本发明属于医药化工领域，涉及乙内酰脲类化合物、其制备方法、包含它们的药物组合物及其作为β-分泌酶抑制剂用于制备预防和/或治疗阿尔茨海默病及其它由β-淀粉样多肽聚集或沉淀引起的疾病的药物的用途。
背景技术：
：阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease)是一种常见的慢性神经退行性疾病，临床表现为进行性的记忆减退和认知障碍，最终丧失生活自理能力，其病理特征表现为神经细胞内出现神经纤维缠结(neurofibrillarytangle)以及细胞外存在老年斑(senileplaque)。老年斑的主要成分是一系列长短不等的β-淀粉样多肽(β-amyloidpeptide，Aβ)。Aβ是一种含有39-43个氨基酸的多肽，来源于β淀粉样前体蛋白(β-amyloidprecursorprotein,β-APP)。β-APP在体内裂解有两种途径：非淀粉样途径和淀粉样途径。非淀粉样途径是指β-APP经α-分泌酶、γ-分泌酶裂解后，不产生Aβ；淀粉样途径是指β-分泌酶(β-secretase)在β-APP的N端进行裂解，产生包含完整Aβ序列的β-CTF(C-terminalfragments)，随后β-CTF被γ-分泌酶裂解形成Aβ。β-分泌酶属于天冬氨酸蛋白酶，也称之为BACE1、Asp2或Memapsin-2(SinhaS,AndersonJP,BarbourR,etal:Nature,1999,402(6761):537-540)。由于Aβ的产生与代谢、解离与聚积的不均衡，异常多的Aβ逐渐聚积形成老年斑，从而导致了其它如神经纤维缠结、小神经胶质细胞炎症、神经元细胞衰亡和神经递质缺乏等病理改变，最终形成老年痴呆症。β-分泌酶是产生Aβ的限速酶，因此，通过抑制β-分泌酶的活性来减少或阻断Aβ的生成，从而降低Aβ的含量，防止Aβ在脑内聚积继续形成老年斑来预防或治疗阿尔茨海默病(HardyJ,DennisDJ.Science,2002,297:353-356)。同时也可以用于预防或治疗其它由β-淀粉样多肽聚集或沉淀引起的淀粉样变性血管病，库鲁(Kuru)病和唐氏(Down)综合症等疾病。BACE1基因敲除的小鼠脑内没有Aβ的产生，生活基本正常，进一步表明可以通过阻断Aβ的产生来预防或治疗由Aβ聚集或沉淀引起的疾病，特别是阿尔茨海默病等神经退行性疾病，并且推断不会产生很大的副作用(RoberdsSL,AndersonJ,BasiG,etal:HumMolGenet,2001,10(12):1317-1324)。因此，目前需要开发新的能够有效抑制β-分泌酶活性的药物。技术实现要素：本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了式I所示的化合物。本发明人惊奇地发现，式I的化合物或其可药用盐能够有效地抑制β-分泌酶的活性，可以减少淀粉样前体蛋白被β-分泌酶代谢生成β-淀粉样多肽，从而降低β-淀粉样多肽在体内的含量，防止其在体内继续聚积形成沉淀。因此，本发明的式I化合物或其可以用于治疗或预防阿尔茨海默病等神经退行性疾病以及其它与β-淀粉样多肽聚集或沉淀相关的疾病或病症例如由β-淀粉样多肽聚集或沉淀引起的淀粉样变性血管病、库鲁病和唐氏综合症等。由此提供了下述发明：本发明的一个方面涉及式I所示的化合物或其可药用盐，其中：G1为其中R1选自氢、卤素、甲基、三氟甲基、三氟甲氧基和硝基；G2选自其中R2选自氢、R3选自氢、上述各取代基中的虚线表示连接位点。术语“卤素”选自氟、氯、溴、碘等。在本发明的一个实施方案中，所述的化合物或其可药用盐，其选自下面的表1中的化合物，或其可药用盐：表1：本发明涉及的部分化合物本发明的另一方面涉及本发明任一项所述的化合物或其可药用盐的制备方法，包括下述步骤：其中，条件a表示TBAF，PdCl2(PPh3)2，回流，CuI，条件b表示KMnO4，MgSO4，Na2CO3，条件c表示1-甲基盐酸胍，Na2CO3,EtOH/H2O；上述G1和G2的含义分别如上面任一项中所述。在本发明的一个实施方案中，通式I化合物骨架的基本合成步骤如下：条件a表示TBAF，PdCl2(PPh3)2，回流，CuI，条件b表示KMnO4，MgSO4，Na2CO3，条件c表示1-甲基盐酸胍，Na2CO3,EtOH/H2O；对于不同的G1、G2取代基团，具体的合成路线会有所不同。主要区别在于结构的构建以及G1、G2基团的衍生化，骨架的合成方法类似。上述G1和G2的含义分别如上面任一项中所述。在本发明的一个实施方案中，所述的制备方法，其选自如下的方法(1)至(4)中的任意一种方法：方法(1)：当G2为G1为R2为时，合成路线如下：条件a表示TBAF，PdCl2(PPh3)2，回流，CuI，条件b表示KMnO4，MgSO4，Na2CO3，条件c表示1-甲基盐酸胍，Na2CO3，EtOH/H2O；条件d表示acetone，K2CO3；方法(2)：当G2为G1为R2为时，合成路线如下：条件a表示TBAF,PdCl2(PPh3)2，CuI，回流，条件b表示PdCl2(PPh3)2，TBAF，条件c表示KMnO4，MgSO4,Na2CO3，条件d表示1-甲基盐酸胍，Na2CO3；方法(3)：当G2为G1为时，合成路线如下：条件a表示TBAF,PdCl2(PPh3)2,CuI,回流，条件b表示KMnO4,MgSO4,Na2CO3，条件c表示HCl/THF，条件d表示THF,DIPEA，条件e表示1-甲基盐酸胍，Na2CO3；以及方法(4)：当G2为G1为时，合成路线如下：条件a表示PdCl2(PPh3)2,K2CO3，条件b表示1-甲基盐酸胍,Na2CO3，条件c表示acetone,K2CO3，条件d表示PdCl2(PPh3)2,TBAF。对于G为不同取代基的各衍生物，其合成路线分别如下：1、当G2为(且R2不为)时，以G1为/R2为为例，合成路线如下：a.)TBAF,PdCl2(PPh3)2,回流,CuI,b.)KMnO4,MgSO4,Na2CO3,c.)1-甲基盐酸胍,Na2CO3,EtOH/H2O；d.)acetone,K2CO3G1为时，反应路线同上。R2为其它基团时，只需要将换成其它相应试剂；或将间溴苯酚换成Boc保护的间溴苯胺，生成乙内酰脲骨架之后再脱除Boc保护，之后再进行衍生化即可。本领域技术人员应该容易理解这些酚羟基或芳香胺的酰化或取代反应。2、当G2为(且R2为)时，以G1为为例，合成路线如下：a.)TBAF,PdCl2(PPh3)2,CuI,回流,b.)PdCl2(PPh3)2,TBAF,c.)KMnO4,MgSO4,Na2CO3,d.)1-甲基盐酸胍,Na2CO3G1为时，反应路线同上。3、当G2为时，以G1为为例，合成路线如下：a.)TBAF,PdCl2(PPh3)2,CuI,回流,b.)KMnO4,MgSO4,Na2CO3,c.)HCl/THFd.)THF,DIPEAe.)1-甲基盐酸胍,Na2CO3在脱除MOM保护基时得到两个中间体，经分离后分别能得到一种终产物。G1为时，反应路线同上。4、当G2为时，以G1为为例，只需要选取关键中间体使用相应的间氨基苯硼酸/间羟基苯硼酸/间溴苯硼酸/苯硼酸作为结构单元，就能进行进一步的衍生化。合成路线如下，不同路线选取不同R3基团作为代表，本领域技术人员应该容易理解各种基团之间是可以自由替代的。a.)PdCl2(PPh3)2,K2CO3,b.)1-甲基盐酸胍,Na2CO3c.)acetone,K2CO3d.)PdCl2(PPh3)2,TBAFG1为时，反应路线同上。根据本发明的详细教导以及已有的合成常识，本领域技术人员可以容易地合成本发明的式I化合物。本发明的再一方面涉及一种药物组合物，其包含治疗和/或预防有效量的本发明任一项所述的化合物或其可药用盐，以及任选的药学上可接受的辅料或载体。通常本发明药物组合物含有0.1－90重量％的式Ⅰ化合物和/或其可药用盐。药物组合物可根据本领域已知的方法制备。用于此目的时，如果需要，可将式Ⅰ化合物或其可药用盐与一种或多种固体或液体药物辅料结合，制成可作为人用的适当的施用形式或剂量形式。本发明的式Ⅰ化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。给药剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、脂质体、透皮剂、口含片、栓剂、冻干粉针剂等。可以是普通制剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种辅料。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，例如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯、山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，例如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，例如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氢化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高岭土、滑石粉等；粘合剂如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。为了将给药单元制成栓剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体。关于载体的例子是，例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。为了将给药单元制成胶囊，将有效成分式Ⅰ化合物或其可药用盐与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明明胶囊或软胶囊中。也可将有效成分式Ⅰ化合物或其可药用盐制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。为了将给药单元制成注射用制剂，如溶液剂、乳剂、冻干粉针剂和混悬剂，可以使用本领域常用的所有稀释剂，例如，水、乙醇、聚乙二醇、1,3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。本发明式Ⅰ化合物，或其可药用盐的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重及个体反应，所用的具体化合物，给药途径及给药次数等。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药。本文所用的术语“组合物”意指包括包含指定量的各指定成分的产品，以及直接或间接从指定量的各指定成分的组合产生的任何产品。可改变本发明药物组合物中各活性成分的实际剂量水平，以便所得的活性化合物量能有效针对具体患者、组合物和给药方式得到所需的治疗反应。剂量水平须根据具体化合物的活性、给药途径、所治疗病况的严重程度以及待治疗患者的病况和既往病史来选定。但是，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。本发明的再一方面涉及本发明任一项所述的化合物或其可药用盐在制备用于治疗和/或预防和/或辅助治疗与β-淀粉样多肽聚集或沉淀有关的疾病或病症的药物中的用途；优选地，所述与β-淀粉样多肽聚集或沉淀有关的疾病或病症是由β-淀粉样多肽聚集或沉淀引起的疾病或病症；优选地，所述的疾病或病症选自阿尔茨海默病、淀粉样变性血管病、库鲁病和唐氏综合症中的任意一种或者多种。本发明的再一方面涉及本发明任一项所述的化合物或其可药用盐在制备抑制β-分泌酶的药物或者试剂中的用途。本发明的再一方面涉及本发明任一项所述的化合物或其可药用盐在制备减少或阻断Aβ的生成的药物中的用途。本发明的再一方面涉及一种治疗和/或预防和/或辅助治疗与β-淀粉样多肽聚集或沉淀有关的疾病或病症的方法，包括给与受试者有效量的本发明任一项所述的化合物或其可药用盐的步骤。当用于上述治疗和/或预防和/或辅助治疗时，治疗和/或预防有效量的一种本发明化合物可以以纯形式应用，或者以药学可接受的盐的形式应用。或者，所述化合物可以以含有该目的化合物与一种或多种药物可接受辅料的药物组合物给药。但应认识到，本发明化合物和组合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内作出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；所采用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；与所采用的具体化合物组合使用或同时使用的药物；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。一般说来，本发明式Ⅰ化合物用于哺乳动物特别是人的剂量可以介于0.001-1000mg/kg体重/天，例如介于0.01-100mg/kg体重/天，例如介于0.01-10mg/kg体重/天。根据本发明的化合物可以有效地预防和/或治疗本发明所述的各种疾病或病症。术语“有效量”是指可在受试者中实现治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的剂量。术语“疾病和/或病症”是指所述受试者的一种身体状态，该身体状态与本发明所述疾病和/或病症有关。术语“受试者”可以指患者或者其它接受本发明药物组合物以治疗、预防、减轻和/或缓解本发明所述疾病或病症的动物，特别是哺乳动物，例如人、狗、猴、牛、马等。本发明的再一方面涉及一种在体内或体外抑制β-分泌酶的方法，包括使用有效量的本发明任一项所述的化合物或其可药用盐的步骤。在本发明的一个实施方案中，所述方法是非治疗目的的。本发明的再一方面涉及一种在体内或体外减少或阻断Aβ的生成的方法，包括使用有效量的本发明任一项所述的化合物或其可药用盐的步骤。在本发明的一个实施方案中，所述方法是非治疗目的的。在本发明的上下文中，使用如下缩略语：Boc：叔丁氧羰基TBAF：四丁基氟化氨DMSO：二甲基亚砜dppf：1,1-双二苯基膦二茂铁PdCl2(PPh3)：1,1-双三苯基膦二氯化钯复合物PdCl2(dppf)：1,1-双二苯基膦二茂铁二氯化钯复合物。具体实施方式下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。化合物的熔点由RY-1熔点仪测定，温度计未较正。质谱由MicromassZabSpec高分辨率质谱仪(分辨率1000)测定。1H-NMR由JNM-ECA-400超导NMR仪测定，工作频率1H-NMR400MHz。实施例1：3-(4-环丙基-2-亚氨基-1-甲基-5-氧代-4-咪唑烷)苯基-乙基(甲基)氨基甲酸酯的制备(化合物1)反应路线：中间体制备：3-(环丙乙炔基)苯酚环丙乙炔(1.2g)和间溴苯酚(3.4g)溶于30mlTHF中，加入TBAF15.6g，PdCl2(PPh3)20.42g，油浴80℃反应8h。体系冷却至室温，加水50ml、乙酸乙酯40ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，得黄色油状液体2.9g，收率92％。1-环丙基-2-(3-羟基苯基)乙烷-1,2-二酮上步中间体溶于96ml丙酮和60ml水的混合溶剂中，依次加入硫酸镁4.4g、碳酸钠2.9g、高锰酸钾11.6g，室温反应2h，加水100ml、乙酸乙酯150ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，浓缩，得黄色油状液体2.2g，收率63％。5-环丙基-5-(3-羟基苯基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮上步中间体与1-甲基胍盐酸盐1.5g、碳酸钠3.2g混合，加入30ml50％乙醇溶解，油浴90℃反应2h。反应完成后，体系冷却至室温，浓缩除去乙醇，加水25ml、乙酸乙酯25ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比10:1洗脱，得白色固体1.2g，收率42％。目标产物制备：上步中间体(0.5g)溶于15ml无水THF中，加入N-甲基-N-乙基-氨基甲酰氯0.62g、DIPEA2ml，回流反应24h。体系冷却至室温，直接硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比30:1洗脱，得无色油状液体0.24g。油状液体溶于5ml乙醚，剧烈搅拌下滴加2.2NHCl/Et2O0.5ml，有白色固体析出，过滤，烘干，得目标化合物0.07g，收率21％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.4246-0.5458(4H,m),1.0397-1.1048(4H,m),1.6457-1.6863(1H,m),2.8542(2H,s),2.9572(3H,s),3.0489-3.0840(2H,m),3.3194-3.3376(1H,m),3.5295-3.5463(1H,m),6.7158-6.7410(1H,m),6.9379-6.9491(2H,m),7.1803(1H,t,J＝8.12Hz),9.1468(1H,d,J＝18.48Hz)。实施例2：5-环丙基-5-(3-(环丙乙炔基)苯基)-2-亚氨基-3-甲基-咪唑啉-4-酮的制备(化合物2)反应路线：中间体制备：中间体制备路线与实施例1基本相同，只是原料之一换成间二溴苯，在1-环丙基-2-(3-溴-苯基)乙烷-1,2-二酮制备得到之后多出一步，与环丙乙炔反应得1-环丙基-2-(3-(环丙乙炔基)苯基)乙烷-1,2-二酮。该步操作如下：环丙乙炔0.33g与1-环丙基-2-(3-溴-苯基)乙烷-1,2-二酮0.6g混合溶于30ml无水THF中，加入TBAF3.9g、PdCl2(PPh3)20.11g，油浴80℃反应8h。反应完成后，体系冷却至室温，加水40ml、乙酸乙酯40ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，石油醚/乙酸乙酯体积比25:1洗脱，得黄色油状液体0.45g。目标产物制备：将上步中间体0.21g与1-甲基胍盐酸盐0.18g、碳酸钠0.36g混合，加入15ml50％乙醇溶解，油浴90℃反应2h。反应完成后，体系冷却至室温，浓缩除去乙醇，加水20ml、乙酸乙酯20ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比20:1洗脱，得白色固体59mg，收率24％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.12-0.14(1H,m),0.30-0.35(3H,m),0.72-0.74(2H,m),0.86-0.88(2H,m),1.46-1.56(2H,m),2.91(3H,s),6.89(1H,s,br),7.22-7.33(2H,m),7.53-7.56(2H,m)。实施例3：5-环丙基-2-亚氨基-5-(1H-茚-7-基)-3-甲基咪唑啉-4-酮的制备(化合物3)该实施例与下一实施例的合成路线如下：中间体制备：4-(环丙乙炔基)-1-(甲氧基-亚-甲氧基)-2,3-二氢-1H-茚环丙乙炔(1.2g)与中间体47(5.1g)溶于30mlTHF中，加入TBAF15.6g、PdCl2(PPh3)20.42g，油浴80℃反应8h。反应完成后，体系冷却至室温，加水40ml、乙酸乙酯40ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，石油醚/乙酸乙酯体积比20:1洗脱，得黄色油状液体4.5g(混合物)。1-环丙基-2-(1-(甲氧基-亚-甲氧基)-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙烷-1,2-二酮上步中间体溶于96ml丙酮与60ml水的混合溶剂中，依次加入硫酸镁3.6g、碳酸钠2.1g、高锰酸钾9.4g，室温反应2h，然后加水100ml、乙酸乙酯100ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，石油醚/乙酸乙酯体积比20:1洗脱，得黄色油状液体4.2g(混合物)。1-(1-氯-2,3-二氢-1H-茚-4-基)-2-环丙基乙烷-1,2-二酮上步中间体溶于30ml的THF中，剧烈搅拌下加入浓盐酸30ml，室温搅拌30min，加入水20ml、乙酸乙酯25ml，充分振荡，分液，有机相以饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，石油醚/乙酸乙酯体积比10:1-5:1洗脱，得目标中间体0.10g，同时分得中间体4-(环丙乙炔基)-1-氯-2,3-二氢-1H-茚1.60g。目标产物制备：将上步目标中间体与1-甲基胍盐酸盐0.1g、碳酸钠0.3g混合，加入10ml50％乙醇溶解，加热至90℃反应2h。反应完成后，体系冷却至室温，浓缩除去乙醇，加水15ml、乙酸乙酯15ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比20:1洗脱，得白色固体38mg，收率34％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.1243-0.6119(3H,m),1.2333(1H,s),1.5745-1.5948(1H,m),2.9694-3.0541(5H,m),6.5374-6.5515(2H,m),6.8933-6.9067(1H,m),7.1315-7.4062(2H,m),7.6198-7.6934(1H,m)。实施例4：5-环丙基-2-亚氨基-3-甲基-5-(1-(甲基(2-丙炔基)氨基))-2,3-二氢-1H-茚-4-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物4)中间体制备：1-环丙基-2-(1(甲基(2-丙炔基)氨基))-2,3-二氢-1H-茚-4-基)乙烷-1,2-二酮中间体4-(环丙乙炔基)-1-氯-2,3-二氢-1H-茚1.60g溶于10ml无水THF中，加入甲基丙炔胺0.5g、DIPEA2ml，回流反应24h。体系冷却至室温，直接硅胶柱分离，石油醚/乙酸乙酯体积比2:1洗脱，得无色油状液体0.62g，收率34％。目标产物制备：中间体64与1-甲基胍盐酸盐0.3g、碳酸钠0.6g混合，加入20ml50％乙醇溶解，加热至90℃反应2h。反应完成后，体系冷却至室温，浓缩除去乙醇，加水15ml、乙酸乙酯15ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比20:1洗脱，得白色固体53mg。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.1016-0.1247(1H,m),0.3636-0.4715(2H,m),0.6439-0.6880(1H,m),1.0351(1H,d,J＝5.88Hz),1.5098-1.5630(1H,m),1.9035-1.9519(2H,m),2.1018-2.1123(3H,m),2.5235-2.5810(1H,m),3.0160(3H,s),3.1365-3.1471(1H,m),3.2199-3.3677(4H,m),4.2603-4.3233(1H,m),7.2329-7.2665(2H,m),7.6952-7.7177(1H,m)。实施例5：3'-(4-环丙基-2-亚氨基-1-甲基-5-氧代-4-咪唑烷)-[1,1'-二苯基]-3-基-乙基(甲基)氨基甲酸酯的制备(化合物5)反应路线：中间体制备：该化合物中间体的合成也是以1-(3-溴苯基)-2-环丙乙烷-1,2-二酮为关键中间体，再与3-羟基苯硼酸发生Suzuki反应。从该步骤开始，具体操作如下：1-环丙基-2-(3'-羟基-[1,1'-二苯基]-3-基)乙烷-1,2-二酮将中间体1-(3-溴苯基)-2-环丙乙烷-1,2-二酮(1.2g)与3-羟基苯硼酸1.2g溶于30ml1,4-二氧六环，然后加入碳酸钾2.4g、PdCl2(PPh3)20.15g，慢慢加水至体系澄清，加热至90℃反应12h。反应完成后，体系冷却至室温，加水30ml、乙酸乙酯40ml，充分振荡，分液，有机相以饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，得白色固体1.2g，收率95％。5-环丙基-5-(3'-羟基-[1,1'-二苯基]-3-基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮上步中间体与1-甲基胍盐酸盐0.6g、碳酸钠1.2g混合，加入15ml50％乙醇溶解，油浴90℃反应2h。反应完成后，体系冷却至室温，浓缩除去乙醇，加水25ml、乙酸乙酯30ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比10:1洗脱，得白色固体0.82g，收率62％。目标产物制备：上步中间体(0.3g)溶于10mlTHF中，加入N-甲基-N-乙基-氨基甲酰氯0.3g、DIPEA0.5ml，回流反应36h，体系冷却至室温，直接硅胶柱分离，得白色固体0.07g，收率19％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.4810-0.5685(4H,m),1.0421-1.1082(3H,m),1.7348-1.8015(1H,m),2.8636(2H,s),2.9800(3H,d,J＝4.04Hz),3.0670(1H,s),3.5143-3.5664(1H,m),6.7723-6.7964(1H,m),7.0206-7.0615(2H,m),7.2722(1H,t,J＝7.64Hz),7.4482-7.5681(3H,m),7.7665(1H,s),9.2919(1H,d,J＝20.4Hz),9.5853(1H,s)。实施例6：3'-(4-环丙基-2-亚氨基-1-甲基-5-氧代-4-咪唑烷)-[1,1'-二苯基]-3-基-二甲基氨基甲酸酯的制备(化合物6)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.4750-0.5664(4H,m),1.7540-1.7904(1H,m),2.8850(3H,s),2.9854(3H,s),3.0952(3H,s),6.7730-6.7971(1H,m),7.0196-7.0594(2H,m),7.2724(1H,t,J＝7.84Hz),7.4489-7.5683(3H,m),7.7555(1H,s),9.2945(1H,s),9.5919(1H,s)。实施例7：5-环丙基-2-亚氨基-3-甲基-5-(3'-(2-丙炔基)-氧代)-[1,1'-二苯基]-3-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物7)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.1764-0.1966(1H,m),0.3104–0.4389(3H,m),1.5423-1.5866(1H,m),2.9384(3H,s),3.6110(1H,t,J＝2.24Hz),4.8804(2H,d,J＝2.24Hz),6.9900-7.0152(1H,m),7.1845-7.2114(2H,m),7.3941-7.4417(2H,m),7.5342-7.5538(1H,m),7.5970-7.6166(1H,m),7.8419(1H,s)。实施例8：5-环丙基-5-(3'-(2-氟乙氧基)-[1,1'-二苯基]-3-基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮的制备(化合物8)参考实施例5合成方法。此系列最后一步取代反应后处理稍有不同：将中间体5-环丙基-5-(3'-羟基-[1,1'-二苯基]-3-基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮(0.15g)溶于5ml丙酮中，然后依次加入碳酸钾0.92g、1-溴-2-氟苯0.12g，室温反应36h。反应完成后，体系直接过滤，滤渣用5ml丙酮洗涤，合并滤液，硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比20:1洗脱，得白色固体58mg，收率34％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.18-0.20(1H,m),0.34-0.44(3H,m),1.55-1.62(1H,m),2.95(3H,s),4.27-4.36(2H,m),4.71-4.85(2H,m),6.98-7.00(1H,m),7.16-7.20(2H,m),7.39-7.44(2H,m),7.55-7.62(2H,m),7.85(1H,s)。实施例9：5-环丙基-5-(3'-乙氧基-[1,1'-二苯基]-3-基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮的制备(化合物9)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.40-0.60(4H,m),1.36(3H,t,J＝7.00Hz),1.73-1.76(1H,m),3.09(3H,s),4.10(2H,q,J＝7.00Hz),6.96-6.98(1H,m),7.16-7.21(2H,m),7.38-7.42(1H,m),7.50-7.53(1H,m),7.60-7.68(2H,m),7.81(1H,s),9.22(2H,s,br)。实施例10：5-(3'-(3-氯丙氧基)-[1,1'-二苯基]-3-基)-5-环丙基-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮的制备(化合物10)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.21-0.22(1H,m),0.36-0.45(3H,m),1.56-1.63(1H,m),2.17-2.23(2H,m),2.96(3H,s),3.83(2H,t,J＝6.44Hz),4.17(2H,t,J＝6.20Hz),6.97-6.99(1H,m),7.14-7.19(2H,m),7.38-7.45(2H,m),7.55-7.62(2H,m),7.84(1H,s)。实施例11：5-环丙基-2-亚氨基-3-甲基-5-(3'-丙氧基-[1,1'-二苯基]-3-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物11)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.15-0.18(1H,m),0.28-0.44(3H,m),1.00(3H,t,J＝7.28Hz),1.53-1.60(1H,m),1.71-1.80(2H,m),2.93(3H,s),3.99(2H,t,J＝6.48Hz),6.83(1H,s,br),6.93-6.96(1H,m),7.10-7.15(2H,m),7.36-7.43(2H,m),7.53-7.55(1H,m),7.60-7.62(1H,m),7.84(1H,s)。实施例12：5-(3'-丁氧基-[1,1'-二苯基]-3-基)-5-环丙基-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮的制备(化合物12)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.18-0.19(1H,m),0.33-0.44(3H,m),0.95(3H,t,J＝7.28Hz),1.43-1.49(2H,m),1.56-1.59(1H,m),1.69-1.76(2H,m),2.94(3H,s),4.03(2H,t,J＝6.20Hz),6.93-6.96(1H,m),7.10-7.15(2H,m),7.36-7.43(2H,m),7.53-7.62(2H,m),7.83(1H,s)。实施例13：5-环丙基-5-(3'-(3-氟丙氧基)-[1,1'-二苯基]-3-基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮的制备(化合物13)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.18-0.21(1H,m),0.35-0.45(3H,m),1.57-1.60(1H,m),2.09-2.18(2H,m),2.95(3H,s),4.15(2H,t,J＝6.16Hz),4.58(1H,t,J＝5.88Hz),4.70(1H,t,J＝5.88Hz),6.96-6.99(1H,m),7.13-7.18(2H,m),7.38-7.44(2H,m),7.55-7.62(2H,m),7.84(1H,s)。实施例14：5-环丙基-2-亚氨基-3-甲基-5-(3'-(2-丙炔基)氨基)-[1,1'-二苯基]-3-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物14)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.17-0.18(1H,m),0.33-0.44(3H,m),1.51-1.56(1H,m),2.93(3H,m),3.08(1H,t,J＝2.24Hz),3.90-3.93(2H,m),6.15(1H,t,J＝6.16Hz),6.63-6.66(1H,m),6.80-6.85(2H,m),7.19-7.23(1H,m),7.32-7.46(2H,m),7.56-7.58(1H,m),7.80(1H,s)。实施例15：5-环丙基-5-(3'-(环丙乙炔基)-[1,1'-二苯基]-3-基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮的制备(化合物15)参考实施例5合成方法。中间体5-环丙基-5-(3'-溴-[1,1'-二苯基]-3-基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮(0.32g)与环丙乙炔(0.2g)溶于20mlTHF中，加入TBAF0.78g，PdCl2(PPh3)221mg，油浴80℃反应24h。反应完成后，体系冷却至室温，加水20ml、乙酸乙酯20ml，充分振荡，分液，有机相以无水硫酸钠干燥后，硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比20:1洗脱，得白色固体75mg，收率24％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.15-0.16(1H,m),0.30-0.36(3H,m),0.88-0.92(2H,m),1.23-1.31(2H,m),1.45-1.59(2H,m),2.92(3H,m),6.84(2H,s),7.25-7.33(1H,m),7.43-7.47(2H,m),7.54-7.67(3H,m),7.72-7.85(2H,m)。实施例16：5-([1,1'-二苯基]-3-基)-5-环丙基-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮的制备(化合物16)参考实施例5合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:0.16-0.18(1H,m),0.30-0.44(3H,m),1.53-1.59(1H,m),2.93(3H,s),6.76(2H,s,br),7.35-7.54(5H,m),7.59-7.70(3H,m),7.86(1H,s)。实施例17：3'-(4-(3-氯苯基)-2-亚氨基-1-甲基-5-氧代-4-咪唑烷)-[1,1'-二苯基]-3-基-乙基(甲基)氨基甲酸酯的制备(化合物17)与实施例5基本合成路线相似，只是将环丙乙炔替换为相应的苯乙炔结构(该类结构可商业购买，也可由3-取代碘苯与TMS保护的乙炔反应生成)，其它步骤一致。中间体5-(3-氯苯基)-5-(3'-羟基-[1,1'-二苯基]-3-基)-2-亚氨基-3-甲基咪唑啉-4-酮(0.12g)溶于10ml丙酮中，加入碳酸钾0.48g、N-甲基N-乙基-氨基甲酰氯0.3g，室温反应36h。反应完成后，体系直接过滤，滤渣用5ml丙酮洗涤，合并滤液，硅胶柱分离，二氯甲烷/甲醇体积比20:1洗脱，得白色固体0.02g，收率14％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:1.06-1.35(4H,m),2.89-2.91(3H,m),3.03-3.05(3H,m),3.44-3.46(1H,m),7.11-7.13(1H,m),7.28-7.72(12H,m)。实施例18：3'-(4-(3-氯苯基)-2-亚氨基-1-甲基-5-氧代-4-咪唑烷)-[1,1'-二苯基]-3-基-二甲基氨基甲酸酯的制备(化合物18)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:2.87-2.92(5H,m),3.01(1H,s),3.07(3H,s),7.11-7.14(1H,m),7.31-7.73(12H,m)。实施例19：5-(3-氯苯基)-2-亚氨基-3-甲基-5-(3'-(2-丙炔基)-氧代)-[1,1'-二苯基]-3-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物19)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:3.01(3H,s),3.59(1H,t,J＝2.12Hz),4.87(2H,d,J＝2.56Hz),6.83(1H,s,br),6.99-7.01(1H,m),7.13-7.15(2H,m),7.33-7.53(8H,m),7.72(1H,s)。实施例20：3'-(2-亚氨基-1-甲基-5-氧代-4-(3-(三氟甲氧基)苯基)-4-咪唑烷)-[1,1'-二苯基]-3-基-乙基(甲基)氨基甲酸酯的制备(化合物20)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:1.09-1.28(3H,m),2.91(2H,s),3.01-3.05(4H,m),3.30-3.34(2H,m),3.42-3.47(1H,m),6.91(1H,s,br),7.11-7.13(1H,m),7.24-7.27(2H,m),7.38-7.58(7H,m),7.72(1H,s)。实施例21：3'-(2-亚氨基-1-甲基-5-氧代-4-(3-(三氟甲氧基)苯基)-4-咪唑烷)-[1,1'-二苯基]-3-基-二甲基氨基甲酸酯的制备(化合物21)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:2.93(3H,s),3.01(3H,s),3.07(3H,s),6.89(1H,s,br),7.11-7.13(1H,m),7.25-7.27(2H,m),7.39-7.58(9H,m),7.73(1H,s)。实施例22：2-亚氨基-3-甲基-5-(3'-(2-丙炔基)-氧代)-[1,1'-二苯基]-3-基)-5-(3-(三氟甲氧基)苯基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物22)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:3.01(3H,s),3.58(1H,t,J＝2.24Hz),4.86(2H,d,J＝2.52Hz),6.84-7.01(3H,m),7.12-7.14(2H,m),7.25-7.27(1H,m),7.38-7.65(7H,m),7.71(1H,s)。实施例23：5-(3-氟苯基)-2-亚氨基-3-甲基-5-(3'-(2-丙炔基)-氧代)-[1,1'-二苯基]-3-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物23)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:3.00(3H,s),3.57(1H,s),4.86(2H,d,J＝2.04Hz),6.78(2H,s,br),6.99-7.01(1H,m),7.08-7.15(3H,m),7.24-7.27(1H,m),7.37-7.42(4H,m),7.46-7.48(1H,m),7.52-7.54(1H,m),7.72(1H,s)。实施例24：2-亚氨基-3-甲基-5-苯基-5-(3'(2-丙炔基)-氧代)[1,1'-二苯基]-3-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物24)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:3.00(3H,s),3.59(1H,t,J＝2.24Hz),4.86(2H,d,J＝2.24Hz),6.72(1H,s,br),6.98-7.00(1H,m),7.12-7.14(2H,m),7.23-7.53(9H,m),7.73(1H,s)。实施例25：5-(3-溴苯基)-2-亚氨基-3-甲基-5-(3'-(2-丙炔基)-氧代)-[1,1'-二苯基]-3-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物25)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:3.00(3H,s),3.59(1H,t,J＝2.24Hz),4.86(2H,d,J＝2.24Hz),6.82(2H,s,br),6.99-7.01(1H,m),7.13-7.15(2H,m),7.30(1H,t,J＝7.84Hz),7.38-7.47(4H,m),7.53-7.55(2H,m),7.66-7.71(2H,m)。实施例26：2-亚氨基-3-甲基-5-(3-硝基苯基)-5-(3'-(2-丙炔基)-氧代)-[1,1'-二苯基]-3-基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物26)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:3.02(3H,s),3.58(1H,t,J＝2.24Hz),4.86(2H,d,J＝1.96Hz),6.91-7.01(3H,m),7.14-7.16(2H,m),7.38-7.49(3H,m),7.55-7.56(1H,m),7.63-7.67(1H,m),7.73(1H,s),8.00-8.02(1H,m),8.13-8.15(1H,m),8.41(1H,s)。实施例27：2-亚氨基-3-甲基-5-(3'(2-丙炔基)-氧代)-[1,1'-二苯基]-3-基)-5-(3(三氟甲基)苯基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物27)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:3.01(3H,s),3.59(1H,t,J＝2.24Hz),4.86(2H,d,J＝2.52Hz),6.88(2H,s,br),6.99-7.01(1H,m),7.13-7.15(2H,m),7.38-7.46(3H,m),7.54-7.65(3H,m),7.72(1H,s),7.86-7.88(2H,m)。实施例28：2-亚氨基-3-甲基-5-(3'-(2-丙炔基)-氧代)-[1,1'-二苯基]-3-基)-5-(3-甲基苯基)咪唑啉-4-酮的制备(化合物28)参考实施例17合成方法。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6),δ:2.25(3H,s),2.99(3H,s),3.59(1H,t,J＝2.24Hz),4.86(2H,d,J＝2.52Hz),6.71(2H,s,br),6.98-7.05(2H,m),7.12-7.21(3H,m),7.27-7.29(2H,m),7.37-7.53(4H,m),7.72(1H,s)。实施例29：化合物抑制BACE1的活性1.实验试剂TruPointTMBeta-SecretaseAssayKit384(PerkinElmer，AD0258),包含BACE1底物及反应缓冲液。RecombinantHumanBACE1(新购beta-Secretase，Invitrogen，P2947酶，活性138Units/ml)。取138mU/μL的BACE14.9μL与反应缓冲液995μL混合，配制成为0.67mU/μL浓度备用。去离子水(mili-Q－Biocel制备)；二甲基亚砜(DimethyIsulfoxidDMSO，ACROS公司产品，12779)。2.实验方法实验共分为3组，包括：空白对照组、阴性对照组和受试药物组。实验步骤如下：[1]测试样品(S)：①建立BACE1反应体系，在384孔板中，每孔分别加入二甲基亚砜(DMSO)配制的不同浓度本发明化合物2μL(5个浓度级别，从10-5到10-9)；②然后每孔加入15μL0.67mU/μL含BACE1酶的反应缓冲液；③室温孵育30min。④再加入15μL400nmol/LTruPointTMBACE1底物。[2]阴性对照(C)：①向孔中加入2μLDMSO；②然后加入15μL0.67mU/μL含BACE1酶的反应缓冲液；③室温孵育30min；④再加入15μL400nmol/LTruPointTMBACE1底物。[3]空白对照(B)：①向孔中加入2μLDMSO；②然后加入15μL不含酶的分析缓冲液(前述TruPointTM试剂盒中自带)；③室温孵育30min；④再加入15μL400nmol/LTruPointTMBACE1底物。[4]孵育：室温孵育6小时，孵育过程中用盖子盖上板子以防蒸发。[5]终止反应：向测试样品孔、背景孔以及空白孔中加入10μLBACE1终止液以终止反应。[6]使用VICTOR-Ш(PE)多功能酶标仪在激发光波长340nm和发射光波长615nm测量荧光强度。结果计算：抑制率(％)＝[1-(S-B)/(C-B)]×100B：是指空白对照(DMSO，底物和分析缓冲液)在温孵6小时测定的荧光强度。C：是指阴性对照(底物和含BACE1酶的反应缓冲液)在温孵6小时测定的荧光强度。S:是指样品(底物，溶解于DMSO的本发明的化合物和含BACE1酶的反应缓冲液)在温孵6小时测定的荧光强度。测定5个浓度的抑制率数值，计算化合物IC50值。3.实验结果本发明部分化合物的BACE1抑制活性测定结果见下面的表2。表2：BACE1抑制活性测定结果实施例序号抑制率(％，c＝0.1μM)IC50(nM)139.51660265.3407790.7134894.584.7988.83031069.16031169.45411376.93311590.81451962.21822287.92822491.91272594.91292687.92322777.12642878.7270结果表明，本发明的化合物能够有效地抑制BACE1的活性。尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解：根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。当前第1页1 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