，溶于无水(^(:12中，并且加入催化量的1_(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCHC1)作为催化剂，加热，搅拌，于4(TC下回流反应8h，得到澄清反应液；步骤2.在反应液中加入200-300目的柱层析硅胶，搅拌下减压蒸馏，以除去多余的溶剂并使之充分混匀，将所得的硅胶奘柱进行柱层析，以乙酸乙酯石油醚=1:2的混合溶剂作为洗脱液分离出目标产物；步骤3.将得到的洗脱液减压蒸馏除去溶剂，纯化即得到本发明的N-喹啉酰胺类衍生物。上述的N-喹啉酰胺类衍生物的制法，步骤1所述的无水CH2C12的用量可以是每毫摩尔取代喹啉胺加溶剂5ml。上述的N-喹啉酰胺类衍生物的制法，步骤1所述的1_(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的用量可以是每毫摩尔取代喹啉胺加1_(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐200mg。上述的N-喹啉酰胺类衍生物的制法，步骤2所述的柱层析硅胶的用量可以是每毫摩尔取代喹啉胺用硅胶40ml。研究发现本发明的喹啉酰胺类衍生物，与VEGFR有很强的特异性结合能力，通过与VEGFR的结合，阻断肿瘤细胞中的血管内皮增长因子与VEGFR的结合，从而从根本上抑制癌细胞的血管生成和信号转导，抑制癌细胞的增殖。因此本发明的N-喹啉酰胺类衍生物可以应用于制备抗肿瘤药物。具体实施例方式实施例一2-羟基-6-甲基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物1)的制备于50ml单口圆底烧瓶中加入lmmol6_甲基水杨酸和lmmol8-氨基喹啉，200mg的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDOHC1)作为催化剂，并加入5ml无水CH2C12作为反应溶剂。用磁力搅拌器搅拌，并在油浴锅中以4(TC加热回流，反应8小时后，得到澄清反应液。将40ml200-300目的柱层析硅胶加入到反应液中，用旋转蒸发仪减压旋转，以除去多余的溶剂并使之充分混匀。用柱层析法分离目标产物，以乙酸乙酯石油醚=1:2的混合溶剂进行洗脱。将得到的洗脱液再次用旋转蒸发仪减压蒸馏，除去溶剂，即得到白色粉末状目标化合物。产率77X，mp:163-165。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):2.42(s，1H);6.95(d，J=8.4Hz，1H);7.27(d，J=8.4Hz，1H);7.50(dd，J=8.4，4.2Hz，1H);7.57(d，J=3.3Hz，3H)，8.20(dd，J=8.2，1.7Hz，1H);8.82(t，J=7.8，1.9Hz，1H);8.90(dd，J=4.5，1.6Hz，1H);10.90(s，lH);12.09(s，lH);MS(ESI):279.11(C17H15N202+，[M+H]+).Anal.CalcdforC17H14N202:C，73.37;H，5.07;N，10.07;0，11.50;Found:C，73.32;H，5.08;N，10.01;0，11.43.实施例二2-氟-6-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物2)的制备制备方法同实施例一。以6-氟水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到黄色粉末状目标化合物。产率78%，mp:178-179。CZHNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.lO(d，J=8.4Hz，1H);7.41(dd，J=8.8，2.2Hz，1H);7.51-7.54(m，1H);7.58(d，J=3.6Hz，2H);7.77(d，J=2.7Hz，1H);8.12(dd，J=8.0，1.6Hz，1H);8.78(t，J=4.7Hz，1H);8.88(dd，J=4.2，1.5Hz，lH);10.93(s，lH);12.13(s，lH);MS(ESI):283.08(C16H12FN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HnFN202:C，68.08;H，3.03;F，6.73;N，9.92;0，11.34;Found:C，68.16;H，3.08;F，6.81;N，9.87;0，11.26.实施例三2-氯-6-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物3)的制备5制备方法同实施例一。以6-氯水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到白色粉末状目标化合物。产率88%，mp:165-166。CZHNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.03(d，J=8.9Hz，1H);7.41(dd，J=8.8，2.4Hz，1H);7.50-7.55(m，1H);7.63(d，J=3.7Hz，2H);7.81(d，J=2.4Hz，1H);8.21(dd，J=8.2，1.5Hz，1H);8.83(t，J=4.4Hz，1H);8.91(dd，J=4.1，1.6Hz，lH);10.90(s，lH);12.25(s，lH);MS(ESI):299.05(C16H12ClN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HUC1N202:C，64.33;H，3.71;Cl，11.87;N，9.38;0，10.71;Found:C，64.26;H，3.68;Cl，11.80;N，9.33;0，10.68.实施例四2-溴-6-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物4)的制备制备方法同实施例一。以6-溴水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到褐色粉末状目标化合物。产率75%，mp:189-19(TCZHNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.00(d，J=8.9Hz，1H);7.41(dd，J=8.9，2.4Hz，1H);7.50-7.54(m，1H);7.60(d，J=3.9Hz，2H);7.80(d，J=2.4Hz，1H);8.22(dd，J=8.2，1.5Hz，1H);8.80(t，J=4.5Hz，1H);8.92(dd，J=4.2，1.7Hz，lH);10.90(s，lH);12.23(s，lH);MS(ESI):343.00(C16H12BrN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HnBrN202:C，56.00;H，3.23;Br，23.28;N，8.16;0，9.32;Found:C，56.07;H，3.21;Br，23.19;N，8.12;0，9.26.实施例五2-羟基-6-碘-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物5)的制备制备方法同实施例一。以6-碘水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到黄色粉末状目标化合物。产率78%，mp:203-204。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.12(d，J=8.6Hz，61H);7.38(dd，J=8.5，2.3Hz，1H);7.49-7.55(m，1H);7.67(d，J=3.7Hz，2H);7.87(d，J=2.5Hz，1H);8.32(dd，J=8.2，1.7Hz，1H);8.70(t，J=4.3Hz，1H);8.88(dd，J=4.0，1.7Hz，lH);10.94(s，lH);12.26(s，lH);MS(ESI):390.99(C16H12IN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HnIN202:C，49.25;H，2.84;I，32.52;N，7.18;0，8.20;Found:C，49.18;H，2.81;1，32.46;N，7.12;0，8.23.实施例六5-氟-2-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物6)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>制备方法同实施例一。以5-氟水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到灰白色粉末状目标化合物。产率71X，mp:178-179。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):7.15(d，J=8.4Hz，1H);7.41(dd，J=8.8，2.2Hz，1H);7.49-7.53(m，1H);7.65(d，J=3.6Hz，2H);7.73(d，J=2.7Hz，1H);8.12(dd，J=8.0，1.6Hz，1H);8.78(t，J=4.7Hz，1H);8.87(dd，J=4.2，1.5Hz，lH);10.93(s，lH);12.13(s，lH);MS(ESI):283.08(C16H12FN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HnFN202:C，68.08;H，3.03;F，6.73;N，9.92;0，11.34;Found:C，68.14;H，3.01;F，6.80;N，9.89;0，11.29.实施例七5-溴-2-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物7)的制备制备方法同实施例一。以5-溴水杨酸代替6-甲基水杨酸，得到淡黄色粉末状目标化合物。产率80X，mp:187-188。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):6.95(d，J=8.8Hz，1H);7.48-7.55(m，1H);7.60(d，J=3.9Hz，2H);7.93(d，J=2.3Hz，1H);8.25(dd，J=9.6，2.6Hz，lH);8.80(t，J=4.5Hz，1H);8.92(dd，J=4.4，1.7Hz，1H);10.66(s，lH);12.26(s，1H);MS(ESI):343.00(C16H12BrN202+，[M+H]+).Anal.CalcdforC13H17FN202:C，56.00;H，3.23;Br，23.28;N，8.16;0，9.32;Found:C，56.07;H，3.20;Br，23.24;N，8.14;0，9.29.[OO39]实施例八2-羟基-5-碘-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物8)的制备制备方法同实施例一。以5-碘水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到灰白色粉末状目标化合物。产率82%，mp:173-175。C'HNMR(300MHz，d6_DMS0):6.95(d，J=8.8Hz，1H);7.48-7.55(m，1H);7.60(d，J=3.9Hz，2H);7.93(d，J=2.3Hz，1H);8.25(dd，J=9.6，2.6Hz，lH);8.80(t，J=4.5Hz，1H);8.92(dd，J=4.4，1.7Hz，1H);10.66(s，lH);12.26(s，1H);MS(ESI):390.99(C16H12IN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HnIN202:C，49.25;H，2.84;I，32.52;N，7.18;0，8.20;Found:C，49.18;H，2.81;I，32.46;N，7.12;0，8.23.实施例九4-氟-2-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物9)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>制备方法同实施例一。以4-氟水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到浅灰色粉末状目标化合物。产率85X，mp:194-195°CNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):7.14(d，J=8.4Hz，1H);7.40(dd，J=8.6，2.OHz，1H);7.48-7.53(m，1H);7.64(d，J=3.9Hz，2H);7.73(d，J=2.7Hz，1H);8.12(dd，J=8.0，1.6Hz，1H);8.78(t，J=4.7Hz，1H);8.89(dd，J=4.2，1.5Hz，lH);10.93(s，lH);12.13(s，lH);MS(ESI):283.08(C16H12FN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HnFN202:C，68.08;H，3.03;F，6.73;N，9.92;0，11.34;Found:C，68.12;H，3.00;F，6.85;N，9.86;0，11.29.实施例十2-羟基-4-碘-N-喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物10)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>制备方法同实施例一。4-碘水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到黄色粉末状目标化合物。产率80%，mp:187-188。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):6.92(d，J=8.8Hz，1H);7.48-7.55(m，1H);7.60(d，J=3.8Hz，2H);7.94(d，J=2.4Hz，1H);8.28(dd，J=9.6，2.6Hz，lH);8.80(t，J=4.5Hz，1H);8.90(dd，J=4.3，1.7Hz，1H);10.63(s，lH);12.32(s，1H).MS(ESI):390.99(C16H12IN202+，[M+H]+).Anal.CalcdforC16HnIN202:C，49.25;H，2.84;I，32.52;N，7.18;0，8.20;Found:C，49.19;H，2.79;I，32.49;N，7.10;0，8.25.实施例i^一4-溴-2-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物11)的制备制备方法同实施例一。以4-溴水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到白色粉末状目标化合物。产率81X，mp:177-178。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):6.92(d，J=8.8Hz，1H);7.48-7.55(m，1H);7.60(d，J=3.8Hz，2H);7.94(d，J=2.4Hz，1H);8.28(dd，J=9.6，2.6Hz，lH);8.80(t，J=4.5Hz，1H);8.90(dd，J=4.3，1.7Hz，1H);10.63(s，lH);12.32(s，1H);MS(ESI):343.00(C16H12BrN202+，[M+H]+).Anal.CalcdforC13H17BrN202:C，56.00;H，3.23;Br，23.28;N，8.16;0，9.32;Found:C，56.07;H，3.20;Br，23.24;N，8.14;0，9.29.实施例十二3-氯-2-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物12)的制备CI制备方法同实施例一。以3-氯水杨酸代替6-甲基水杨酸，得到白色粉末状目标化合物。产率75%，mp:198-199。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):6.98(d，J=8.9Hz，1H);7.49-7.54(m，1H);7.64(d，J=3.8Hz，2H);7.90(d，J=2.2Hz，1H);8.18(dd，J=9.6，2.6Hz，lH);8.80(t，J=4.5Hz，1H);8.94(dd，J=4.3，1.7Hz，1H);10.63(s，lH);12.22(s，1H).MS(ESI):299.05(C16H12ClN202+，[M+H]+).Anal.CalcdforC16HnClN202:C，64.33;H，3.71;Cl，11.87;N，9.38;0，10.71;Found:C，64.23;H，3.68;Cl，11.80;N，9.32;0，10.67.实施例十三3-溴-2-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物13)的制备9Br制备方法同实施例一。以3-溴水杨酸代替6-甲基水杨酸，得到棕色粉末状目标化合物。产率80X，mp:182-183。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):6.95(d，J=8.8Hz，1H);7.48-7.55(m，1H);7.60(d，J=3.9Hz，2H);7.93(d，J=2.3Hz，1H);8.25(dd，J=9.6，2.6Hz，lH);8.80(t，J=4.5Hz，1H);8.92(dd，J=4.4，1.7Hz，1H);10.66(s，lH);12.26(s，1H);MS(ESI):343.00(C16H12BrN202+，[M+H]+).Anal.CalcdforC13H17BrN202:C，56.00;H，3.23;Br，23.28;N，8.16;0，9.32;Found:C，56.08;H，3.21;Br，23.26;N，8.14;0，9.28.实施例十四3-氟-2-羟基-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物14)的制备制备方法同实施例一。以3-氟水杨酸代替6-甲基水杨酸，得到浅灰色粉末状目标化合物。产率80X，mp:163-165。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):7.07(d，J=8.8Hz，1H);7.49-7.53(m，1H);7.65(d，J=3.7Hz，2H);7.94(d，J=2.4Hz，1H);8.29(dd，J=9.6，2.6Hz，lH);8.85(t，J=4.7Hz，1H);8.96(dd，J=4.2，1.7Hz，1H);10.62(s，lH);12.28(s，1H)MS(ESI):283.08(C16H12FN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HnFN202:C，68.08;H，3.03;F，6.73;N，9.92;0，11.34;Found:C，68.13;H，3.01;F，6.80;N，9.85;0，11.29.[OOSO]实施例十五2-羟基-3-碘-N-(喹啉-8-基)苯甲酰胺(化合物15)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>制备方法同实施例一。以3-碘水杨酸代替6_甲基水杨酸，得到白色粉末状目标化合物。产率79%，mp:241-243°C'HNMR(300MHz，d6_DMS0):6.96(d，J=8.8Hz，2H);7.18(d，J=8.2Hz，2H);7.58(dd，^=2.2，8.8Hz，3H);8.lO(d，J=2.4Hz，2H);10.34(s，1H);11.95(s，1H).MS(ESI):390.99(C16H12IN202+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16HuIN202:C，49.25;H，2.84;I，32.52;N，7.18;0，8.20;Found:C，49.19;H，2.79;I，32.49;N，7.10;0，8.25.实施例十六2-氯-6-甲基-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物16)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>制备方法同实施例一。以2-氯-6_甲基烟酸代替6-甲基水杨酸，得到浅灰色粉末状目标化合物。产率83%，mp:123-124。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):2.56(s，3H);7.45(d，J=4.7Hz，1H);7.64—7.68(m，2H);7.77(dd，J=4.6，0.8Hz，1H);8.11(d，J=4.8Hz，1H);8.45(dd，J=4.9，0.9Hz，1H);8.72(d，J=4.8Hz，1H);8.92(d，J=1.2Hz，1H);10.70(s，lH);MS(ESI):298.07(C16H13ClN30+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16H12C1N30:C，64.54;H，4.06;Cl，11.91;N，14.11;0，5.37;Found:C，64.50;H，4.04;Cl，11.84;N，14.05;0，5.33.实施例十七2-氟-6-甲基-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物17)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>制备方法同实施例-以2-氟-6-甲基烟酸代替6-甲基水杨酸，得到棕色粉末状目标化合物。产率85%，mp:137-139。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):2.53(s，3H);7.42(d，J=4.8Hz，lH);7.62-7.65(m，2H);7.75(dd，J=4.8，0.8Hz，1H);8.10(d，J=4.6Hz，lH);8.39(dd，J=4.7，0.9Hz，1H);8.70(d，J=4.7Hz，1H);8.89(d，J=1.2Hz，1H);10.74(s，lH);MS(ESI):282.10(C16H13FN30+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16H12FN30:C，68.32;H，4.30;F，6.75;N，14.94;0，5.69;Found:C，68.32;H，4.30;F，6.75;N，14.94;0，5.69.实施例十八2-溴-6-甲基-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物18)的制备N、Br制备方法同实施例一。以2-溴-6-甲基烟酸代替6-甲基水杨酸，得到棕色粉末状目标化合物。产率79%，mp:145-146。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):2.56(s，3H);7.45(d，J=4.7Hz，lH);7.66—7.68(m，2H);7.76(dd，J=4.6，0.8Hz，1H);8.01(d，J=4.8Hz，1H);8.47(dd，J=4.5，0.9Hz，1H);8.70(d，J=4.8Hz，1H);8.92(d，J=1.1Hz，1H);10.70(s，lH);MS(ESI):342.02(C16H13BrN30+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16H12BrN30:C，56.16;H，3.53;Br，23.35;N，12.28;0，4.68;Found:C，56.13;H，3.51;Br，23.30;N，12.23;0，4.66.实施例十九2-碘-6-甲基-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物19)的制备制备方法同实施例一。以2-碘-6_甲基烟酸代替6-甲基水杨酸，得到棕色粉末状目标化合物。产率75%，mp:178-179。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):2.56(s，3H);7.45(d，J=4.7Hz，lH);7.64-7.68(m，2H);7.77(dd，J=4.6，0.8Hz，1H);8.11(d，J=4.8Hz，lH);8.45(dd，J=4.9，0.9Hz，1H);8.72(d，J=4.8Hz，1H);8.92(d，J=1.2Hz，1H);10.70(s，lH);MS(ESI):390.00(C16H13IN30+，[M+H]+)Anal.CalcdforC16H12IN30:C，49.38;H，3.11;I，32.61;N，10.80;0，4.11;Found:C，49.33;H，3.09;I，32.65;N，10.83;0，4.08.[OO75]实施例二十2-氯-6-羟基-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物20)的制备制备方法同实施例一。以2-氯-6-羟基烟酸代替6-甲基水杨酸，得到褐色粉末状目标化合物。产率71%，mp:186-187。CZHNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.43(d，J=4.7Hz，1H);7.64-7.68(m，2H);7.79(dd，J=4.6，0.8Hz，1H);8.15(d，J=4.6Hz，1H);8.54(m，1H);8.72(d，J=4.8Hz，1H);8.92(d，J=1.2Hz，1H);10.70(s，1H);13.05(s，1H);MS(ESI):300.05(C15HnClN302+，[M+H]+).Anal.CalcdforC15H10C1N302:C，60.11;H，3.36;Cl，11.83;N，14.02;0，10.68;Found:C，60.01;H，3.33;C1，11.80;N，14.00;0，10.61.实施例二十一2-氟-6-羟基-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物21)的制备制备方法同实施例一。以2-氟-6-羟基烟酸代替6-甲基水杨酸，得到黄色粉末状目标化合物。产率73%，mp:165-166。CZHNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.43(d，J=4.7Hz，1H);7.65-7.68(m，2H);7.80(dd，J=4.9，0.8Hz，1H);8.16(d，J=4.7Hz，1H);8.54(m，lH);8.71(d，J=4.8Hz，lH);8.90(d，J=1.2Hz，lH);10.73(s，lH);13.00(s，lH);MS(ESI):284.08(C15HnFN302+，[M+H]+).Anal.CalcdforC15H10FN302:C，63.60;H，3.56;F，6.71;N，14.83;0，11.30;Found:C，63.63;H，3.52;F，6.70;N，14.81;0，11.34.实施例二十二2-溴-6-羟基-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物22)的制备制备方法同实施例一。以2-溴-6-羟基烟酸代替6-甲基水杨酸，得到白色粉末状目标化合物。产率73%，mp:186-187。CZHNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.45(d，J=4.7Hz，lH);7.68-7.71(m，2H);7.83(dd，J=4.3，0.8Hz，1H);8.14(d，J=4.6Hz，lH);13制备方法同实施例一。以2-碘-6-羟基烟酸代替6_甲基水杨酸，得到棕色粉末状目标化合物。产率79%，mp:184-185。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.37(d，J=4.5Hz，1H);7.54-7.58(m，2H);7.73(dd，J=4.5，0.9Hz，1H);8.13(d，J=4.4Hz，1H);8.52(m，1H);8.70(d，J=4.9Hz，1H);8.92(d，J=1.2Hz，1H);10.76(s，1H);13.02(s，1H);MS(ESI):391.98(C15HnIN302+，[M+H]+)Anal.CalcdforC15H10IN302:C，46.06;H，2.58;1，32.44;N，10.74;0，8.18;Found:C，46.02;H，2.53;I，32.34;N，10.67;0，8.09.实施例二十四2-氯-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物24)的制备制备方法同实施例一。以2-氯烟酸代替6_甲基水杨酸，得到棕色粉末状目标化合物。产率67%，mp:145-146。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):7.63-7.69(m，2H);7.76(dd，J=3.0，1.2Hz，1H);7.79(d，J=1.3Hz，1H);8.41-8.47(m，2H);8.62(dd，J=7.5，1.3Hz，1H);8.97(dd，J=4.2，1.6Hz，1H);9.03(t，J=1.8Hz，lH);10.74(s，lH);MS(ESI):284.05(C15HnClN30+，[M+H]+)Anal.CalcdforC15H10C1N30:C，63.50;H，3.55;Cl，12.50;N，14.81;0，5.64;Found:C，63.45;H，3.53;Cl，12.46;N，14.78;0，5.60.实施例二十五2-氟-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物25)的制备制备方法同实施例一。以2-氟烟酸代替6_甲基水杨酸，得到白色粉末状目标化合物。产率77%，mp:148-149。C,HNMR(500MHz，CDC13，S，ppm):7.70-7.74(m，2H);7.79(dd，J=3.0，1.1Hz，1H);7.85(d，J=1.2Hz，1H);8.40-8.45(m，2H);8.68(dd，J=7.5，1.3Hz，1H);8.92(dd，J=4.1，1.6Hz，1H);9.13(t，J=1.8Hz，1H);10.68(s，1H);MS(ESI):268.08(C15HnFN30+，[M+H]+).Anal.CalcdforC15H10FN30:C，67.40;H，3.77;F，7.11;N，15.72;0，5.99;Found:C，67.28;H，3.75;F，7.06;N，15.76;0，5.96.实施例二十六2-碘-N-(喹啉-8-基)烟酰胺(化合物26)的制备制备方法同实施例一。以2-碘烟酸代替6_甲基水杨酸，得到淡黄色粉末状目标化合物。产率65%，mp:179-180。C，1！1NMR(500MHz，CDC13，S，卯m):7.66-7.69(m，2H);7.78(dd，J=3.3，1.3Hz，1H);7.83(d，J=1.4Hz，1H);8.40-8.45(m，2H);8.60(dd，J=7.2，1.6Hz，1H);8.89(dd，J=4.1，1.7Hz，1H);9.01(t，J=1.9Hz，1H);10.69(s，1H);MS(ESI):375.99(C15HnIN30+，[M+H]+).Anal.CalcdforC15H10IN30:C，48.20;H，2.69;1，33.83;N，11.20;0，4.26;Found:C，48.25;H，2.62;I，33.76;N，11.25;0，4.22.实施例二十七喹啉酰胺类衍生物体外抗人脐静脉内皮细胞增殖活性研究采用5-溴-2'-脱氧鸟苷(BrdU)标记的方法来测定喹啉酰胺类衍生物对人脐静脉内皮细胞增殖的抑制活性，通过半数抑制浓度(ICs。，定义为当抑制率为50%时的药物浓度)来评价活性的高低。人脐静脉细胞在5%小牛血清培养基中孵化过夜之后，加入不同浓度梯度的待测样品，反应30min后，加入VEGF或bFGF诱导。培养48h之后加入5-溴-2'-脱氧鸟苷，继续培养18-24h之后，利用ELISA酶联免疫吸附法测定其OD值，得到的数据可用如下方程得到IC5。值。y=Vmax(1-(x/(K+x)))，其中K值即为IC5。值。(1)培养液(每升)的配制:RPMI-翻培养粉一袋(10.4g)，NaHC032.00g，HEPES2.38g，新生牛血清100ml，青霉素溶液(20万U/ml)0.5ml，链霉素溶液(20万U/ml)O.5ml，加三蒸水溶解后，用5.6X的NaHC03溶液调ra值至7.2-7.4，最后定容至1000ml。过滤灭菌。(2)D-Hanks缓冲液(每升)的配制NaCl8.00g，KC10.40g，Na2HP0412H20150.06g，KH2P040.06g，NaHC030.35g。高压灭菌。(3)VEGF和bFGF的制备利用D-Hanks缓冲液配成浓度为VEGF(10ng/mL)和bFGF(0.3ng/mL)，过滤除菌。(4)胰蛋白酶液的配制利用D-Hanks缓冲液配成浓度为0.5%胰蛋白酶液。过滤除菌。(5)实验药液的配制将测试样品用少量的三蒸水溶解配成储备液，一般按实验最高浓度的IO倍配制储备液。根据化合物溶解性不同，可用三蒸水直接溶解，或用少量匿SO助溶，再加三蒸水溶解。匿SO在培养液中的浓度不宜过大，加药后的每孔细胞悬液中匿SO的终浓度一般不超过0.05%-0.1%。储备液保存于_201:冰箱中备用。(6)人脐静脉内皮细胞的培养为贴壁生长细胞，常规培养于RPMI-1640培养液内(含10X小牛血清、100U/ml链霉素)，置37°C、5%C02培养箱中培养，每隔3_4天传代一次。传代时先弃去原培养液，再用D-Hanks缓冲液洗涤；然后用0.5%胰蛋白酶消化30秒左右，加入少量新鲜培养液终止消化；吹打，使贴壁细胞从培养瓶壁上脱落下来；移取适量至新鲜培养瓶中，再补充新鲜培养液至原体积(培养液体积约为培养瓶容量的1/10)。(7)细胞孵育取对数生长期的人脐静脉内皮细胞，调细胞悬液浓度为1-1.5X105个ml—1。在96孔培养板中每孔加细胞悬液100111，置371:，5%0)2培养箱中培养2处。培养24h后，分别按设计加入药液。(8)加药和诱导将测试药液按照最终浓度的浓度梯度分别加入到各个孔中，每个浓度设6个平行孔。实验分为药物试验组(分别加入不同浓度的测试药)、对照组(只加培养液和细胞，不加测试药)和空白组(只加培养液，不加细胞和测试药)。将加药后的96孔板置于37°C，5%C02培养箱中培养48h。阳性对照药物的活性按照测试样品的方法测定。加药30min后，分别加入VEGF(10ng/mL)和bFGF(O.3ng/mL)i秀导。(9)ELISA测定在培养了48h后的96孔板中，加入5-溴-2'-脱氧鸟苷，继续培养18-24h之后，利用ELISA酶联免疫吸附法测定5-溴-2'-脱氧鸟苷偶联情况。最后，利用自动酶标仪在570nm波长处检测各孔的光密度(OD值)。IC5。值的计算可按照下列公式计算y=Vmax(l-(x/(K+x)))，其中K值即为1〇50值。表1本发明所列N-喹啉酰胺类化合物对HUVEC细胞的抑制IC5。值(nM)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>附AMG706是临床上使用的一种VEGFR抑制剂实施例二十八N-喹啉酰胺类衍生物体外抑制血管内皮生长因子受体VEGFR活性研究抑制血管内皮生长因子受体(VEGFR)活性实验VEGFR购自Sigma-Aldrich公司(St.Louis，Mo，USA)，用DMSO和水(v/v，1:1)的混合溶剂配制各种浓度的待测化合物。，将含有VEGFR(25iiL，10kU'L—0和各种浓度的待测化合物(25yL)的混合溶液放置在化验盘(96iell)中，37。C下预培养lh。再加入ATP(11.8yM)，并在室温下培养60min。然后在665nm荧光下使用铕标记的抗酪氨酸磷酸化抗体进行检测。测得的1&。见表2所示表2本发明所列N-喹啉酰胺类化合物对VEGFR的抑制IC5。值(nM)化合物VEGFR化合物VEGFR1134.6146.72112.71512.7314.616146.54233.617187.356.5186.563.8197.979.6209.68201021147.295.5227.61013.52312.71184.924146.5128.82517.813107.22687.3AMG7063.618权利要求一类N-喹啉酰胺类衍生物，其特征是它有如下通式式中当X＝C，R1＝OH时，R2＝CH3、Cl、Br、F或I，R3＝R4＝R5＝H；或者R3＝Br、F或I，R2＝R4＝R5＝H；或者R4＝Br、F或I，R2＝R3＝R5＝H；或者R5＝Cl、Br、F或I，则R2＝R3＝R4＝H；当X＝N时，R4＝CH3，R1＝Cl、Br、F或I，R2＝R3＝H，无R5；或者R1＝Cl、Br、F或I，R4＝OH或H，R3＝H，无R5。F2009102321985C0000011.tif2.—种制备权利要求l所述的N-喹啉酰胺类衍生物的方法，其特征是它由下列步骤组成步骤1.将相应的取代水杨酸或烟酸与等物质的量的相应的喹啉胺，溶于无水CH2C12中，并且加入催化量的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐作为催化剂，加热，搅拌，于4(TC下回流反应8h，得到澄清反应液；步骤2.在步骤l得到的反应液中加入200-300目的柱层析硅胶，搅拌下减压蒸馏，以除去多余的溶剂并使之充分混匀，将所得的硅胶奘柱进行柱层析，以乙酸乙酯石油醚=1:2的混合溶剂作为洗脱液分离出目标产物；步骤3.将步骤2得到的洗脱液减压蒸馏除去溶剂，纯化即得到N-喹啉酰胺类衍生物。3.根据权利要求2所述的N-喹啉酰胺类衍生物的制法，其特征是步骤1所述的无水CH2C12的用量是每毫摩尔喹啉胺加溶剂5ml。4.根据权利要求2所述的N-喹啉酰胺类衍生物的制法，其特征是步骤1所述的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的用量是每毫摩尔喹啉胺加1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐200mg。5.根据权利要求2所述的N-喹啉酰胺类衍生物的制法，其特征是步骤2所述的柱层析硅胶的用量是每毫摩尔喹啉胺用硅胶40ml。6.权利要求1所述的喹啉酰胺类衍生物在制备抗癌药物中的应用。全文摘要一类喹啉酰胺类衍生物，其特征是它有如下通式式中当X＝C，R1＝OH时，R2＝CH3、Cl、Br、F或I，R3＝R4＝R5＝H；或者R3＝Br、F或I，R2＝R4＝R5＝H；或者R4＝Br、F或I，R2＝R3＝R5＝H；或者R5＝Cl、Br、F或I，则R2＝R3＝R4＝H；当X＝N时，R4＝CH3，R1＝Cl、Br、F或I，R2＝R3＝H，无R5；或者R1＝C1、Br、F或I，R4＝OH或H，R3＝H，无R5。研究发现本发明的喹啉酰胺类衍生物，与VEGFR有很强的特异性结合能力，通过与VEGFR的结合阻断肿瘤细胞中的血管内皮增长因子与VEGFR的结合，从而从根本上抑制癌细胞的血管生成和信号转导，抑制癌细胞的增殖。因此本发明的喹啉酰胺类衍生物可以应用于制备抗肿瘤药物。本发明公开了它们的制法。文档编号A61P35/00GK101723894SQ200910232198公开日2010年6月9日申请日期2009年12月3日优先权日2009年12月3日发明者朱海亮,杨莹,石磊,祝祯伟申请人:南京大学