个具体实施方案中，其中所述式I化合物选自化合物a、化合物b或化合物c。
[0051] 所述的HCV包括其多种基因型以及多种基因亚型，例如la、lb、2a、2b、3a、3b、4a、 5a、6a〇
[0052] 本发明人出乎意料地发现式I化合物（包括化合物a)及其药学上可接受的盐具 有更优异的药代动力学性质，因此适合作为抑制丙型肝炎病毒NS5A蛋白的化合物，进而适 合制备治疗丙型肝炎病毒感染的药物。
【具体实施方式】
[0053] 下面的实施例可更详细地说明本发明，但不以任何形式限制本发明。
[0054] 实施例1化合物a的合成 [0055]步骤（1)
[0057] 〇°C下，双（三氯甲基）碳酸酯（4. 97g, 16. 75mmol)于氯仿（30ml)中，搅拌下加入 ra30D(2ml，46.96mm〇l)，之后缓慢滴加三乙胺（50mmol)与氯仿（10ml)的混合溶液，期间保 持温度于〇°C。滴毕，继续搅拌lh，后升至室温搅拌2h，TLC监测反应完成。反应液经冰水 洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸除溶剂，得化合物3,为无色油状物。
[0058]步骤（2)
[0060] 将碳酸钠（1. 83g, 17. 2mmol)加到L-纟颜氨酸（3. 9g, 33. 29mmol)的氢氧化钠 (1. 32g)水溶液（33ml，lmol/L)中。冰浴冷却至0°C后缓慢加入化合物3(40mmol)，后缓慢 升至室温，继续搅拌4h，TLC监测反应完成。反应液经二氯甲烷洗涤，并用冰水浴冷却，浓盐 酸调pH至1-2,后用二氯甲烷萃取，合并有机相，无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸除溶剂得化 合物5,为白色固体。
[0061] APCI-MS m/z :201. 1(M+Na)+。
[0062] 匪R (DMS0-d6, 500MHz) δ : 12. 49 (s，H，Val⑶OH)，7. 29 (s，H，ValNH)，3. 86 ~ 3. 81 (m，H，ValCH)，2. 08 ~1. 97 (m，H，ValCH (CH3) 3)，0· 87 (d，J = 3. 4Hz，6H，CH (CH3) 2)。 [0063]步骤（3)
[0065] 化合物6(1. 49g, 5. llmmol)于适量无水THF中溶解，加入化合物 5(1. lg，6. 16mmol)，用N，N-二异丙基乙胺（DIPEA)调节溶液pH至8~9,加入缩合剂 HATU(3. 91g，10. 26mmol)。室温下搅拌，反应液由深褐色变为酒红色。TLC监测反应完成。减 压除去溶剂，后用适量二氯甲烷溶解，用饱和碳酸氢钠水溶液和食盐水依次洗涤有机相后， 硅胶柱层析提纯得黄色固体化合物7。洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚=1:2。
[0066] APCI-MS m/z :452. 1(Μ+1)+〇
[0067] ^-NMR (DMS0-d6, 5 0 0MHz) δ :11. 88(s, H, imidazole NH), 7. 59 ~ 7. 40 (m, 4H, ArH),7.23 ~7. 05 (m, 2H, NHCO+imidazoleCH), 5. 24 ~ 5. 08 (m, H, ProCH)，3. 85 ~3. 75 (m, 3H, ProNCH2CH2CH2+ValCH)，2. 24 ~1. 98 (m, 5H, ProNCH2C H2CH2+ValCH (CH3) 3)，0· 89 (d，J = 3. 4Hz，6H，CH (CH3) 2)。
[0068]步骤（4)
[0070] 化合物 7 (0· 25g, 0· 56mmol)、化合物 8 (0· 28g, 0· 56mmol)、碳酸纳 (0.152g，1.44mmol)、催化剂四（三苯基膦）钯于四氢呋喃/水=10:l(30mL)中。氮气保 护，80°C下反应24h小时，TLC监测反应结束。减压除去溶剂后加入适量二氯甲烷溶解。用 饱和碳酸氢钠水溶液和食盐水依次洗涤有机相后，硅胶柱层析提纯，得白色泡沫状固体化 合物a。洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚=1:1。
[0071] APCI-MS m/z :764. 51 (M+Na)+。
[0072] NMR (DMS0-d6, 500MHz) δ : 11. 56 (s，2H，imidazoleNH)，7· 69 ~ 7. 48 (m, 8H, ArH),7.26 ~7. 03 (m, 4H, NHCO+imidazoleCH), 5. 24 ~ 5.05(m，2H，ProCH)，4.09 ~4.04(m，2H，ValCH)，3.85 ~3.75(m，4H，ProNHCH2CH2C H2)，3. 58 (s，3H，0CH3)，2. 24 ~1. 98 (m，10H，ProNHCH2CH2CH2+CH (CH3) 2)，0· 87 (d，J = 3. 6Hz，12H，CH(CH3)2)。
[0073] 核磁数据中，Val表示缬j氨酸结构部分，imidazole表示咪唑环部分，Ar表示苯基 部分，Pro表示吡咯烷环部分。"H"表示特定峰所对应的氢。
[0074] 实施例2大鼠中的药代动力学评价
[0075] 实验目的：研究大鼠给予daclatasvir、化合物a后，考察相对生物利用度及药代 动力学行为。
[0076] 实验动物：
[0077] 种类及品系：SPF级SD大鼠
[0078] 性别及数量：雄性，6只
[0079] 体重范围：200~210g
[0080] 来源：上海西普尔-必凯实验动物有限公司
[0081] 实验及动物合格证号：SCXK(沪）2013-0016
[0082] 实验过程：
[0083] 大鼠，雄性，体重200~210g，随机分为2组，于实验前一天下午开始禁食过夜但可 自由饮水。在血样采集之前，预先在m)TA-K2抗凝管中加入20 μ L的2M氟化钠溶液（酯酶 抑制剂），于80度烘箱内烘干后，置于4度冰箱存放。
[0084] 受试动物给药前禁食12h(不禁水），Α组i. g.给予daclatasvir 5mg/kg，Β组 i.g.给予化合物a 5. 04mg/kg，分别于给药前（Oh)及给药后15min、30min、lh、2h、3h、5h、 8h、10h和24h，于眼眶取血0. 1-0. 2mL，抗凝后，尽快将试管轻轻颠倒混匀5 - 6次后，立即 4000rpm，10min条件下离心分离血浆。收集全部血浆后于-20°C保存待测。所有时间点样 品采集后测定每个时间点的血浆中的血药浓度。
[0085] 根据上述所得的给药后平均血药浓度-时间数据，采用Winnonin软件计算主要药 代动力学参数。详见表1。
[0086] 表L大鼠给予daclatasvir及化合物a后药代参数
【主权项】
1. 化合物a或其药学上可接受的盐，其中D是氘，2. 权利要求1的化合物a或其药学上可接受的盐，其中所述药学上可接受的盐为二盐 酸盐。3. 化合物7，4. 一种化合物a的制备方法，包括：在碱和催化剂的存在下，化合物7和化合物8经偶 联反应制得化合物a，5. 权利要求4的制备方法，其中所述碱选自碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾或醋酸钾。6. 权利要求4的制备方法，其中所述催化剂选自钯催化剂。7. 权利要求4的制备方法，其中反应溶剂选自二氧六烷、四氢呋喃、二甲醚或水中的一 种或多种。8. -种化合物a的制备方法，包括以下步骤：(1) 在碱和缩合剂的存在下，化合物5和化合物6反应生成化合物7 ; (2) 在碱和催化剂的存在下，化合物7和化合物8经偶联反应制得化合物a。9. 一种药物组合物，其含有式化合物a或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的 载体。10. 权利要求1或2的化合物a或其药学上可接受的盐、权利要求9的药物组合物在制 备治疗丙型肝炎病毒感染的药物中的用途。
【专利摘要】本发明属于药物化学领域，具体涉及氘代的丙型肝炎病毒NS5A蛋白抑制剂、其制备方法、含有该抑制剂的药物组合物、该抑制剂及其药物组合物在制备治疗丙型肝炎病毒感染的药物中的用途。本发明的式I化合物及其药学上可接受的盐具有优异的药代动力学性质，因此适合作为抑制丙型肝炎病毒NS5A蛋白的化合物，进而适合制备治疗丙型肝炎病毒感染的药物。
【IPC分类】A61P31/14, C07D403/04, A61K31/4178, C07D403/14
【公开号】CN105524049
【申请号】CN201410510406
【发明人】吉民, 田心, 宗玺, 徐宏江, 李锐, 张喜全
【申请人】正大天晴药业集团股份有限公司, 苏州东南药业股份有限公司
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2014年9月28日